Диссертация (1154377), страница 32
Текст из файла (страница 32)
Для исключениявлияния природы кристаллического вещества на эффект механическойактивации субстанции взят образец сравнения ‒ субстанция натрия хлорида.250Таблица 52. Значения энергии активации процесса лиганд‒индуцируемойгибели S. ambiguum в растворах лактозы моногидрата и натрия хлорида (n=5,P=0,90).Условия технологическоговоздействияОбразецЭффектдо механической после механической механоактивацииактивацииактивацииЭнергия активацииobsЕа, кДж/мольЛактоза моногидрат118±15101±101,2Натрия хлорид87±1068±91,3Получены статистически значимые различия значений энергии активациидля растворов нативных и диспергированных образцов (табл.
53).Таблица 53. Оценка повторяемости методики (n=5, f=4).SDЕа,P,%tp,f∆, %( ± ∆)кДж/мольЛактоза моногидрат до механической активации11815902,131412118±14Лактоза моногидрат после механической активации10110902,1399101±9Бендазола гидрохлоридИзучение температурной зависимости лиганд-индуцированной гибелитест‒объектовв0,025%водныхрастворахбендазолагидрохлоридапроводилось в температурном диапазоне 26÷32ºС с шагом 2°С (рис. 83).251нативныйактивированный бендазол3,51,23,01,0tж, минtж, мин2,52,00,81,50,61,00,40,50,00,2298300302304298306T,K300302304306T,K120,5Equationy = a + b*xWeightNo Weighting0,09578Residual Sumof Squares0,90005Adj.
R-Square0,3Valueln tInterceptSlopeStandard Error85,26916,1974-25,94,89336ln(1/t)0,0-0,3-0,5-0,8-1,0-1,33,283,293,303,311000/T,K3,323,333,34-134Рисунок 83. Зависимость времени жизни клеточного биосенсора S. ambiguum от температуры в 0,025% водныхрастворах бендазола гидрохлорида (серия Р111202) в прямых и в аррениусовских координатах: 1 и 3 ‒ до механическойактивации, 2 и 4 ‒ после механической активации; n=5, р=0,90.252Получены статистически значимые различия значений энергии активациилиганд-индуцированной гибели тест‒объектов в растворах фармацевтическойсубстанциибендазолагидрохлоридадоипослемеханохимическоговоздействия (табл. 54).
Оценка повторяемости методики представлена втаблице 55.Таблица 54. Значения энергии активации процесса лиганд‒индуцируемойгибели S. ambiguum в 0,025% растворах бендазола гидрохлорида (n=5, P=0,90).Условия технологическоговоздействияОбразецЭффектдо механической после механической механоактивацииактивацииактивацииЭнергия активации( Еа ± SD), кДж/мольБендазолагидрохлорида215±4094±182,3Таблица 55. Оценка повторяемости методики (n=5, f=4).SD Еа,P, %tp,f∆( ± ∆), %кДж/мольБендазола гидрохлорид до механической активации21540902,1339215±3918Бендазола гидрохлорид после механической активации9418902,131794±1718На основании закономерностей аррениусовской кинетики показановлияниемеханохимическойактивациинабиологическуюактивностьфармацевтических субстанций и вспомогательных веществ различной природы.253Анализполученныхтемпературныхзависимостейвременижизниклеточного биосенсора в растворах механоактивированных субстанцийпорошков АФИ и ВВ указывают на «структурный» фактор сниженияЕаobsлиганд-рецепторного взаимодействия S.
ambiguum [490]. Измельчение порошкасубстанций по типу «свободного, прямого удара» уменьшает масштабгетерогенности, определяющий характерное время массопереноса реагентов(лигандов и клеточного рецептора) друг к другу. Это способствует увеличениюскорости реакции и уменьшению энергии активации [491]. После измельчениясвободная поверхность не является равновесной и статически устойчивой − вприповерхностном слое начинаются процессы перестройки по направлению кравновесному состоянию. Упорядочение структуры (переход «порядок—беспорядок—новый порядок») значительно зависит от температуры системы вцелом [491, 492].Время действия механохимической активации, как результат тепловоговоздействия, связано со скоростью релаксации остаточных напряжений илиупругих деформаций, которая отстает от изменения температуры, показывая,тем самым, проявление медленных релаксационных явлений, подробнорассмотренных в литературе [129, 392].254ЗАКЛЮЧЕНИЕВ диссертационной работе представлены результаты по практическомуприменению метрологического комплекса, ключевыми аспектами которогоявляются: лазерные методы анализа; лазерные измерительные средства какпромышленного,такисобственногомалосерийногопроизводства,обеспечивающие единство и точность результатов измерения; создание ГПЭединиц дисперсности порошков, взвесей и аэрозолей, а также разработкагосударственного стандарта ‒ ОФС для ГФ РФ «Определение распределениячастиц по размеру методом лазерной дифракции».Показано, что физико‒химические свойства воды, обедненной тяжелымизотопом водорода, отличаются от воды природного изотопного состава.Полученныерезультатыпредставляютметрологическуюзначимость,поскольку применение воды с соотношением D/H=4-6ppm в качестверастворителя устраняет погрешности результатов измерения методамилазерного светорассеяния вследствие отсутствия «шумов», вызываемыхсветорассеянием гигантскими плотностными неоднородностями воды.Продемонстрированыфармацевтическойхимиипрактическиелазерныхвозможностиметодовпримененияанализаврастворовфармацевтических субстанций и вспомогательных веществ гомогенной игетерогенной природы: суспензий, взвесей, порошкообразных субстанций илекарственных препаратов, настоек, растворов биорегуляторных пептидов,клеток штамма E.
