Диссертация (1174246), страница 11
Текст из файла (страница 11)
ед.2,7±0,13,1±0,113,3±0,0*3,1±0,13,1±0,12,9±0,1ОАА, %31,2±0,532,4±0,935,3±0,8*36,1±0,5*32,3±1,031,5±0,9Примечание. * – р≤0,05-0,001 по сравнению с контрольной группой крыс, подвергавшихся стрессу;контрольной группой крыс, не подвергавшихся стрессу.1– р≤0,05-0,001 по сравнению с67Активность ЩФ при ХИС снижалась на 49,0% (р≤0,01). При этом введениепептида во всех использованных дозах не влияло на данный показатель(рисунок 19).Рисунок 19 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП на активность ЩФ в условиях ХИС20100-10-20%щелочнаяфосфатаза-30-40-501-60КонтрольПримечание.15 мкг/кг50 мкг/кг150 мкг/кг450 мкг/кг– р≤0,01 по сравнению с контрольной группой крыс, не подвергавшихсястрессу.Изменения содержания общего белка и мочевины при ХИС не наблюдалось.Введение пептида во всех использованных дозах также не изменяло содержаниеобщего белка, но в дозах 5 и 150 мкг/кг влияло на концентрацию мочевины. Так,при введении АКТГ4-7-ПГП в дозе 5 мкг/кг отмечалось увеличение концентрациимочевины на 18,9%, а в дозе 150 мкг/кг – снижение ее концентрации на 19,3%,р≤0,05 (рисунок 20).В условиях ХИС в гомогенизате печени активность каталазы снижалась (на76,8%, p≤0,0001), СОД – повышалась (на 12,4%, p≤0,01) на фоне увеличения содержание МДА (на 36,6%, p≤0,001) и отсутствия существенных изменений ОАА(рисунок 21).68При этом эффекты пептида на ПОЛ в гепатоцитах имели антиоксидантнуюнаправленность и проявились в отношении различных показателей при всех использованных дозах.Рисунок 20 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП на показатели белкового обмена в сыворотке крови при ХИС25*2015105Общийбелок%0Мочевина-5-10-15-20*-25Контроль5 мкг/кг50 мкг/кг150 мкг/кг450 мкг/кгПримечание.
*– р≤0,05 по сравнению с контрольной группой крыс, подвергавшихсястрессу.69Рисунок 21 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП на процессы ПОЛ и состояние антиоксидантной системы при ХИС.60*14020*1***0СОД%каталаза-20**-40ОААМДА*-60-801-100Контроль5 мкг/кг50 мкг/кг150 мкг/кг450мкг/кгПримечание. * – р≤0,05-0,001 по сравнению с контрольной группой крыс, подвергавшихся стрессу; 1 – р≤0,01-0,001 по сравнению с контрольной группой крыс, не подвергавшихся стрессу.70Так, активность каталазы достоверно повышалась при дозах 150 и450 мкг/кг соответственно на 46,3% (p≤0,01) и 30,6% (p≤0,05). Напротив, активность СОД повысилась только после введения наименьшей дозы пептида 5 мкг/кг(на 9,0%, p≤0,01), тогда как в остальных группах данный показатель фактическине изменялся. Значения ОАА также достигали достоверных различий при болеенизких дозах 5 и 50 мкг/кг соответственно на 9,1% (p≤0,05) и 11,7% (p≤0,01).
Наэтом фоне наиболее выраженное снижение уровня МДА происходило после введения АКТГ4-7-ПГП в дозах 5 мкг/кг (на 31,3%, p≤0,001) и 50 мкг/кг (на 38,8%,p≤0,001). При дозе 450 мкг/кг эффект пептида имел достоверный характер, однакоего выраженность была в 2 раза ниже, чем в меньших дозах.3.2.2. Морфологические изменения печени при введении АКТГ4-7-ПГП(семакса) в условиях иммобилизационного стрессаС целью морфологического подтверждения эффектов семакса на состояниепечени при иммобилизационном стрессе были изучены гистологические срезыпаренхимы органа, окрашенные гематоксилин-эозином.
