Диссертация (1174246), страница 9
Текст из файла (страница 9)
При этом использование пептида не вызывало значимых изменений в активности АсАТ. Активность ЩФ пристрессорном воздействии возрастала на 31,1% (р≤0,05) (рисунок 7). ВведениеАКТГ4-7-ПГП не вызывало достоверных изменений в активности фермента.47Таблица 2 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП при хроническом эмоционально-болевом стрессе (M±m)ГруппаПоказательСтрессированные животныеКонтроль безстрессаВведение АКТГ4-7- ПГП в дозе:Контроль5 мкг/кг50 мкг/кг150 мкг/кг450 мкг/кгСыворотка кровиАлАТ, Ед/л36,2±2,146,31±4,661,5±7,942,6±5,032,6±2,2*35,7±2,7*АсАТ, Ед/л123,8±6,7126,2±6,9128,1±9,9112±8,9121,8±6,1118,3±9,7Общий белок, г/л67,7±1,759,7±1,2167,7±1,6*65,5±1,5*63,9±1,5*62,1±1,4Мочевина, ммоль/л5,4±0,33,9±0,314,9±0,4*4,3±0,25,4±0,3*3,6±0,3ЩФ, Ед/л92,7±8,3134,±18,11120,3±17,9115,6±15,3139,4±14,8134,4±18,1Гомогенизат печениМДА, мкмоль/мл1,5±0,12,1±0,211,8±0,12,1±0,21,5±0,2*2,0±0,3Каталаза, мккат/л3,5±0,24,0±0,24,1±0,33,7±0,24,0±0,34,1±0,3СОД, усл.
ед.2,7±0,12,3±0,112,5±0,12,7±0,1*2,4±0,12,5±0,2ОАА, %33,2±0,829,3±1,3129,3±1,431,8±1,130,4±1,130,9±1,1Примечание. * – р≤0,05-0,001 по сравнению с контрольной группой крыс, подвергавшихся стрессу;трольной группой крыс, не подвергавшихся стрессу.1– р≤0,05 по сравнению с кон-48Рисунок 6 – Изменение активности сывороточных аминотрансфераз привведении АКТГ4-7-ПГП в условиях ХЭБС50*403012010%0АсАТАлАТ-10-20*-30*-40Контроль5 мкг/кг50 мкг/кг150 мкг/кг450 мкг/кгПримечание. * – р≤0,05-0,001 по сравнению с контрольной группой крыс, подвергавшихся стрессу; 1 – р≤0,05 по сравнению с контрольной группой крыс, не подвергавшихся стрессу.Рисунок 7 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП на активность щелочной фосфатазыв условиях ХЭБС3513025201510%5щелочнаяфосфатаза0-5-10-15-20КонтрольПримечание.стрессу.15 мкг/кг50 мкг/кг150 мкг/кг450 мкг/кг– р≤0,05 по сравнению с контрольной группой крыс, не подвергавшихся49Учитывая более значительные изменения метаболических процессов в печени при хроническом стрессорном воздействии, для оценки синтетическойфункции печени в сыворотке крови наряду с концентрацией белка определяли исодержание мочевины (рисунок 8).Рисунок 8 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП на показатели белкового обмена в сыворотке крови при ХЭБС50*4030*20*10**Общийбелок%0Мочевина-10-201-30-401-50Контроль5 мкг/кг50 мкг/кг150 мкг/кг450 мкг/кгПримечание.