Coli K-12, минеральных вод и образцов воды с разнымсодержанием дейтерия.Разработана методика, позволяющая оценить скорость растврения АФИи ВВ во времени, на основании метода лазерной дифракции света. Показановлияние на солюбилизационные характеристики субситанций-порошковтаких факторов, как изотопный состав воды, условия пробоподготовки идисперснотсь растворяемого вещества.255ВЫВОДЫРазработаны1.научно-методологическиеподходыкоценкекачества лекарственных субстанций (бендазола гидрохлорида, топирамата),вспомогательных веществ (лактозы моногидрата), готовых лекарственныхформ (инсулина аспартата, календулы и пиона уклоняющегося настойки),биологически-активныхбиорегуляторныхвеществпептидов,(природныхбычьегоисинтезированныхсывороточногоальбумина),бактериальных культур (клетки штамма E. Coli K-12) и минеральных вод наосновании результатов исследования лазерного светорассеяния в условияхизотопного (D/Н) варьирования состава растворителя, дисперсного состава иусловий пробоподготовки растворяемого вещества.Описана2.метрологияизмерительныхметодовисозданизмерительный комплекс в рамках Государственной поверочной схемыизмерения параметров дисперсности порошков, суспензий и аэрозолей,включающие: разработку собственного измерителя дисперсности лазерного(ИДЛ−1), испытание собственного портативного счетчика аэрозольныхчастиц (А−2), создание рабочих эталонов порошкообразных материалов ивзвесейчастицметрологическиедляоценкикачествахарактеристикиЛС.Определены(неисключеннаяосновныеотносительнаяпогрешность δ, % стандартная, расширенная неопределенности приизмерениидиаметра,счетной,объемнойконцентраций,функциираспределения частиц по размеру) современных измерителей дисперсности.3.Продемонстрированыпреимуществаприменениякосвенныхметодов (динамического и статического светорассеяния) для стандартизациии контроля качества различных фармацевтических объектов (гомогенных игетерогенных растворов АФИ, настоек, минеральных вод, растворовбиорегуляторныхбелков,бактериальныхкультур)попоказателям«описание», «чистота», «подлинность».
В сравнении с методами прямогоизмерения (оптическая микроскопия) это дает возможность проведения256статистической морфометрической оценки всей анализируемой пробы вшироком диапазоне определяемых размеров (1нм ‒ 100мкм) и анализачисленного и объемного распределений.4.Разработан и применен образец лабораторного оборудования,сочетающий метод ОКМ с интерферометрией для экспресс-идентификациибез вскрытия упаковки водных растворов NaCl разной концентрации,включая 0,9% (изотонический) раствор по индивидуальному расположению«облаков рассеяния» на двумерных диаграммах.
Диаграммы зависимостивариабельностиsdiотзначениядескриптораd i,характеризующиеустойчивость стационарного процесса образования/распада плотностныхнеоднородностейводы,показали,также,пригодностьдифференцирования образцов воды с содержанием тяжелого изотопадля21H ( D) вшироком диапазоне от 4ppm до 137ppm.5.Разработана и валидирована методика кинетической оценкирастворения АФИ и ВВ с применением малоуглового лазерного измерителядисперсности, основанная на регистрации во времени величины лазерногосветозатемнения.
Доказана прецизионность разработанной методики вусловиях повторяемости (при Р=95%), включающая вычисление значенийстандартного отклонения( ± SD), относительного доверительногоинтервала среднего значения ( ± ∆) и относительной ошибки среднего(,%) в расчётах констант скорости растворения методом лазернойдифракции света. Разработанная методика может быть применена дляусовершенствования и дополнения существующего фармакопейного теста«Растворимость».6.
Достоверно, в том числе при проведении межсерийного анализа,доказана реализация нормального КИЭ ( >1) по растворителю приисследовании растворения в воде с измененным изотопным составом поводороду АФИ и ВВ разных химических и фармакологических классов:=2,3 для бендазола гидрохлорида (на примере серии Р111106);=1,2 для257лактозы моногидрата (на примере серии ММ25711) и=1,1 для топирамата.Ранжирование значений log Poct-w для исследуемых субстанций в порядкеувеличения их водной растворимости показало, что КИЭ по растворителювыражен сильнее для гидрофобных и мало растворимых в воде веществ. Этотфакт может иметь важное значение для управления солюбилизационнымихарактеристиками веществ с подобными свойствами, применяя воду,обедненную тяжелым изотопом21H ( D) .7.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
