Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (522944), страница 38
Текст из файла (страница 38)
Е1ес|горога|юп оГ тап ипа1|ап се!Ь ь ияиа11у сагпес) ои| !и Ьиу(егеб яа!ше яо! шюпя ог си1|иге тпейа ияп8 а сарасЬог о( 25.0 РР |чЬояе йясЬаг8е Ьая а |нпе сопя|ап| оу -0.5 тпяес. ТЛе 1|е1т) яттеиф| (Е) о( |Ье ри1яе чапея |п т)(тест ргорог6оп |о |Ье арр1!е|$ чоЬа8е (У) ап|1 ш Ычегяе ргорог|юп |о |Ье йя|апсе (т() Ье||чееп |Ье ||чо е1естгобея, |чЫсЬ Ь ияиа11у дегегт)пес( Ьу |Ье 6хе о( |Ье сиче||е йгои8Ь вчЫсЬ тЬе ри1яе |гаче1я. Е = Р(У,|$) чо Ф ея |я о > Р!СЕ(ЙЕ 16.5 СЬапеея |п (Ье Е!есяпс Р!е16 дог!и Е!ее|го ога6оп Типе соигяе о( |Ье е!ее|ос ЕеЫ Еепегатеб Ьу сарасЬог 6)всЬаг8е, \' гергевеп|в |Ье Етпе сопвтапт (ог йе бесау о( йе е1ес|тк ЕеЫ; (т)ЕС, |чЬете С Ь |Ье сарасИапсе о( |Ье йвсЬаг8е сарасЬог ап|$ Е ыЬе гев)втапсе о! |Ле 6(всЛаг8е ип(1; йе гея(втаисе о! |Ле ватпр1е се(1 ияиа1!у |$е1епп)пев йе с(гсш| гев)ятапсе.
(т) Т|тие. ч те Мояг тапиуасгигегя ргочЫе сичег|ея |п |Ьгее яхея, |чЬеге |Ье (птеге1естгот]е йя|апсея аге, теяреп|че1у, 0.1 с|п, 0.2 с|п, ап|$0А сп|. $9Ьеп 1000 У аге |$(всЬат8е|$ |и|о |Ьеяе сичепея, Е, ь 10,000 |Уст |и |Ье 0.!-стп сече|ге, 5000 У/сп| (п |Ье 0.2-ст сиче||е, ап|$2500 У/ст ш |Ье 0.4-сп| сичепе.
ТЬе я)таре о( |Ье ри1яе Ь десегт(пес( Ьу |Ье бе68п оу |Ье е!ес|горога6оп меч(се. ТЬе |чаче (ого| ргобисед Ьу и|оп соиппегс|а1 тпасЫпея ь Ытпр1у |Ье ехропепба! т)есау ра||егп оу а |$!ясЬаг8(п8 сараспог. 1п яотпе |урея оу е!ес|горога6оп аррататияея, я9иаге |чачея сап Ье 8епегагес) Ъу гарЫ1у !псгеаяп8 |Ье чо1|а8е, тпаш|ашш8 Ь а| |Ье бебгеб 1ече1 (ог а ярес(6ед типе (ри!ве |ч(61Ь), апд |Ьеп гарЫ!у тедис(п8 йе чо1|а8е |о хего.
5т(иаге ри1яея сап Ье 8гоирег( |иго пчо 8епета! са|е8опея: чету ЫЕЬ Ее16 я|геп8й о1 чету яЬот| |1ига|юп (|ур|са1!у 8 $|У)снап (от 5А и|вес) (Ь(ешпаии е| а!. 1982), ап|1 1о|ч Ее!6 я|геп8|Ь оу |пе|$|шп |о 1оп8 |!ига|!оп (е.8., <2 $|У/снап Тот >10 тпяес) (е.8,, р1еаяе яее Ро||ег е| а1, 1984). Л1|Ьои8Ь 6!Т(егепсея ш |Ье еу(ест(чепеяя оу |Ьеяе чагю|ь ъчачеГоппя Ьаче Ьееп герогсеб (тоги 6тпе |о типе (е.8., р1еаяе яее Кои!хоп ап|1 уее 1987), |Ьеге ь по ечЫеисе |Ьа| апу опе о( йети ь сопяя|еп6у Ье|тег йап апу о|Ьег.
