Диссертация (1174246), страница 10
Текст из файла (страница 10)
При этом отмечается снижение числа многоядрышковых и многоядерных гепатоцитов (соответственно на 8% и 28%, p≤0,05). В центральных отделах долек признаки гибели гепатоцитов менее выражены, структура печеночныхбалок сохранна (рисунок 12 А) на фоне достоверного уменьшения относительногоколичества только многоядрышковых клеток на 2,3% (p≤0,05).Введение АКТГ4-7-ПГП в дозе 5 мкг/кг не оказывало значимого влиянияна морфологическую картину стрессорного повреждения паренхимы печени (рисунок 12 В, Г). В цитоплазме гепатоцитов сохраняются признаки гидропическойдистрофии в виде разнокалиберных вакуолей, оттесняющих элементы морфоплазмы на периферию клеток.56Таблица 4 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП на морфологию печени при ХЭБС (M±m)ГруппастрессаПоказательЦентролобулярный отделПериферический отделВведение АКТГ4-7-ПГП в дозе:Контроль5 мкг/кг50 мкг/кг150 мкг/кг450 мкг/кг26,7±1,332,4±1,3133,4±1,031,9±0,928,5±1,1*32,2±1,487,34±0,7188,07±0,6290,3±0,62*91,73±0,41*89,73±0,43*88,98±0,71Многоядерные12,66±0,7111,93±0,629,7±0,62*8,27±0,41*10,27±0,43*11,02±0,35Одноядрышковые8,17±0,5610,22±0,84112,79±0,95*11,47±0,711,15±0,711,58±1,57Многоядрышковые91,83±0,5689,78±0,84187,21±0,95*88,53±0,7088,85±0,7088,42±1,54Одноядерные91,63±0,5193,28±0,52193,78±0,7592,84±0,6692,79±0,5492,74±0,52Многоядерные8,37±0,516,53±0,5416,22±0,757,16±0,667,21±0,617,26±0,64Одноядрышковые20,1±1,2326,77±2,41123,1±1,7420,06±1,33*24,36±1,523,95±1,44Многоядрышковые79,3±1,3773,23±2,41176,9±1,7479,94±1,33*75,6±1,576,05±1,44Индекс массы печениПроцент гепатоцитовКонтроль безОдноядерныеПримечание.
* – р≤0,05-0,001 по сравнению с контрольной группой крыс, подвергавшихся стрессу;трольной группой крыс, не подвергавшихся стрессу.1– р≤0,05 по сравнению с кон-57Рисунок 12 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП на состояние печени при ХЭБСАБВГДЕЖЗ58ИКПримечание. Окраска гематоксилин-эозином. Микрофотография. Увеличение х400.Отмечаются нарушения структуры печеночных долек. В центральных отделах долек наблюдается более выраженное уменьшение относительного числамногоядерных (на 19%, p≤0,01) и многоядрышковых (на 3%, p≤0,05) клеток, но напериферии долек наблюдается тенденция к восстановлению популяции многоядрышковых гепатоцитов.Увеличение дозы пептида до 50 мкг/кг существенно уменьшало выраженность гидропической дистрофии (уменьшение числа и размерности вакуолей,распространенности очагов дистрофии), приводило к снижению количестванекротизированных клеток и нормализации балочного строения паренхимы (рисунок 12 Д, Е).
В центральных отделах долек прогрессирует снижение числа многоядерных клеток (на 31%, p≤0,001), но на периферии долек восстановлениеструктуры гепатоцитов проявляется статистически значимым увеличением относительного количества многоядрышковых клеток (на 9%, p≤0,05). ВведениеАКТГ4-7-ПГП в дозе 150 мкг/кг приводило к полному восстановлению балочнойструктуры паренхимы (рисунок 12 Ж, З). В промежуточных и периферическихотделах долек присутствуют остаточные явления гидропической дистрофии в виде незначительного количества мелких вакуолей и зернистости цитоплазмы нафоне умеренного расширения синусоидных капилляров. Количество многоядерных гепатоцитов в центральных отделах долек также снижено (на 14%, p≤0,05),59на периферии долек отмечается увеличение в популяции многоядерных и многоядрышковых гепатоцитов, не достигающее достоверных различий.При увеличении дозы до 450 мкг/кг данные эффекты на состояние гепатоцитов сохраняются, и восстанавливается число многоядерных клеток в центральных областях долек (рисунок 12 И, К).Таким образом, введение пептида при ОЭБС И ХЭБС оказывало общеестресс-лимитирующее воздействие, характеризующееся нормализацией структуры паренхимы, уменьшением распространенности и степени выраженности признаков гидропической дистрофии и восстановлением синтетического потенциалапечени, на что указывают увеличение относительного количества многоядрышковых гепатоцитов при использовании пептида в дозах 50 и 450 мкг/кг в условияхострого стресса и в дозе 50 мкг/кг – в условиях хронического стресса.3.2.
