Диссертация (1174246)
Текст из файла
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждениевысшего образования«Курский государственный медицинский университет»Министерства здравоохранения Российской ФедерацииНа правах рукописиШЕПЕЛЕВА ОЛЬГА МИХАЙЛОВНАВЛИЯНИЕ АКТГ4-7-ПГП (СЕМАКСА) НА МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОЕСОСТОЯНИЕ ГЕПАТОЦИТОВ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ВИДАХ СТРЕССА14.03.06 – фармакология, клиническая фармакологияДиссертация на соискание ученой степеникандидата медицинских наукНаучный руководитель:доктор медицинских наук, профессорИ. И. БобынцевНаучный консультант:доктор медицинских наук, профессорА.
В. ИвановКурск - 20172ОГЛАВЛЕНИЕСтр.ВВЕДЕНИЕ……………………...……………………………………..4Глава 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ………………………………………………..111.1 Современные представления о механизмах развития стресса……..111.2 Стрессиндуцированные изменения в печени и их механизмы……..141.3 АКТГ как регуляторный пептид семейства меланокортинов……...231.4 Физиологические и фармакологические эффекты АКТГ4-7-ПГП(семакса)……………………………………………….……………….25Глава 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ……………………352.1 Экспериментальные животные……………………………………….352.2 Препарат……………………………………………………………..…362.3 Моделирование острого и хронического эмоционально-болевогостресса……………………………………………………….…………362.4 Моделирование острого и хронического иммобилизационногостресса….………………………………………………………………372.5 Выведение животных из эксперимента и забор биологическогоматериала………………………………………………………………372.6 Исследование показателей биохимического анализа сывороткикрови, характеризующих функциональное состояние печени……..382.7 Исследование показателей системы перекисного окисления липидов и системы антиоксидантной защиты…………………………….382.8 Морфологическое исследование печени…………………………….392.9 Статистическая обработка данных…………………………………..40Глава 3 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ……………..413.1 Влияние пептида АКТГ4-7-ПГП (семакса) на морфофункциональное состояние печени крыс при эмоционально-болевомстрессе………………………………………………………………….413.1.1 Изменения биохимических показателей в сыворотке крови и гомогенизате печени на фоне введения АКТГ4-7-ПГП (семакса) вусловиях эмоционально-болевого стресса…………………………..413.1.2 Морфологические изменения печени при введении АКТГ4-7-ПГП513(семакса) в условиях эмоционально-болевого стресса……………..3.2 Влияние пептида АКТГ4-7-ПГП (семакса) на морфофункциональное состояние печени крыс при иммобилизационном стрессе..593.2.1 Изменения биохимических показателей в сыворотке крови и гомогенате печени на фоне введения АКТГ4-7-ПГП (семакса) вусловиях иммобилизационного стресса……………………………..593.2.2 Морфологические изменения печени при введении АКТГ4-7-ПГП(семакса) в условиях иммобилизационного стресса………………..703.3 Влияние введения АКТГ4-7-ПГП (семакса) на корреляционнуюзависимость функциональных и морфологических показателейпечени в условиях различных видов стресса………………………..783.3.1 Корреляционная взаимосвязь функциональных показателей печени и ее структурных изменений после введения АКТГ4-7-ПГП(семакса) в условиях острого эмоционально-болевого стресса……793.3.2 Корреляционная взаимосвязь функциональных показателей печени и ее структурных изменений после введения АКТГ4-7-ПГП(семакса)вусловияххроническогоэмоционально-болевогостресса………………………………………………………………….863.3.3 Корреляционная взаимосвязь функциональных показателей печени и ее структурных изменений после введения АКТГ4-7-ПГП(семакса) в условиях острого иммобилизационного стресса………943.3.4 Корреляционная взаимосвязь функциональных показателей печени и ее структурных изменений после введения АКТГ4-7-ПГП(семакса) в условиях хронического иммобилизационного стресса..102ЗАКЛЮЧЕНИЕ………………………………………………………..111ВЫВОДЫ………………………………………………………………128ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ………………………………130СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ……………………………………………131СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ…………………………………………….132ПРИЛОЖЕНИЕ 1……………………………………………………...1594ВВЕДЕНИЕАктуальность исследованияК настоящему времени в многочисленных исследованиях представлен полифункциональный характер биологических эффектов регуляторных пептидов,которые контролируют практически все физиологические функции организма.Данное обстоятельство способствовало созданию на их основе целого ряда фармакологических препаратов [59, 124, 130].