Рог аП ргас6са! ригровея, йе ехропеп6а! |чаче (отта ргобисет( Ьу соиипетс|а! е!ессгорога6оп тасЫпея аге рег(ест!у вать(асгогу. !нуогтабон РанеЬ 26.57 Ор6гп121пе Сопс116опа Еог Е!ессгорога6оп А ша!ог асЬ апса8е оЕ е1ессгорогасюп очес ойег гпесЬосЬ оЕ сгапаЕес6оп Ь сЬас !с тчог(са Еог а чегу счЫе чапесу оЕ псапипаПап сеПа, !пс1исс!п8 сЬоае сЬас аге сППки1с со сгапаЕесс Ьу ойег гпеапа (е.8., р1еаае аее Россег ес а1, !984; Тиг-Каара ес а1. !986; СЬи ес а1. 1987!. Ночгечег, с(еар!се 1ь ас(чавса8еа, е!ессгорогассоп ь пос аЬчауа йе шоас еЕ6ссепс ъчау со !псгос(исе РХА шсо а рагски!аг сеП Ппе. Рог ехагпр1е, С05 сеПа аге сгапаЕессес! псоеп еубс!евПу Ьу сЬе РЕАВ-с(ехсгап/РЫА шесЬос( (К1ихеп апс( ЪИЪЬегс 19931, ~чЬегеаа Сог ойег сеП Ппеа, 1сроЕес6оп ог ро!уЬгепе сгеаспсепс аге сЬе сесЬпк(иеа оЕ сЬоке (е.8., р!еаае аее !сап8 ес а1.
199!!. То Еспд оис тчЬесЬег е1ессгорога6оп Ь а сьеуи1 шесЬос( оЕ сгапаЕес6оп Еог а рагссси1аг сеП Ппе, !с ь ипрогсапс со иае а гав8е оЕ Егер зсгеп8йа апс( ри1ае!еп8сЬа апс( сЬегеЬу со еяаЫьЬ сопс66опа йас Вепегасе йе гпахсгпшп пшпЬега оЕ сгапасессапся 5исЬ сопсПсюпа Ьаче Ьееп герогсег! Еог >50 суреа оЕ псагпгпаПап сеПа, авс( Ь Ь аошессшеа роаа!Ые со ааче а 1ос оЕ чгог(с Ьу ягпр! у геасПп8 сЬе ге1ечавс 1ссегасиге. Моас оЕ йе соспрапсеа сЬас аеП е! ессгорогасюп ссеч!сеа ргос(исе ехсеПепс ир-со-ссасе Ьпа оЕ рарегсНп ьЫсЬ е1ессгорога6оп Ьаа Ъееп иаес( Еог сгапаЕессюп, ТЬеае Ь!Ыю8гарЫеа аге ойеп йе еаа!еас счау со Ваш ассеы со шЕоппа6оп аЬоис сЬе ргорег6еа оЕ а рагски1аг сеП 1спе ог Па с1оае ге! а6чеа.
Но1чечег, Ьесасье оЕ чапассоп ш ргорег6еа Ъесъчееп с!!ЕЕегепс си!с!часа оЕ сЬе аагпе сеП Ппе, п ь ипрогсапс Еог шчеасс8асога со сопбпп сЬас сЬе сопсПсюпа с(еасг!Ъес( ш йе 1сгегагиге аге оргппа! Сог сеПа Вгоъчп ш СЬе!г 1аЬогагогу. Весаиае сгапзЕес6оп апс1 сеП ЫПш8 аге !пс(ерепссепс!у с(есегш(пес! Ьу усе!6 ягеп8сЬ (СЬи ес а1. !9871, П !а Ъеас со ехроае аПс(иоса оЕ сеПа со е1ессгк Пе16а оЕ !псгеаа!п8 асгеп8сЬ ь!сЬ Пспе сопасапь Ьепчееп 50 апс( 200 гпаес.
Рог еасЬ Пге!А асгеп8сЬ, гпеааиге ( ! ! сЬе пшпЪег оЕ сеПа сЬас ехргеь а сгава(ессегс герогсег Пепе (10 — 40 РВ(ш! оЕ 1шеаг!хес! Р1аяпЫ Р(4А ш сЬе е1ессгорога6оп Ъи((ег! апс! (2! сЬе ргорогсюп оЕ се(Ь сЬас зигчАче ехроаиге со сЬе е1есспс Пе! й Р!а6п8 еЕПс!епсу ь а гпоге ассшасе псеааиге оЕ сеП аигч!ча! сЬап аса!пш8 ь!ЕЬ иса! с!уса япсе, айег е1ессгорогасюп, сеПа сап гегпа!и реппеаЫе со сбса! г(уеа аисЬ аа сгурап Ыие Еог ап Ьоиг ог пчо. ТЬе ЕоПоипп8 аге осЬег чапаЫеа сЬаг Ьаче Ьееп герогсег! со аЕЕесс сЬе еЕ6с!епсу оЕ е1ессгорогасюп.
