Диссертация (1154882), страница 5
Текст из файла (страница 5)
На модели ожоговой травмы 2 степени у крыс, было показано, чтовведение СВФ способствует возрастанию уровня VEGF и более выраженнойваскуляризации по сравнению с контрольной группой (Atalay 2014).Ангиогенные свойства СВФ, по всей видимости, являются результатомсочетанного взаимодействия различных клеточных субпопуляций в ее составе,таких как СКЖТ, ЭПК (эндотелиальных прогениторных клеток), макрофагов ифибробластов.27СовместноевведениеЭПКиСКЖТприводиткбольшейнеоваскуляризации, нежели ЭПК и СКЖТ по отдельности (Traktuev 2009).Процесс неоваскуляризации дополнительно стимулируется стромальнымиклетками посредством высвобождения факторов роста, таких как фактора ростаэндотелиясосудов(VEGF),факторростагепатоцитов(HGF)итрансформирующий фактор роста В (TGF-β) (Rehman 2004).
Koh с соавт.показали, что макрофаги, найденные в СВФ также играют важную роль вформировании правильной структурной организации сосудистой сети (Koh2011).В недавних исследованиях на животных было показано, что клетки СВФспособствуют приживлению жирового трансплантата (Zhu 2013, Fu 2013). Zhuустановил, что клетки СВФ в экспериментах на мышах позволяют прижитьсябольшему объему липотрансплантата, с повышенной плотностью сосудистойсети и лучшей морфологией (Zhu 2013). Был отмечен быстрый рост сосудистойсети в группе животных, которым пересаживали жировую ткань, обогащеннуюСВФ.
Одновременно с этим наблюдалось значительное увеличение экспрессииVEGF в группе с СВФ (Kølle 2013).Rigotti et al. постулировал общую закономерность событий, происходящих,когда СВФ трансплантируется в зону постлучевого некроза (Rigotti 2007). СВФспособствуетповышениюуровнясосудистыхфакторовроста,неоваскуляризации и оксигенации тканей, что в конечном итоге приводит креперфузии и восстановлению поврежденных тканей (Rigotti 2007).При переломах костей и костных дефектах, СВФ может секретироватьVEGF, необходимый для усиления формирования новых сетей капилляров истимуляции стволовых клеток к остеогенной дифференцировке (Barba 2013).Точно так же Коh и авторы имплантировали СВФ непосредственно вишемизированную мышцу мышей и наблюдали восстановление перфузиикрови и образование новых сосудов в мышцах (Zhu 2013).281.5.2 Иммуномодулирующий эффектМногие исследования описывают более низкую выраженность воспаленияи иммунного ответа после введения СВФ (Zhu 2013).
Стволовые клетки иклетки-предшественники, как известно, обладают противовоспалительным ианти-апоптознымисвойствами,чтоспособствуетрегенерациитканейреципиента. Макрофаги в здоровой жировой ткани, как правило имеютпротивовоспалительный М2 фенотип (Zimmerlin 2013, Zeyda 2007). СВФ такжесодержитТ-регклетки,которыеэкспрессируютвысокийуровеньиммуносупрессирующих цитокинов.
Эти Т-рег клетки могут поддерживать М2фенотип макрофагов в составе СВФ, когда это необходимо (Tiemessen 2007).СФВ приводит к снижению секреции провоспалительных цитокинов ифакторов роста, таких как ФНО альфа и IL-6 (Premaratne2011). Вэкспериментах на модели аутоиммунного энцефалита при возникновениимножественного склероза было показано, что СВФ гораздо более эффективноподавляет продукцию воспалительных цитокинов и факторов роста таких какИЛ-2 (Rajashekhar 2014).1.5.3Дифференцировка и пролиферацияСтволовые клетки являются привлекательным клеточным продуктом сточкизрениярегенерациидифференцироватьсявблагодаряразличныхихестественнойнаправлениях,приспособностипомещениив29определенную среду.
Помимо мультипотентности, СВФ так же можетиндуцировать пролиферацию прогениторных клеток в реципиентоной зоне(Gentile 2012, Cianfarani 2013, Yoshimura 2008, Li 2013, Atalay 2014, Chung 2014,Premaratne 2011, Kappos 2015, You 2014).В дополнение к паракринному действию компонентов СВФ для улучшенияприживления жировой ткани во время липофилинга с обогащением, клеткисодержащиеся в нем так же могут дифференцироваться в адипоциты иуменьшать уровень потери объема ткани.
