1625915648-5ed1152c004edfe493dad6e5388afaf3 (843956), страница 96
Текст из файла (страница 96)
!)Гиы н!о Пали ряхп лзялеиис В ниигткс, лота нно В кзжлом глучщ <.озласт разнос лзнлсшн кзк из мсмйр шу, !зх и из цитогкслст, и з»и Вгличины пг инке>иы. Даплсн!н н ниисгк( нс лат ииформаи!и о даю< нии из мсмйра>у, тал кзн имсиг место гаи( иис ланл< и>ш из зз ш ттпо Нкпо каин »ляриого лзнлгпия, Вьногы колонки жидкости н.и! Ногреншос>п> ишочника лзнл(иия. Таким (бр>к>ол!. р<зльпый фактор, Возле>н'тз) книий нз М('К, зто наяжги!и' м< мйрзиь<, кон>р(х яячяс>гя функцией дашсння В ишнткс и радиуса нскринлсння мсмйрзиы, з и( !Пх>сто Приложении>е х ией лзнлсннс. Спязь натяжения мемГ>раны кзк функции язвления В ра(сй пине>кс и рзлиуса искривления м(мйрзнь> сложно знал!ыирозаты В изгтоящсс Время нс сущ(- г>пуст никакого щннойз оирслслить искризлсни( мсмйрзиы Г>(;! Ншн>срслс)п)гииой Визуалпзашн н измерения пч>мггрии фрзгме!пз мембраны иол ра(сЬ- ИИИС! Кой 11ролсмоп<прирошшо, что приложенное лзюн ине щ личиной !О мм рт.
ст. молин ирозуцир(нить натах(- инг мембраны порядка 3,9, 2.9, 1,8 нлн 1,2 3!Нн,)сл> В запнси мое ! и от радиуса зоны нол ра! сЬ-шн >сткой, р !нного 3, 2. 1, 0,6) мкм гооп>стстщ'иио. Однако радиус кончика шшеткн — не лучший ш>- дикатор радиуса искшин ния, поскольку В конфш урации ссП-а! (зсЬей мембрана ззиечзтывает не только кончик рз(сй-иии(тки, но и от>н>сн»(льно глубоко В иес Входит. Таким образом, зна штсльным доиушспнем является то, ч»ю форма мембраны на кончике РВИСЬ-иипгткн — идеальная полусфера. Сф(рнчсгкая область В ран.й-иипеткг исто Возникает очень далеко От (( кончика, так что Вся зона мембраны, запс итаншсй рагсЬ-Пни<и ку, имсгг Й-<К>!)ззиую форм) с длинной прямой частью мембраны, изхолящейгя в тесном и прямол! ко>пакте со стекла!шой стенкой рагсЬ-пипетки.
Преимуп<сствснно зта прямая часть мембраны и есть сторонз П!Пз ьеа). Избл!олсння я световой мнкр(ккоп. также как и в электронный микроскоп, Выязнлн цитоплазмзтин скис н цнтосксл<.-гиые структуры Внутри рагсЬ-пи! <С31(Н. Вьшокорззрсшакиизя микроскопия иоказынаст, что созлзнне о»рнцательиого давления В ра(сЬ-ииисткс иропориионально уя()лпчнВзсг В и(й зон)' мембраны. Таким образол<. гфсра В кончике ра(сйшшс» ки уз< лнчинзстся ири по пи Постоянной м(мб- раин>й толщшн. Соапктстисиио, у!нянчение В>и>- нгрхиогти .пой зоны В течение рзстяжгина ис обуглоалелио мсмйрзнныл! утоичсшим, з .шянсит от ир!пока лиш!Лон, ио(туиающих от степки ра(сЬ.
шин"тки. Реп(страцня активности одиночных каналон в конфигурации )уЬо)с-сеП от маленьких клеток. Исс. И.<о[юниз Вс»нчипы !ип>жсн>и! мсмй!щиы мзлсиь> их кзк' ток и конфигурации и Ьо!(-с( П В занигимош и ог созданного и ии!Нтке лзнлсння о< но(3!Ль»!лис! Нз ирслсинлсини, свящпиом с .>книнзл( ит!Икпю п!лр<н»(пи нтко>о ланлеш>я и пзтяжгния лнмйрзны. У тонкое!Синых сфер 3 илростъп нч(гкос лазл< нис (Р) и нз! яжспис стенки (Т) связаны.щлоиом Лаилзгз, !Л< (!, диаметр сферы: Т=.— '. Р(7, (16.1) !1;>учсиис лаял( пия В >Н1Н( >кс >н) о!н(3>пени!о к иатялцишо мсмбрзнь> было ирощлсно и конфи!урашш ТСЬой -ссП иа сфсробластзх дрожа<( й рз.>(! и >и ых размероя.