° ТЬе гетрегасиге ау гЬе сеИа Ьеуоге, гЕит!нд, анИ аусег е!ессгорогапон (е.8„р!еаае аее Россег ес а1. 1984; СЬи ес а1. 1987!. (7аиаПу, е! ессгорогасюп ь сагпес1 оис оп сеПа сЬас Ьаче Ъееп ргесЬП1ес1 со 0 С. ТЬе сеПа аге Ье16 ас 0'С айаг е1ессгорогасюп (со гпаспсасп сЬе рогеа сп ап ап ореп роясюп! апс( аге с61исес1 шсо счапп шесПшп Еог р(ас!п8 (КаЬисьау ес а1. 1987!.
° ТЬе сонсеиггаИон анс( сонуогтаг(ои оЕ ЕЬе РЬЕА (е.8., р!еаае аее 24ешпапп ес а1. !982; Ропег ес а1. 1984; Топпе8иехо апс( Кеа6п8 !986Ь Ыпеаг Р!4А Ь ргеЕеггес! Еог зсаЫе сгапа(огшас!ов; с!гси1аг РЪСА ь Еог сгапяепс сгапаЕес6оп. Ргерагасюпа сопсашш8 РС4А ас а сопсепсгасюп оЕ 1 и8(ш! со 80 и8! гп! аге орсона!. ° ТЬе хгаге оЕ гЬе сеИя ТЬе Ьеас гееи1ь аге оЪса!пес( ьПЬ сеП си1шгеа |п сЬе всЫ-!о8 РЬаае оЕ ВгоьсЬ сЬас аге асбче!у гПчЫш8. !б.58 СЬаЕ|гет 16: Епггос)истц С!овес) Сепез т'го Си)ситес) Матти)|аи Се)Ь ЕАЕГЕЕАЕ)Ь)СЕЯ а)-Моз1й М.1. апд РиЬез С.К. 1973. ТЬе Ыпескз оЕ РЕАЕ-дехсгап шс1исес1 сей зепьйыпоп со капзгессюп, Е Сеа.
Ст)то!. 18| 189-193. Апдгеаьоп С.Г, апд Ечапз С.А. 1988. 1псгодисйоп апд ехргеьяоп оЕ РНА гпо1еси1ез!п еи1сагуойс сей| Ьу е)ессгорога6оп. ВюТесбт9иез б| 650 — 660. А|Ьгпап С.К, апд РачЫьоп К.Г. ) 985. Н|цЬ зропсапеоы тисасюп утес)иепсу оЕ ВРЧ ьЬии)е чессос 5ота|. СеП )Ио), Сепес. 11:499-504. АиЬ~п К.)., Че|пйдд М., апд Расегюп М.С.
) 988. Гассогз |пйиепс)пц еЕ6с|епсу апд гергодис|Ь|!|су оЕ ро)уЬгепе-аяЬсед цепс сгапзуег. 5ошаис Сей Мо!. Севе|. 14| 155 — 167. АиЬ|п К.1., ЧтешуеЫ М., ТацЬал М., М)гаауапз К., апс1 Расегзоп М.С. 1997. Н)цЫу ейес6че дейчегу оГ Гоге)цп РЫА со адЬегеш сей| ч)а ро!уЬгепе-РМ5О-азяьсед депе сгапзЕег. Мейой Мо!. В|а). 62: 319 — 342. ВапцЬат А.Р. 1992. 1.|рзотез: Кеайтшц |Ьеи ргопизе. Нозр.
Ртаст. 27| 51 — 62. Вашп С., Рогзсег Р., Неце|чйсЬ-ВесЬег 5., апд НагЬегз К. 1994. Ап орппнгес) е)ессгорогабоп ргососо) аррйсаЫе со а |чЫе гапце оЕ сей )шез. В)оуесЬп)9иез 17: 1058 — 1062. ВеЬ| ).-Р., Реп|епе|х В., Гоей1ег 1:Р., апд Регет-Мши1 1.!989. ЕГГ|с)епс цепс сгапзуег |пса гпапипайап рйп|агу епдосппе сейычйЬ Проро1уапипе-соасед РНА. Ртос. №И. Асад. 5сц 86: 6982-6986. Вегсйпц Чт., Нипцег-Вегсйпц К., апд С!ше М.-).