Установлено, что послемоделирования ОИС происходит уменьшение веса печени по сравнению с интактными животными на 12,8%, р≤0,05. Это также сопровождается изменениемсостава популяции гепатоцитов, структуры стромы и паренхимы органа (таблица7, рисунок 22).Уживотных,перенесшихОИС,вцентральныхотделахдолек(рисунок 22 А) отмечается незначительное, статистически недостоверное увеличение количества многоядрышковых клеток на фоне увеличения относительногоколичества многоядерных гепатоцитов. При этом в периферическом отделе дольки (рисунок 22 Б) относительное количество многоядрышковых клеток достоверно снижено на 8,4% (p≤0,001), а многоядерных клеток несущественно превышаетзначения интактных животных.
В паренхиме печени обнаруживаются признакибелковой дистрофии по типу ее гидропической разновидности. В цитоплазме клеток видны разнокалиберные вакуоли.71Таблица 7 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП на морфологию печени при ОИС (M±m)ГруппастрессаПоказательЦентролобулярный отделПериферический отделВведение АКТГ4-7-ПГП в дозе:Контроль5 мкг/кг50 мкг/кг150 мкг/кг450 мкг/кг40,5±1,735,9±1,3128,0±0,7*29,3±1,0*34,4±0,931,4±1,1*Одноядерные84,31±1,081,97±1,1282,13±0,8282,17±0,8686,27±0,95*83,97±0,79Многоядерные15,69±1,018,03±1,1217,87±0,8217,83±0,8613,73±0,95*16,03±0,24Одноядрышковые8,14±0,875,94±0,5617,63±0,778,93±0,85*7,4±0,675,86±0,7792,37±0,7791,01±0,85*92,6±0,6794,14±0,77Индекс массы печениПроцент гепатоцитовКонтроль без191,86±0,8793,4±0,65Одноядерные90,68±0,7389,69±0,6189,2±0,8190,8±0,7190,18±0,9287,27±0,73*Многоядерные9,24±0,7510,31±0,6110,8±0,819,2±0,719,82±0,9212,73±0,73*Одноядрышковые13,36±1,0520,06±1,36124,25±1,3*23,18±1,320,29±1,5819,88±1,89Многоядрышковые86,64±1,0579,94±1,33175,75±1,3*76,82±1,379,71±1,5880,12±1,86МногоядрышковыеПримечание.
* – р≤0,05-0,001 по сравнению с контрольной группой крыс, подвергавшихся стрессу;с контрольной группой крыс, не подвергавшихся стрессу.1– р≤ 0,05 по сравнению72Рисунок 22 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП на состояние печени при ОИСАБВГДЕЖЗ73ИКПримечание. Окраска гематоксилин-эозином. Микрофотография. Увеличение х400.Наиболее поврежденными оказываются клетки периферического отделадольки (рисунок 22 Б), где помимо очагов гидропической дистрофии обнаруживаются клетки в состоянии фокального гидропического некроза.Введение АКТГ4-7-ПГП в дозах 5, 50 и 150 мг/кг на фоне ОИС приводило котносительному уменьшению количества многоядрышковых гепатоцитов в центральномотделедолькидозначенийвгруппеинтактныхживотных(рисунок 22 В, Д, Ж).В периферическом отделе доза пептида 5 мкг/кг вызывает снижение относительного количества многоядрышковых клеток на 5,3%, p≤0,05 (рисунок 21 Г),а доза 450 мг/кг вызывает увеличение относительного количества многоядерныхклеток на 23,5%, p≤0,01 (рисунок 22 К).Морфологическая картина изменения печени при введении АКТГ4-7-ПГПна фоне ОИС характеризуется снижением выраженности проявлений дистрофии.Так, при использовании доз 5, 50 и 150 мг/кг незначительное количество мелкихвакуолей обнаруживается в гепатоцитах только промежуточного отдела печеночных долек, в то время как в центральном и периферическом отделах отмечаетсялишь некоторое расширение синусоидных капилляров (рисунок 22 В–З).