Zhu et al. предположил, чтопримитивные ММСК из СВФ могут дифференцироваться в неонатальныеадипоциты после наблюдаемой экспрессии СD34 в трансплантате (Zhu 2013). Вдругих исследованиях Fu et al. использовали СВФ, окрашенную зеленымфлуоресцентным белком чтобы проиллюстрировать динамику изменений,которые происходят у мышей, после пересадки обогащенного СВФ жировоготрансплантата (Fu 2013). Клетки СВФ не только выживали в трансплантате, нои дифференцировались в адипоциты.СВФ повышает степень пролиферации фибробластов при введении в язвудиабетической стопы, тем самым способствуя заживлению раны, путемпробуждения стареющих клеток (You 2014, Han 2010).
Схожие результатынаблюдали в отношении ожоговых ран, при которых СВФ вводят черезвнутрикожные инъекции, это позволило увеличить активность фибробластов иклеточную пролиферацию (Atalay 2014).1.5.4 Компоненты межклеточного матриксаМежклеточный матрикс (МК) выполняет роль основы для многих типовтканей и играет важное значение в процессе регенерации (Badylak 2002).
Он30состоит из белков, таких как коллаген, ламинин, фибронектин и эластин,которые секретируются фибробластами. Одной из отличительных особенностейфункции МК является его способность динамически взаимодействовать сбелками-интегринами на клетках, способствуя их адгезии. Присоединениеинтегринов к рецепторам МК запускает сигнальные механизмы и меняетклеточную активность (Bosman 2003, Alberts 2010). МК так же участвует вдвижении и миграции клеток (Bauer 2009) Кроме того, МК способствуетпрорастаниюсосудистойсети,необходимойдлянормальногоморфогенеза (Bauer 2009). Поскольку СВФ содержит секретирующие матриксфибробласты и другие стромальные клетки, то применение СВФ являетсяцелесообразным в тех случаях, когда необходимо формирование 3D матрицы.В последних исследованиях Debels показал, что полученный из жировойткани бесклеточный матрикс (hDAM) в одиночку был столь же эффективным,как и жир, для улучшения регенерации жирового трансплантата.
Однако, жир сдобавлением HDAM был еще эффективнее (Debels 2015, Choi 2011). Вполневероятно, что коллаген-секретирующие фибробласты в составе СВФ улучшаютжизнеспособность жирового трансплантата во время пересадки обогащенноголипографта по схожим механизмам.Так же кожные трансплантаты, используемые для лечения ожоговых ран вкомбинации с СВФ за счет содержащихся в ней фибробластов, способствуютпродукциибелковМК,чтоускоряетзаживление.Присутствиепротивовоспалительных макрофагов М2 также может играть важную роль вдинамическом формировании матрицы (Brown 2012).
В отличие от многихсинтетических матриц, инъекции СВФ способны стимулировать естественныемеханизмы формирования межклеточного матрикса.311.6 Показания к применению методикиНа сегодняшний день в зарубежной литературе представлено большоеколичество исследований, посвященных лечению различных дегенеративныхзаболеваний коленного сустава при помощи ММСК. Nguyen в своемисследовании описывает следующие показания к проведению терапии ММСК:возраст пациентов старше 18 лет, наличие подтвержденного рентгенологическиОА коленного сустава 2-3 степени на момент осмотра, отсутствие эффекта отлекарственной терапии или пересадки аутологичных хондроцитов, тяжестьзаболевания менее 65 баллов по шкале Lysholm, согласие пациента напроведение артроскопической санации сустава и наличие отрицательныйанализа на ВИЧ (Nguyen 2016).С другой стороны, группа авторов во главе с Jaewoo Pak в своей работевыделяет следующие показания к использованию СВФ для лечения ОА:мужчины и женщины в возрасте старше 50 лет, достоверное подтверждениедиагноза ОА коленного сустава при проведении МРТ исследования,отрицательные тесты Apley и McMurray, при проведении физикальногоосмотра, что свидетельствует о том, что пациенты являются кандидатами наэндопротезирование коленного сустава.