* – р≤0,05-0,001 по сравнению с контрольной группой крыс, подвергавшихся стрессу; 1 – р≤0,01 по сравнению с контрольной группой крыс, не подвергавшихся стрессу.В контрольной группе животных на фоне стресса происходило уменьшениеконцентрации белка на 13,4% (р≤0,01). Введение пептида способствовало повышению содержания белка до исходных уровней с наибольшим эффектом при использовании наименьшей из использованных доз – 5 мкг/кг (на 13,3%, р≤0,001).По мере увеличения дозы влияние АКТГ4-7-ПГП ослабевало (50 мкг/кг – на9,6%, р≤0,01; 150 мкг/кг – 7,0%, р≤0,05) и после использования наибольшей дозы450 мкг/кг различия с контрольной группой не были достоверными.50Содержание мочевины в сыворотке крови контрольной группы стрессированных крыс уменьшилось на 37,5% (р≤0,01) в сравнении с показателем интактных животных.Введение АКТГ4-7-ПГП в дозах 5 мкг/кг и 150 мкг/кг способствовало увеличению уровня мочевины на 25,1% (р≤0,05) и 36,6% (р≤0,01) соответственно.
Вслучае использования пептида в дозе 50 мкг/кг также имела место тенденция ккоррекции вызванного стрессом сдвига (увеличение уровня на 10,6%), однако достоверных значений данные изменения не достигли.Хроническое стрессирование, как и острое, приводило к активации ПОЛ,что подтверждалось увеличением содержания МДА в гомогенизате ткани печени(на 31,9%, р≤0,01) в сравнении с показателем группы интактных животных (рисунок 9).Рисунок 9 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП на содержание МДА в гомогенизатетканей печени при ХЭБСМДА401302010%0МДА-10-20-30*-40Контроль5 мкг/кг50 мкг/кг150 мкг/кг450мкг/кгПримечание. * – р≤0,05-0,001 по сравнению с контрольной группой крыс, подвергавшихся стрессу; 1 – р≤0,05 по сравнению с контрольной группой крыс, не подвергавшихся стрессу.51Влияние АКТГ4-7-ПГП на исследованные компоненты антиоксидантнойзащиты проявилось только после введения в дозе 50 мкг/кг в виде повышения активности СОД на 16,4% (р≤0,05).
В остальных случаях существенных сдвиговданных показателей не отмечалось (рисунок 10).Рисунок 10 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП на факторы антиоксидантной защиты в гомогенизате тканей печени при ХЭБС20*1511050СОД%каталаза-5ОАА-10-15-2011-25Контроль5 мкг/кг50 мкг/кг150 мкг/кг450мкг/кгПримечание. * – р≤0,05 по сравнению с контрольной группой крыс, подвергавшихсястрессу; 1 – р≤0,01-0,05 по сравнению с контрольной группой крыс, не подвергавшихся стрессу.3.1.2.
Морфологические изменения печени при введении АКТГ4-7-ПГП(семакса) в условиях эмоционально-болевого стрессаНаряду с изучением биохимических показателей, характеризующих состояние печени, для оценки эффектов пептида при эмоционально-болевом стрессенами были изучены срезы паренхимы органа, окрашенные гематоксилин-эозином.Установлено, что моделирование ОЭБС не привело к изменению индексамассы печени, но были отмечены изменения организации ее паренхимы (таблица3, рисунок 11).52Таблица 3 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП на морфологию печени при ОЭБС (M±m)ГруппаПоказательЦентролобулярный отделПериферический отделКонтрольстрессаВведение АКТГ4-7-ПГП в дозе:5 мкг/кг50 мкг/кг150 мкг/кг450 мкг/кг40,5±2,343,3±1,646,2±1,835,8±1,4*40,8±1,334,5±1,0*Одноядерные78,85±1,484,27±1,4188,55±1,6*81,78±1,483,53±1,484,21±1,1Многоядерные21,15±1,415,73±1,4111,45±1,6*18,22±1,416,47±1,415,79±1,1Одноядрышковые17,88±1,527,31±2,5123,88±1,919,72±2,3*26,11±1,718,87±2,0*Многоядрышковые82,11±1,572,69±2,5176,12±1,980,28±2,3*73,89±1,781,13±2,0*Одноядерные85,52±1,286,82±1,389,12±1,2586,93±1,0985,85±0,6188,35±0,8Многоядерные14,48±1,213,18±1,310,88±1,2513,07±1,0914,15±1,3811,65±0,8Одноядрышковые24,35±2,031,94±3,0131,53±2,122,79±2,1*36,87±3,531,96±2,6Многоядрышковые75,65±2,068,06±3,0168,47±2,177,21±2,1*63,13±3,568,04±2,6Индекс массы печениПроцент гепатоцитовКонтроль безПримечание.