Влияние пептида АКТГ4-7-ПГП (семакса) на морфофункциональноесостояние печени крыс при иммобилизационном стрессеУчитывая возрастающую частоту гипокинезии вследствие изменения образажизни, использование семакса в клинической практике в качестве адаптогена ипрепарата, улучшающего внимание операторов, ноотропного средства при лечении инсультов, часто сопровождающихся выраженным ограничением двигательной активности и сопутствующими нарушениями печени, нами было изучено ееморфофункциональное состояние при иммобилизационном стрессе.3.2.1.
Изменения биохимических показателей в сыворотке крови и гомогенизате печени на фоне введения АКТГ4-7-ПГП (семакса) в условияхиммобилизационного стрессаДля оценки функционального состояния печени использовались показатели,идентичные изучаемым показателям при моделировании эмоционально-болевогостресса. Как видно из таблицы, ОИС оказывал выраженное влияние на процессыцитолиза, ПОЛ и состояние антиоксидантной системы (таблица 5, рисунок 13–17).60Таблица 5 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП при ОИС (M±m)ГруппаПоказательСтрессированные животныеКонтроль безстрессаВведение АКТГ4-7-ПГП в дозе:Контроль5 мкг/кг50 мкг/кг150 мкг/кг450 мкг/кгСыворотка кровиАлАТ, Ед/л42,9±4,360,5±3,7146,8±2,7*44,9±3,2*58,3±4,672,3±7,9*АсАТ, Ед/л115,4±9,2198±12,61249,3±22,6*203,2±20199,5±18,2232,3±22,9Общий белок, г/л67,8±1,163,6±1,3164,9±0,861,9±0,965,7±1,664,7±1,6Мочевина, моль/л3,4±0,24,4±0,515,0±0,44,9±0,43,9±0,74,1±0,7ЩФ, Ед/л192,3±12,9202,8±8,0144,3±11,8*150,8±8,1*222,9±14,9242,9±14,0*Гомогенизат печениМДА, мкмоль/л2,3±0,13,6±0,213,9±0,23,9±0,24,2±0,1 *3,4±0,3Каталаза, мккат/л3,9±0,14,6±0,214,6±0,24,1±0,1*5,0±0,14,5±0,3СОД, усл.
ед.2,8±0,23,3±0,213,0±0,12,9±0,1*3,3±0,13,2±0,228,8±0,529,8±0,427,5±0,3*29,6±0,5ОАА, %31,2±0,529,4±0,51Примечание. * – р≤0,05-0,001 по сравнению с контрольной группой крыс, подвергавшихся стрессу;трольной группой крыс, не подвергавшихся стрессу.1– р≤0,05 по сравнению с кон-61Стрессиндуцированная активация цитолитических процессов подтверждается увеличением активности сывороточных трансаминаз. Так, активность АлАТвозросла на 29,0% (р≤0,01), активность АсАТ – на 41,9%, р≤0,001 (рисунок 13).Введение АКТГ4-7- ПГП в дозах 5 и 50 мкг/кг вызывало коррекцию стрессиндуцированной повышенной активности АлАТ соответственно на 22,6%(p≤0,01) и 25,8% (p≤0,01).
Напротив, в наибольшей использованной дозе450 мкг/кг пептид повышал активность АлАТ на 19,6% (p≤0,05).Влияние АКТГ4-7- ПГП на активность АсАТ было менее выраженным ипроявилось при дозе 5 мкг/кг ее повышением (на 26%, p≤0,05). Активность АсАТимела тенденцию к увеличению и при дозе 450 мкг/кг (на 17,0%), однако данныеизменения достоверного уровня не достигали.Рисунок 13 – Изменение активности сывороточных аминотрансфераз привведении АКТГ4-7-ПГП в условиях ОИС50140301**20АсАТ10%АлАТ0-10-20*-30Контроль5 мкг/кг-*50 мкг/кг150 мкг/кг450мкг/кгПримечание. * – р≤0,05-0,01 по сравнению с контрольной группой крыс, подвергавшихся стрессу;1– р≤0,01-0,001 по сравнению с контрольной группой крыс, не подвергавшихсястрессу.В изменении активности ЩФ при ОИС отмечалась тенденция к ее увеличению на 5,1%, не достигшая достоверных значений (рисунок 14).62Рисунок 14 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП на активность ЩФ в условиях ОИС30*20100щелочнаяфосфатаза%-10-20*-30*-40Контроль5 мкг/кг50 мкг/кг150 мкг/кг450 мкг/кгПримечание.