В то Время как крнззя Всчичи!ш! мслаиос(нгн» НВ>нно тока ио отионн ник) к ирнло>ксш!ому и ниистку давлению показы наст четку!о зависим(>г гь от днам("г ра сф( ройлаш а. крш)ыс »окз но оп аннин к) к натяжения> (рзссчитзниые ио закону Лзилзса) были (и записимы <и. !<Пал>('!Пз. Регистрация одн>ючнь)х МСК на фоне раадування клетки иосредствол! гниотоннческого стресса. Если МСК идниот р(ип н регуляции объема клетки, тОГДЗ РСЗОИИО СПРОСИ Г>ь 6УДУт ЛИ ФИЗИО. ЮГНЧССКНС ИЗ- мснсшш В ойьсм< кле! кн нролуиироязть лошъпочнос натяжение мембраны.
ч!ойь! зклпви!инзть ЫСК. Хотя м!Ин»н тины клеток мсияп>г )итяж< н!и м< мбрзны ирн гииотоничсском с»рсссе, Возможно применить закон Лапласа (см. уравнение ! 6.! ) и гч!пать, чж> мембрана ирслстанляет собой илгальиу>о:)ласти илгкук> снстсл!у. В зтом случае лопозиптсльнос нляжеиис мел!йра. иы ири ссП-3!((з<ЬС(! рз(сй (()7). которое агсоиннругп ся < о! носи»сльным уаелич< !Ин м птн рх>пх тиой зонь! рагсЬ 7)Л,>Л, может йьп ь опнса<о нз оснонзипн ириме— НШИ<Я ЗЗКОНЗ ГУКЗ: ЬТ= К,(АЛ,'("!), (! 6.2) (лс К„. злас! 1!чсгкий ю) х)х)>ици< и !.
1!олойиыл> образом кл(тки, которыг ) Вслнчизакн спою пощ рхиос гь При гииотоннчегком с»рсс(ю, могут )'Всли )и!3>п1 !итяжши1<' мсмйр)!Пы Рзсч(гп 3 пОказали. '!то нз!Ял(сн3и' лнморд31ь> юиткн н 0,009 лин,'гм, которос нозннкаст ирн увели ниии объема клс» кн на 1 ".ь, лиикст йь!ть Лостз'п>чным Лля зктннации МОК. Регистрация активности одиночных МСК ирн растяжении целой клетки.
К сожзлсшио, пока не,юреги("(риронапз актнни<х»ь елшшчиыл каиана В коифшурашн! Сей-з!(ас)и<!. Вызванная р;и-гяжснисм ц(лой клетки. 1!ри,щиечагынапии м< л>Прап>й с!склянной пи- ГЛАВА 16. Ионные каналы н токи через ннх 335 и< | ки. вилял|о. невозможно,т и .кни | рз1«П и гоиряхи ||- ил|и г и й |н>.|мгл|брзнииги шпигк«лша фили иски Рзг|яиугься ньитгс илзльиой чатио кл<|ки ири сохранилии ссП-а|ас)к<1. 1зю|к| обр;иом, иокз иш визмол<иоши прямо ирш<.идьиитыитяжени< к к.и'|кзм (пии растягинаиш .|з их концы) ири одионр< и< иной рсгнстраиш,ю>п>азана| и МС'К в р< як||хи г< П-з1!зс)те<1 Ра!г)|.
О |нико иио|л | во мни| >н> иабл|оип, лся |<ль иогть единичных каналов (с ии.иим !лир«испи«л|) ири регистрации |икин ит м|исньких целых клси>к или вг. зик< |. 16.5.3.Изучение токов в конфигурации в<г))о!е-се!! О, -0,50 -1,00 1,50 Рнс. 16.22. Кривые, лолученные методом ра|сьчхавр е конфигурации е>ьс!е-се!1 нэ карднсмнсцнте желудочке до (снняя кривая) н после его Растяжеиня (краснея кривая). Растяжение харднсмнацнта приводит к смещению е отрицательную область тока на фоне лсдаержнеа: Емсгс лстенЦнала (лскезэнс стРелкой). Показаны 1.-|нл Са'-тсха (|с„.,) н лсзДнни ток (1,), пРичем ксмлонент еыхсДЯЩегс КЧ|сха е ' лсзднем токе лсдаелен ионами сз'.
ыачтск лодавлен лслдержнеаемым не уровне -45 мв потенциалом мембранный лстенцнал смещался ст поддерживаемого лс|енцнала дс О мн (ло каглк|л А, кее1еча 1, !зелье<0 с. 51ге|сь-ас1ыа1ед ссггел<з |и <>ел<лев|а< вуосу|ез евр!ниве але еггьу>ьвсвел>с е!(ес<з |лсгеазе жяь ьурелгсрьу, се><)!с»езси>аг йез 2000, 48, 409 — 420) Прямое механическое растяжение клеток. 1)вибо'|се яро<-п>й формой м< х|шичсской с |имуляции дочж ио быть рзшяжсиис целой кл<чи.
