Диссертация (1154691), страница 20
Текст из файла (страница 20)
Непосредственно дистантный стимулирующий эффект намикроциркуляцию может являться одним из ключевых механизмов реализациирегенеративногодействияаутотрансплантации,таккакспособствуетподдержанию адекватной перфузии, препятствует развитию денервационнойгиперчувствительности сосудов, следовательно, обеспечивает оптимальнуютрофику при регенеративном процессе [А.И. Крупаткин и др., 2015].При изучении влияния травматизации тканей на микроциркуляторныепоказатели при оперативном вмешательстве без повреждения седалищного нервабыло установлено, что нормализация кровотока в тканях оперированнойконечности наблюдается на 7-е сутки, изменений в работе активных механизмовконтроля состояния микроциркуляторного русла, характерных для АТПКЛ, ненаблюдается.Для исследования особенностей реализации дистантного стимулирующегоэффекта было проведено изучение влияния аутотрансплантации полнослойногокожного лоскута на микроциркуляцию в условиях сохраненной иннервации.
Былоустановлено, что у животных в области трансплантации происходит увеличениеперфузии,сопровождающеесяповышением112нормированныхамплитуд113нейрогенных и миогенных колебаний, что соответствует воспалительнымизменениям микроциркуляции кожи [А.И. Крупаткин и др., 2005]. При этомпиковое увеличение перфузии в области аутотрансплантации совпадает сувеличениемперфузиикожитыльнойповерхностистопы.Повышениеперфузионного показателя кожи тыльной поверхности стопы у животных безповреждения нервных стволов под влиянием АТПКЛ наблюдается в течениепервых двух недель и сопровождается снижением нейрогенного тонуса сосудов,без выраженных изменений эндотелиального механизма модуляции кровотока.Полученныеданныепозволяютзаключить,чтодистантныйстимулирующий эффект на микроциркуляторное русло при аутотрансплантацииреализуется как при нарушенной, так и при сохраненной иннервации, при этомвыраженность стимулирующего эффекта при сохраненной иннервации меньше.Снижение выраженности и продолжительности стимулирующего эффекта присохраненной иннервации может быть обусловлено механизмами отрицательнойобратной связи, препятствующими сдвигам перфузии, так как длительноеподдержание повышенной перфузии микроциркуляторного русла конечности уздоровых животных на фоне отсутствия факторов, способствующих увеличениюпотребности в кровоснабжении, является метаболически нецелесообразным.Также следует подчеркнуть отличия в механизме реализации дистантногостимулирующего действия АТПКЛ на микроциркуляцию в условиях сохраненнойи нарушенной иннервации, которые проявляются различными изменениямиактивныхмеханизмовконтролямикрокровотока.Так,присохраненнойиннервации механизм повышения перфузии реализуется преимущественно путемизменения нейрогенного тонуса и не затрагивает вазодилатирующую функциюэндотелия.
В противоположность этому, при повреждении седалищного нервадистантныйстимулирующийэффектнамикроциркуляциюсопряженсувеличением амплитуд эндотелиальных колебаний, что особенно выражено прииспользовании АТПКЛ в сочетании с ПЭС. Известно, что вазодилататорнаяфункция эндотелия реализуется с участием системы оксида азота, котораяобладает ауторегуляторными механизмами за счет отрицательной обратной связи,113114реализуемой путем ингибиторного влияния повышения концентрации NO наэндотелиальную NO-синтазу [Е.В. Андронов и др.
2007; А.Н. Иванов и др., 2015а,2016b]. Вовлечение нитроксидэргической системы в реализацию эффектовАТПКЛсогласуетсясданнымилитературы,согласнокоторымпритрансплантации аллогенных тканей отмечается увеличение в системномкровотоке стабильных метаболитов оксида азота – нитратов и нитритов[В.У.
Галимова и др., 2007]. Реализация механизма отрицательной обратной связипри регуляции продукции оксида азота, возможно, объясняет отсутствиезначимых сдвигов эндотелиальных колебаний у животных без повреждениянервных стволов под влиянием АТПКЛ.Для изучения клеточных механизмов было проведено исследованииморфологии кожного лоскута. Установлено, что наблюдаемое истончениеаутотрансплантата происходит с деградацией его эпидермиса и изменениемсостава клеточных популяций дермы.
Обнаруженные регенеративный эффект истимулирующее действие на микроциркуляцию могут быть обусловленыдистантным влиянием веществ выделяемых при деградации элементов кожноголоскута. Так, в коже содержится большое количество гиалуроновой кислоты,поступление ее фрагментов в кровоток при деградации трансплантата можетобуславливать стимулирующее влияние на микроциркуляцию [С.Л.