* – р≤0,01-0,001 по сравнению с контрольной группой крыс, подвергавшихся стрессу.При использовании пептида в дозах 5 и 50 мкг/кг отмечалось снижение активности ЩФ на 28,6% и 25,6% (р≤0,001) соответственно. С увеличением дозынаблюдался обратный эффект пептида на активность ЩФ. Так, при использовании дозы 150 мкг/кг отмечалось увеличение активности ЩФ на 10,0%, а в дозе450 мкг/кг эффект достигал достоверности (увеличение на 19,8%, р≤0,01).Изменение показателей белкового обмена в сыворотке крови под влияниемОИС проявлялось в снижении концентрации общего белка на 8,1% (р≤0,01) и увеличении концентрации мочевины на 23,8% (р≤0,05). Введение препарата не оказывало выраженного эффекта на данные показатели (рисунок 15).Процессы ПОЛ характеризовались накоплением МДА, содержание которого увеличилось на 36,1% (р≤0,001). При этом эффекты пептида проявились тольков дозе 150 мкг/кг в виде достоверного увеличения содержания МДА на 15,2%(р≤0,05).
В остальных дозах АКТГ4-7-ПГП не оказывал воздействия на ПОЛ (рисунок 16).63Рисунок 15 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП на показатели белкового обмена в сыворотке крови при ОИС301252015Общийбелок10%5Мочевина0-5-101-15КонтрольПримечание.5 мкг/кг150 мкг/кг150 мкг/кг450 мкг/кг– р≤0,01-0,05 по сравнению с контрольной группой крыс, не подвергав-шихся стрессу.Рисунок 16 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП на содержание МДА в гомогенизате тканейпечени при ОИСМДА40135302520*% 15МДА1050-5-10Контроль5 мкг/кг50 мкг/кг150 мкг/кг450мкг/кгПримечание. * – р≤0,05 по сравнению с контрольной группой крыс, подвергавшихсястрессу; 1 – р≤0,001 по сравнению с контрольной группой крыс, не подвергавшихся стрессу.64На фоне стрессорного воздействия в состоянии антиоксидантной системынаблюдались следующие изменения: активность каталазы увеличивалась на 15,2%(p≤0,01), СОД – на 14,8% (p≤0,05) на фоне небольшого, но достоверного снижения ОАА (на 5,9%, p≤0,05) (рисунок 17).Рисунок 17 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП на факторы антиоксидантной защитыв гомогенизате тканей печени при ОИС20151 1105СОД0%каталаза-5ОАА1-10**-15*-20Контроль5 мкг/кг50 мкг/кг150 мкг/кг450мкг/кгПримечание.
* – р≤0,05-0,01 по сравнению с контрольной группой крыс, подвергавшихся стрессу;1– р≤0,01-0,05 по сравнению с контрольной группой крыс, не подвергавшихсястрессу.Влияние пептида наблюдалось в дозе 50 мкг/кг в виде уменьшения активности СОД на 13,7% и каталазы на 10,5% (р≤0,05) и в дозе 150 мкг/кг – в видеуменьшения ОАА на 6,5% (р≤0,01).Влияние ХИС выражалось в увеличении активности АсАТ, содержанияМДАиизменениипоказателейантиоксидантнойсистемы(таблица6,рисунки 18–21).Активность АсАТ в сыворотке крови при ХИС увеличивалась на 20,3%(p≤0,05), тогда как показатели АлАТ оставались на уровне нестрессированногоконтроля (рисунок 18).65Рисунок 18 – Изменение активности сывороточных аминотрансфераз привведении АКТГ4-7-ПГП в условиях ХИС35**3025120АсАТ15%АлАТ1050-5Контроль5 мкг/кг50 мкг/кг150 мкг/кг450мкг/кгПримечание.
* – р≤0,05-0,01 по сравнению с контрольной группой крыс, подвергавшихся стрессу; 1 – р≤0,05 по сравнению с контрольной группой крыс, не подвергавшихся стрессу.Влияние АКТГ4-7-ПГП в отношении сывороточных трансаминаз при хроническом стрессе наблюдалось только при введении в дозе 450 мкг/кг: активностьАлАТ увеличилась на 28,7%, АсАТ – на 31,1% (p≤0,05).66Таблица 6 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП при ХИС (M±m)ГруппаПоказательСтрессированные животныеКонтроль безстрессаВведение АКТГ4-7-ПГП в дозе:Контроль5 мкг/кг50 мкг/кг150 мкг/кг450 мкг/кгСыворотка кровиАлАТ, Ед/л42,9±4,342,7±3,645,6±7,849,2±7,646,3±2,955,0±8,9*АсАТ, Ед/л115,4±9,2144,7±6,71158,4±11,8150,2±9,6140,8±6,8189,7±16,4*Общий белок, г/л68,7±1,271,3±0,969,2±0,768,7±1,670,8±1,169,1±0,9Мочевина, моль/л3,4±0,23,2±0,23,8±0,1*3,5±0,42,6±0,2*3,0±0,2ЩФ, Ед/л192,3±12,9129,1±14,01114,8±6,1141,0±13,3147,9±13,0144,8±11,7Гомогенизат печениМДА, мкмоль/л1,5±0,12,3±0,111,6±0,1*1,4±0,1*2,1±0,11,9±0,2*Каталаза, мккат/л4,0±0,22,3±0,312,3±0,11,9±0,13,3±0,2*3,0±0,2*СОД, усл.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