1 – р≤0,05-0,001 по сравнению с контрольной группой крыс, не подвергавшихся стрессу; * – р≤0,05-0,001 по сравнению сконтрольной группой крыс, подвергавшихся стрессу.53Рисунок 11 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП на состояние печени при ОЭБСАБВГДЕЖЗ54ИКПримечание. Окраска гематоксилин-эозином. Микрофотография. Увеличение х100.Обнаружена тенденция к увеличению относительного количества одноядерных и одноядрышковых клеток во всех отделах печеночной дольки. Так, вцентролобулярном отделе количество одноядерных клеток увеличилось на 6,44%(р≤0,01), а одноядрышковых – на 23,76% (р≤0,001). В периферическом отделе относительное число одноядрышковых гепатоцитов возросло на 23,76% (р≤0,05).При этом относительное количество одноядерных клеток увеличено всего на 1,5%(статистически не значимо).Введение препарата в дозе 5 мкг/кг привело к увеличению числа лишь одноядерных клеток в центролобулярной зоне – 5,07% (р≤0,05), тогда как в перипортальной зоне статистически значимых различий в количестве одноядерных и одноядрышковых клеток не наблюдалось.
Увеличение дозы АКТГ4-7-ПГП до50 мкг/кг в большей степени потенцировало синтетическую функцию печени, чтопроявилось ростом относительного числа многоядрышковых клеток в центральной зоне дольки на 10,45% (р≤0,05) и в периферической – на 13,46% (р≤0,01) посравнению с контрольной группой животных.В дозе 450 мкг/кг препарат также вызывал рост относительного числа многоядрышковых клеток в центральной зоне дольки на 11,61 % (р≤0,01), без выраженного эффекта на гепатоциты перипортальной зоны.Реакция соединительнотканной стромы печени на стресс проявлялась в видемногочисленных расширений капиллярной сети. Это сопровождалось картинамидезорганизации балочной структуры паренхимы и очагами белковой дистрофии55по гидропическому типу, более выраженными в центральном и промежуточномотделах дольки (рисунок 11 А).
При этом периферическая часть паренхимы оставалась относительно сохранной (рисунок 11 Б).Следует отметить, что на фоне введения препарата обнаружено дозозависимое снижение степени выраженности признаков гидропической дистрофии.Так, доза 450 мкг/кг приводила к полному восстановлению структуры балок и цитоплазмы самих гепатоцитов в центральных отделах дольки (рисунок 10 В) с сохранением слабовыраженных признаков белковой дистрофии только в промежуточных и периферических отделах (рисунок 11 Г).
Дальнейшее уменьшение дозыдо 150 мкг/кг (рисунок 11 Д, Е) и 50 мкг/кг (рисунок 11 Ж, З) вызывало увеличение размеров сохранной паренхимы, а в дозе 5 мкг/кг (рисунок 11 И, К) наблюдались лишь следы дистрофии в виде зернистости цитоплазмы и расширения капиллярной сети.В серии исследования с моделированием ХЭБС в контрольной группе животных отмечается увеличение индекса массы печени на 17,7% (р≤0,01), сопровождающееся изменениями состава популяции гепатоцитов (таблица 4, рисунок12).Прежде всего, следует отметить явления некроза гепатоцитов с дискомплексацией печеночных балок и наличие признаков гидропической дистрофии,наиболеевыраженныхвпериферическихотделахпеченочнойдольки(рисунок 12 Б).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