Одним из наиболее успешно реализованных проектов в данном направлении можно считать создание на основе синтетического аналога фрагмента АКТГ4-7 препарата семакс, который нашел широкоеприменение в клинике в качестве ноотропного и нейропротекторного средства[60, 78, 130].При этом отдельный интерес представляют экспериментальные данные обэффектах пептида в условиях стресса. В частности, семакс при хроническом введении предотвращал у крыс последствия непредсказуемого хронического стрессирования в виде повышенной тревожности, выраженности депрессивных компонентов поведения, снижения массы тела и увеличения относительной массынадпочечников [33]. Также установлено, что пептид оказывал защитное противотромботическое действие в условиях многократного иммобилизационного стрессаза счет повышения антикоагулянтной, суммарной и неферментативной фибринолитической активности, активности активатора плазминогена плазмы крови [40,48, 64].Известно, что стресс, являясь неспецифической адаптивной реакцией организма на действие различных раздражителей, с одной стороны, сопровождаетсясистемной перестройкой защитных механизмов, а с другой – может оказывать повреждающее действие на функциональные системы организма и вести к развитиюзаболеваний.
Одним из важных механизмов стрессорного повреждения тканей является увеличение продукции реактивных оксигенных радикалов, что сопровождается пероксидацией липидов клеточных мембран [234].При этом печень, которой принадлежит уникальная роль в регуляции постоянства внутренней среды организма, обладает высокой чувствительностью к5действию различных раздражителей, в том числе и стресса.
Важную роль в развитии стрессиндуцированных изменений в печени наряду с активацией процессовсвободнорадикального окисления играют ишемия, гипоксия и нарушения процессов микроциркуляции [172, 231, 254]. Известно, что семакс в культуре ткани оказывает выраженное антиоксидантное, антигипоксическое, ангиопротекторное инейротрофическое действие [17, 42].Учитывая вышеуказанную плейотропность эффектов препарата, а такжеособенности механизмов стрессорного повреждения печени, представлялось целесообразным изучение влияния семакса на структуру и функции печени пристрессорном воздействии.Степень разработанности темыСемакс (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro) является синтетическим аналогомфрагмента гормона АКТГ4-7, стабилизированным к действию экзо- и эндопептидаз присоединением к С-концу последовательности аминокислот Pro-Gly-Pro илишенным гормональной активности [2, 53, 98].Как и все регуляторные пептиды, данный препарат обладает полифункциональными эффектами, среди которых отмечается антиастеническое, антиамнестическое, антигипоксическое, анксиолитическое, ноотропное и нейротрофическоедействие [39, 75, 77, 79, 90, 102], что обусловливает его широкое использованиекак нейропротектора.
Помимо этого установлено, что препарат может обладатькак стресс-лимитирующим [19, 27, 33, 174], так и стресс-потенцирующим воздействием [23].Выявлено кардиопротекторное [6, 20, 47, 56], антигемолитическое [35, 36],антикоагулянтное [40, 48, 64], гастропротекторное [22, 84, 108] действие семакса.Однако изучения влияния препарата на функции гепатоцитов и структуру печенив условиях стресса до настоящего времени не проводилось.Диссертационноеисследование(№государственнойрегистрации01201254916) выполнено согласно основному плану научно-исследовательскойработы Курского государственного медицинского университета.6Цель работы – изучить влияние АКТГ4-7-ПГП (семакса) на морфофункциональное состояние гепатоцитов при иммобилизационном и эмоциональноболевом стрессах.Задачи исследования1.