К < ожалсиию, зто крзйии гл<июл>, т>к к;|к в бильииннта иргиарзгон |и' и)хдс иьлясп я возможным ирилрс| иешк раст>и нвак>- |цих сисц м к клеть< без локзльиоп> рагтяжения мембраны и>и< д,оке <ю иоврс>кдений. Скслеп|ые мьиицы - один из ирсизратов, | и щ>зможно и)щмо< рас шж<чш< клеток. 11есмотря из го, ч |о ири эксисрим<нтзх |ибл|одзлогь вызваии<х рзстяжсиием увсзичсиш а|угрин |еточшн.о С'а . оио нс зависело о| инск нтичиип>..<)ш свидет«льгтнинзли, пи ка>илы мембраны клетки ис участвуюг в ироцессах рас|яжсния. В гс времена МГК но внутриклеточиых органеллах с|цс нс бьии обнц>ружены. [лздкомыищчиыс клетки крон<ноевых согудон и мочевого иузыря растягивали ио слсдукнцей схеме: ии |зла один, з .ит< м второй концы к.нтки вводили н хи|крок|ил|.1ляр|,|, у< |а|ив.ни|и,н |и микром|иии|).|ягорах.
Ргпнтрирухнцая рз1«П-циника ио,ия>ди.игь к диору клетки. 11)и и>моши микромзиииу>иггоронувс. .|и и|ияли р|к гпииш мел<лу каиилляр|жш и. с.цдовап лаю, р >стягивали кл<-па|. Ьь л лримсиси и другой иод>и>д. Клк| ку ра'клады|я|.и| |и два |ирал,ильио идущих с|скляииых калил лярз. к ко|орыл| оиз своими ю>иц ж|и и ирили|илз.
У) |а |ир,| калил.тнр<ш а<ран с была иодгислииа |, ми к. ром;ишиу.шторзм. Зспсм к ц<чп ру к.итки |и>д<к>дили рз(<11-иииггку и <х у|исгтв.или рз<< 11-<)зл>р в конфигурации в 1|о!с-ссП. „(а»с< зиз.|о| ичнь<м выисоиигзи- ИОХ>< ГИОГОбОМ рагтя| Ииадн Ксц"| Ку, В:>П1Х СГ|)"|Зяь были,ирщ истрироваиы вызвзниьи ра.гяжеши"и ихозя1иие тою|.
1)анбо |ьшиг ироблсмы ло:ишкли с кзрдииыиоцизами. Кар>инх)нани>тоги лотра<или л|но| о в)хмели, исслс ,|уя к<с!оды, ири иом<нци которых можно ирикрсли|ь растягнвзющие сисчемы к к'и | кс. чзобы измерить зависимость мсхапогс|и итивиых ионных токов от ее длины. Раисе использовали карги>ионы« шп'н |ь ш стек |яииые каиилляры.
которые хороню ирикр<ч|ляются к мембран . Работа с карбоиовыми нитями ирод«мои< и рироиалз, что нз|яжеши м<.мбрзиы лри ра<пяж«иин ючеткн достаточно одноРод|н>, од| и ко шп < риалы меж.|у сарком«1>зми и< изменяя>тся. Возможно, о|о озиача<"г, по сжимаемый зииарзт гуи|сшвс|шо же<який лонер«к диаметра волокна >зо иоследисго г|рсм< ни нс удавалось растян<дгь кардиолшоцит и одшиременно зарегистрировать <окн н условиях фиксацш| | и>тсицизла в конфигурации хс!ш)е-с«П.;-) го сделали только в Йуйч)1:5 РАЗДЕВ П.
Общая фнзнодогня возбудимых тканей 0 мВ Рнс. 16.23. Вельт-змперная характеристика 1, дс (синие треу(сиьниии, объединенные синен хряесн) н после растяжения хнетхн (крас ные треугоньннхн. Объединенные красной кривая). Кроме того, продемонстрировано уменьшение Ытипа Са '-тока которое всзннхвет на фоне растяжения хпетхн (хрзснь>е кружочки обьеднненные красной хривсн) пс сравнению с исходным состоянием (синие кружочки, объединенные сннея кривой). Уменьшение 1.-тяпа Са '-тока происходит е результате выхода Са ' нз сэрхсппззматнчесхого РЕ- тнхунума через Обнаруженные тзм МСК.
Вследствие этого количество внутрнкпетсчнсгс Св ' увеличивается, градиент кснцент- > рации уменьшается н, следовательно, уменьшается и <.-тнп Са тока (но Капаю А., Кше>еиа 1., >зесье>0 б. 81(е<сЬ-ас<>уа(еб сиоео(з (н уеп<пси!зг н>уссу>ез а(яр!зисе знв зг(Ь>ЧЬ(повеою ебес$з >ьсгеазе йч<Ь Ьурецюрьу Сзн5юиззси1аг 3Чез.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