Так же к показаниям относитсянежеланиевыполнятьтотальноеэндопротезирование,неэффективностьконсервативных методов лечения, наличие стойкого болевого синдрома. Кпротивопоказаниям авторы относят: активный воспалительный процесс илизаболевания соединительной ткани, влияющие на выраженность болевогосиндрома (СКВ, ревматоидный артрит, фибромиалгия), наличие эндокринныхзаболеваний(гипотиреоз,сахарныйдиабет),активноеневрологическоерасстройство, которое может влиять на проявление болевого синдрома,активные заболевания сердечно-сосудистой и дыхательной систем, требующиелекарственной терапии.32В свою очередь Peter B.
в своем исследовании выделяет следующиепоказания к лечению: мужчины и женщины в возрасте от 20 до 70 лет,признаки ОА по Келгрен-Лоуренсу от 1 до 4, наличие ОА 1-3 степени порентгенологическим признакам, индекс массы тела меньше 35, баллы поAmerican Society of Anesthesiologists 1 или 2, боль в коленном суставе более 4мм по ВАШ, неэффективность приема НПВС или физиотерапии, илив\суставных инъекций кортикостеороидов или препаратов гиалуроновойкислоты. Противопоказания: применение оральных или парентеральныхкортикостероидов, использование кровезаменителей в анамнезе, в\суставныеинъекции любых препаратов гиалуроновой кислоты в течении предыдущих 6месяцев, или инъекций кортикостероидов в течении 3 месяцев, а также 4 стадияОА (Peter 2014).Другая группа авторов в своем исследовании использует следующиепоказания к лечению: возраст старше 18 лет, наличие ОА сустава 2-4ст поКелгрен-Лоуренсу, наличие функциональной недостаточности сустава прифизикальномосмотре,наличиерентгеновскихснимкови\илиМРТ,неэффективность консервативного лечения.
Противопоказания: активноезаболевание воспалительного характера, заболевания сердечно-сосудистой илидыхательной системы, наличие в анамнезе онкологических заболеваний илечение иммунодепрессантами (включая химиотерапию) в течении последних12 месяцев, в\суставные инъекции PRP или кортикостероидов, состояниездоровья, не позволяющее провести липосакцию под м\а, беременность илилактация (Michalek 2015).Группа авторов во главе с Koh выделяют следующие показания кпроведению лечения ОА коленного сустава при помощи МСК: возраст старше40 лет, наличие диагностировано идиопатического или вторичного ОА (поКелгрен-Лоуренсу 3ст в двух отделах, или 4 степень в одном отделе).Противопоказания- 4 степень ОА по Келгрен-Лоуренсу в двух отделах, наличиевоспалительных процессов или постинфекционного артрита, предшествующееартроскопическое лечение коленного сустава, варусная или вальгусная33деформация более 50, предшествующая травма коленного сустава, в\суставнаяинъекциякортикостероидоввтечении3месяцев,выраженныйневрологический дефицит, повреждение мениска (Koh 2013).Таким образом можно заключить, что большинство авторов используют 3основных группы критериев в качестве показаний для проведения терапииММСК.
Первым из них являются данные физикального осмотра и анамнеза(возраст, наличие жалоб на боли в коленных суставах, отсутствие эффекта отпроводимой терапии, отсутствие предшествующих вмешательств на целевомколенном суставе, заболевания различных органов и систем, ИМТ, оськонечности и степень деформации, объем движений в коленном суставе,отсутствие применения ряда лекарств, доказанной влияющих на метаболизмкостной и хрящевой ткани).Следующая группа критериев это данные инструментальных методовисследований (рентгенография коленного сустава и МРТ).И последняя группа – это данные оценки различных шкал и опросников,касающиеся функциональногосостоянияздоровьясостояния коленного сустава ипациентов(WOMAC,VAS,шкалаобщегоLysholm,функциональный индекс (FRI), объем движений (ROM), опросник AmericanSociety of Anesthesiologists, тест Apley and McMurray.В целом, несмотря на схожесть показаний для проведения лечения ОАколенного сустава при помощи аутологичных ММСК у разных авторов вконечном итоге нет единой стандартизированной системы показаний ипротивопоказаний к проведению терапии.341.7 Безопасность применения методикиПрипроведениитерапииОАколенныхсуставовприпомощивнутрисуставного введения СВФ, как и при использовании любой другойтерапевтическойпроцедурывозможновозникновениенежелательныхпобочных явлений и нежелательных реакций.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