1987. 1псгапис1еаг орса)се апд регязсепсе оЕ Ь|о!оцдсайу ассйе Р)ь)А айег е1есиорогайоп оЕ гпапипайап сейз. Г В)осЬеш. ВюрЬуз. Мейо|Ь 14: 223 — 232. Вопд ЧС. апс1 Что)д В. 1987. Ро)у-1.-огшй|пе-тейасед сгапзЕесбоп оЕ гпапипайап сейз. Мо!. СеП. Вю!. 7: 2286 — 2293. СаЬапаз М.)., Статс)иет Р., апд Модо!ей ). )978. Риа) шсегуегепсе оЕ Ьуцгопсус)п В чдй НЬоьоп|а) сгапз!осасюп апд |ч|й аттоасу)-сКЫА гесоцшсюп. Еит.
Е В)осЬет. 87: 21 — 27. Са)оь М., ГеЫсосчзЫ 1.5., апд Во|сЬап М.К. 1983. Н)цЬ тптайоп утес)иепсу )п РНА сгапзГессед )псо тапипайап сей|. Рте. №с1. Асад. 5с|. 80: 30! 5 — 3019. СЬапеу )Х.б., Но|чагс1 Р.К., Ройагд ).Ч'., 5айиз6о 5., апд 5сап)еу Р. 1986. Н)цЬ-!ге|)иепсу сгапзГессюп оЕ СНО се)Ь ияпц ро)уЬгеве. 5отаС СеП Мо!. Сепег. !2: 237 — 244. СЬапц РГ. )994.
Са)с)шп РЬоьрЬасе-гпейасед РНА сгапьГес6оп. )п Сепе сЬетрги исз: Мейад| аад арр)капот ауйтес| цеае гтат|фет )ед. ).А. Ч|о)Ге), рр, )57-179. В|гЫ|аиьет, Воз|оп, Мш*ас!шьеиз. СЬеп С. апд О)сауата Н. 1987. Н)цЬ-ей)с)епсу сгапьГоппабоп оГ татптпайап сей| Ьу р!аяпЫ РЫА. Ма1. СеП. В|о1. 7| 2745-2752. — — —. 1988. Са)сиоп РЬозрЬасе-п|ейасед депе сгапьЕег: А ЫВЬ1у еГГ|с)епс сгавзуессюп зузсеп| Гог зсаЫу сгапьуогш)пц се1Ь |чйЬ р1аяпЫ РЕПА. В)оТесЬп)диез 6: 632 — 638.
СЬегтодп!с)с Г.'гт., 5о1|о!оч А Ч, апд Вид1сег Чб, 1990. Е1ессгоьйпш!асед ирса1|е оЕ РЫА Ьу Прозотеь. В)осЬтт, ВюрЬуь. Лс|а 1024: 179 — 183. СЬи б. апд 5Ьагр РА. )981. 5)/40 1|НА сгапзуесбоп оЕ сей| |и зырепяоп: Апа)уяь оЕ еЕ6с)епсу о! иапзсйрсюп апд сгапз1а6оп оЕ Т-апс|цеп. Севе 13: 197 — 202. СЬи б., НауаЬа|ча Н., апд Вегц Р. 1987. Рдес|горогайоп Еог йе ецйс|епс сгапзЕессюп оЕ тапипайап се1Ь сч|й РНА. Нис)е)с Лсий Вез. 15: ! 31)-1326. Соопгос1 А., !6 Е-О., апд Ноплсг М. 1997. Оп сЬе тесЬапЬш оЕ РЫА сгапзуеспоп; Еуйс)епс цепе сгапзЕег |ч)|Ьош ч1гизез.
Севе ТЬет. 4: 1313-1321. Сот|ага С.М. апд Реагьоп М.Г. 1981. ЕпЬапс|пц |Ье еГйс)епсу оЕ Р)4А-тейасед цепе сгапзуег |и п|апнпайап сей|. 5ожас Сей Мо!. Севе|. 7| 603 — 616. де Г|иче С., де Вагзу Т., Роо1е В., Тгопес А„Тийсепз Р., апд стаи НооЕ Е. 1974. Гузозопюсгорк ацепя. В|осбет. РЬаттаса). 23:2495-2531. де )а 1.ипа 5., 5опа 1., Ри)Ыо Р., Огбп!., апд )ип)пег А, )988. ЕЕ6с)епс сгапьуогшас)оп оЕ гпапипайап сей| чд|Ь сап|стась сопса|шпц риготус)п-гез)ьсапсе гпа|1сег. беие 62: ) 2) — 126.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