Изучить влияние введения АКТГ4-7-ПГП (семакса) на изменение в сыворотке крови и гомогенате печени биохимических показателей функциональногосостояния гепатоцитов в условиях острого и хронического эмоциональноболевого стресса.2. Исследовать морфологические изменения печени после введения семаксав условиях острого и хронического эмоционально-болевого стресса.3. Изучить влияние введения семакса на изменение в сыворотке крови и гомогенате печени биохимических показателей функционального состояния гепатоцитов в условиях острого и хронического иммобилизационного стресса.4. Исследовать морфологические изменения печени после введения семаксав условиях острого и хронического иммобилизационного стресса.5.
Выявить корреляционные взаимосвязи показателей функционального состояния печени и ее морфологических изменений после введения семакса в условиях различных видов стрессорного воздействия.Научная новизнаВ работе впервые проведено комплексное исследование влияния АКТГ4-7ПГП (семакса) на механизмы перекисного окисления и антиоксидантной защитыв гепатоцитах, их протеинсинтетическую функцию, цитолитические и репаративно-восстановительные процессы. Установлено, что выраженность и направленность эффектов пептида зависят от величины используемой дозы, вида стрессорного воздействия и его продолжительности.Впервые определены дозы семакса, оказывающие наиболее выраженноевлияние на морфофункциональное состояние гепатоцитов в условиях иммобилизационного и эмоционально-болевого стресса.7Впервые с использованием корреляционного анализа изучено влияние семакса на взаимосвязи показателей морфофункционального состояния гепатоцитов в условиях различных видов стрессорного воздействия.Практическая значимость работыЭкспериментально показано влияние АКТГ4-7-ПГП (семакса) на морфофункциональное состояние гепатоцитов в условиях стресса, которое следует учитывать при использовании семакса в клинической практике, разработке патогенетически обоснованных методов коррекции стресс-индуцированных патологических сдвигов в печени, а также при разработке фармакологических препаратов наоснове пептидов семейства меланокортинов.На основании результатов исследования получен патент «Применение пептида АКТГ(4-7)-ПГП для гепатопротекторного воздействия» (патент на изобретение № 2528741 от 20.09.14 г.).Полученные данные расширяют существующие представления о роли регуляторных пептидов в организме, полифункциональном характере их биологических эффектов и плейотропности действия фармакологических препаратовна их основе.Мeтодология и мeтоды иccлeдовaнияМетодология исследования заключалась в изучении эффектов внутрибрюшинного введения пептида АКТГ4-7-ПГП (семакса) на показатели функционального состояния гепатоцитов, такие как активность цитолитических процессов,протеинсинтетическая функция, выраженность ПОЛ гепатоцитов, активность антиоксидантной системы и морфологическое состояние тканей печени, а именно:число одно- и многоядерных и одно- и многоядрышковых клеток, наличие дистрофических процессов.Cтeпeнь доcтовeрноcти и aпробaция мaтeриaлов иccлeдовaнияCтeпeнь доcтовeрноcти опрeдeляeтcя полнотой литературного обзора,доcтaточным чиcлом наблюдений (216 самцов крыc Виcтaр), рандомизированнымформированием интактных, контрольных и экспериментальных групп, общепринятыми методами оценки активности аминотрансфераз, концентрации сыворо-8точного белка, активности антиоксидантных ферментов и концентрации МДА,общепринятыми методиками получения гистологических препаратов и их морфометрической оценки, а также выбором и применением методов cтaтиcтичecкойобрaботки данных согласно типу их распределенияОсновные положения, выносимые на защиту1.
АКТГ4-7-ПГП (семакс) оказывает существенное влияние на морфофункциональное состояние гепатоцитов при различных видах стресса за счет влиянияна процессы перекисного окисления и механизмы антиоксидантной защиты в гепатоцитах, их протеинсинтетическую функцию, цитолитические и репаративновосстановительные процессы.2.
Характеристики
Тип файла PDF
PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.
Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