Кузнецов идр., 2013; M. Bhatia et al., 2007; F. Gao et al., 2010]. Другой группойпотенциальных регуляторов, которые могут образовываться при деградациикожного лоскута, являются цитомедины, представляющие собой веществапептидной природы, способные оказывать локальные тканевые и дистантныеэффекты в организме [В.Х. Хавинсон и др., 2005, 2009; Л.И. Анохова и др., 2011].Было продемонстрировано, что действие пептидных веществ, в частностипрепарата «Семакс», способно изменять реактивность α-адренорецепторовсосудистой стенки [А.М Горбачева и др., 2016]. Аналогичный механизм можетобъяснять снижение реактивности адренорецепторов сосудов, а, следовательно,и снижениенейрогенноготонуса,обнаруженноеуживотных,которымвыполнялась АТПКЛ как в условиях сохраненной, так и нарушенной иннервации.114115Выявленныеизменениясоставаклеточныхпопуляцийдермыаутотрансплантата включает увеличение числа фибробластов, эозинофилов,лимфоцитов и макрофагов.
Присутствующие в коже в большом количествефибробласты являются продуцентами широкого спектра биологически активныхвеществ, способных оказывать дистантные стимулирующие влияния, таких какгликозаминогликаны, факторы роста, цитокины и другие [S. Werner et al., 2001;S. Trompezinski et al., 2004]. Так согласно литературным источникам,фибробласты принимают активное участие в формировании кровеносных илимфатических сосудов за счет секреции целого семейства эндотелиальныхростовых факторов – VEGF-A, -B, -C, -D [S. Trompezinski et al., 2004; S.
Bauer etal., 2005]. В тоже время в аутотрансплантате значительно увеличивается числомоноцитарно-макрофагальных элементов. Известно, что в условиях гипоксиимакрофаги значительно увеличивают продукцию VEGF [В.П. Киселева и др. 2009;L. Kempton et al., 2009; F. Lopes et al., 2011; P. Haninec et al., 2012].Одним из характерных изменений в составе клеточных популяций дермы,обнаруженных при гистологическом исследовании аутотрансплантата являетсяповышение числа эозинофилов.
Недавние исследования свидетельствуют, чтоэозинофилы играют значительную роль в восстановительных процессах нервнойткани при ишемическом инсульте, оказывая эндотелий-протекторное действие, атакже стимулируя ангиогенез за счет продукции VEGF [L. Guo et al., 2015].Следует также отметить, что эозинофилы обеспечивают метаболизм гистамина иповышение их числа в аутотрансплантате может быть следствием дегрануляциитучных клеток. Согласно литературным источникам в коже содержится большоеколичество тучных клеток, которые способны оказывать регенеративный эффект,в частности, при заживлении кожных ран [Б.Г. Юшков и др., 2011;Ю.С.
Храмцова и др., 2016]. Регенеративные эффекты тучных клеток связаны свыделением модуляторов воспаления, пролиферации и миграции клеток, включаягистамин, химазу, триптазу, гидролазы и пептидазы, гепарин и спектр цитокинов[Ю.С. Храмцова и др., 2016]. Кроме того, показано, что при дегрануляции тучных115116клеток происходит высвобождение ростовых факторов, в частности NGF[S. Kritas et al., 2014].Представленныевышеданныесвидетельствуютонакопленииваутотрансплантате большого количества клеток – продуцентов VEGF, которыйнепосредственновлияетнаструктурно-функциональныехарактеристикиэндотелиальных клеток [А.Н. Иванов и др., 2016а, 2016b] и на регенерациюнервной ткани [R.
Toledo et al., 2010; Р.Ф. Масгутов и др., 2011], что позволяетпредполагать стимуляцию продукции данного фактора одним из механизмовреализации эффекта АТПКЛ.Для подтверждения данной гипотезы былипроанализированы концентрации VEGF у животных во всех исследуемыхгруппах. Было установлено, что АТПКЛ способствует увеличению концентрацийданного фактора у экспериментальных животных как в условиях сохраненной, таки нарушенной иннервации. Выявленное увеличение продукции VEGF подвлиянием АТПКЛ доказывает его роль в механизмах реализации регенеративногоэффекта.Иммунные клетки в составе аутотрансплантата могут выделять целыйспектр регуляторных молекул, влияющих на регенерацию нервной ткани.В частности, активация макрофагов, сопровождается повышением активностиТ-клеток [Е.А.
Монастырская и др., 2008]. В свою очередь активированныеТ-клетки способны стимулировать регенерацию при повреждениях нервныхстволов за счет секреции нейротрофинов [R. Barouch et al., 2002]. Дляисследования данного механизма в реализации регенеративного эффекта АТКПЛбыли изучены концентрации нейроспецифических белков – маркеров дегенерациии регенерации нервной ткани в сыворотке крови: NEFH и NT-3. В ходеисследования было выявлено, что при изолированном использовании АТПКЛ и еекомбинации с ПЭС, у животных после нейрорафии снижается концентрацияNEFH, отражая уменьшение дегенеративных процессов в нервной ткани [J. Guy etal., 2008; K. Boylan et al., 2013], что при выполнении данной работы быломорфологически подтверждено снижением числа дегенеративно измененныхнервных волокон в проксимальных отделах оперированных нервов.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