Увеличение дозы до 450 мг/кг (рисунок 21 И, К) сопровождается остаточными явлениями белковой дистрофии в виде зернистости цитоплазмы, преимущественно в центральном отделе дольки.74Таким образом, в условиях ОИС пептид в дозах 5-150 мкг/кг оказывает гепатопротекторное действие, проявляющееся нормализацией состояния гепатоцитов в центральных и периферических отделах долек с сохранением резидуальныхучастков гидропической дистрофии в промежуточных отделах.При моделировании ХИС, также как и при ОИС, происходит снижение весапечени по сравнению с интактными животными.
Индекс массы печени в контрольной группе стрессированных животных снижался на 35%, p≤0,05(таблица 8). На фоне введения пептида в дозе 50 мкг/кг происходило увеличениеиндекса до 29,4 мкг/кг (на 11%, p≤0,05). В остальных подопытных группах существенных сдвигов данного показателя не наблюдалось.Подсчет относительного количества одно- и многоядрышковых, а также одно- и многоядерных гепатоцитов в центральном и периферическом отделах долекпоказал, что при моделировании ХИС в центральном отделе дольки стресс не вызывает изменения соотношения исследуемых видов гепатоцитов (таблица 8). Впериферическом отделе дольки количество многоядрышковых клеток существенно снижено на 14,4%, (p≤0,001).
Введение АКТГ4-7-ПГП в дозах 50-450 мкг/кг нафоне ХИС приводит к снижению доли многоядрышковых гепатоцитов в центральном отделе дольки, которое статистически значимо лишь при дозе в150 мкг/кг. Это происходит на фоне линейного, дозозависимого снижения относительного количества многоядерных гепатоцитов в центральном отделе. Статистически значимыми эти изменения становятся лишь на дозе 450 мкг/кг, когдаобнаружено уменьшение значения этого показателя на 13,0% (p≤0,05) при сравнении со стрессированной контрольной группой.Введение АКТГ4-7-ПГП в дозах 50 и 450 мкг/кг вызывает на периферии печеночных долек относительное увеличение количества многоядрышковых гепатоцитов по сравнению со стрессированным контролем на 7,9% (p≤0,001) и 5,0%(p≤0,05) соответственно, но восстановления относительного количества многоядерных клеток не происходит.75Таблица 8 – Эффекты АКТГ4-7-ПГП на морфологию печени при ХИС (M±m)ГруппастрессаПоказательЦентролобулярный отделПериферический отделВведение АКТГ- 4-7-ПГП в дозе:Контроль5 мкг/кг50 мкг/кг150 мкг/кг450 мкг/кг40,5±1,726,5±0,9126,7±0,729,4±0,8*26,5±0,827,2±1,084,03±0,9586,36±0,63185,60±0,5686,03±0,886,57±0,6088,18±0,60*Многоядерные15,97±0,9513,64±0,63114,4±0,5613,97±0,813,43±0,611,82±0,6*Одноядрышковые7,87±0,857,18±0,447,39±0,518,05±0,6110,5±0,63*8,84±0,61*Многоядрышковые92,13±0,8592,82±0,4492,61±0,5191,95±0,6189,5±0,63*91,16±0,61*Одноядерные91,22±0,792,91±0,47194,31±0,45*92,61±0,8392,91±0,5693,85±0,56Многоядерные8,78±0,77,09±0,4715,69±0,45*7,39±0,837,09±0,566,15±0,56Одноядрышковые13,18±1,025,19±1,24124,93±1,7319,31±1,33*23,05±1,1321,43±1,17*Многоядрышковые86,82±1,074,81±1,24175,07±1,7380,69±1,33*76,95±1,1378,57±1,17*Индекс массы печениПроцент гепатоцитовКонтроль безОдноядерныеПримечание.
* – р≤0,05 по сравнению с контрольной группой крыс, подвергавшихся стрессу;группой крыс, не подвергавшихся стрессу.1– р≤0,05 по сравнению с контрольной76В паренхиме печени обнаруживаются признаки белковой дистрофии по типу ее гидропической разновидности (рисунок 23 А, Б). В цитоплазме клеток видны разнокалиберные вакуоли, скопление гранул в цитоплазме клеток, преимущественно на периферии цитоплазмы.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
