Автореферат (1152196), страница 3
Текст из файла (страница 3)
Ее можно увеличитькомплексообразованием с g-циклодекстрином (g-ЦД). РебM (1,0-4,0 г) и g-ЦД (4,0 г)суспензируют в воде (100 см3) и нагревают до 100-120oC до их растворения, раствор охлаждаютдо комнатной температуры и сушат. Растворимость комплекса около 250 мг/ см3.Лиофилизированные смеси РебM с мальтодекстрином и эритритолом (1:1, вес/вес) такжепоказывают более высокую растворимость (более чем 100 мг/ см3) по сравнению с чистым РебM(Patent US Appl. 2014/0171519, 2014).Растворимость РебM улучшается путем распылительной сушки.
Этот метод особенноэффективен, если смесь, предназначенная для распылительной сушки, содержит комбинациюэмульгатора, поверхностно-активного вещества и полимерного компонента, как ксантановаякамедь, каррагенан, циклодекстрин, мальтодекстрин, додецилсульфат натрия, натрийкарбоксиметилцеллюлоза, полиэтиленгликоль, модифицированный крахмал и т.д. (Patent WO2015/006764, 2015).1.2.3. Стабильность гликозидов стевииСтевиозид является очень стабильной молекулой при 100°C в растворах рН 3,0-9,0,однако при рН выше 10,0 происходит его быстрая деградация (Bakal, Nabors, 1986).
РебАстабилен в напитках при 37оС и низких рН в течение трех месяцев (Chang, Cook, 1983).Порошкообразный стевиозид и РебА не подвергаются изменению при 120°C в течение 1 часа,однако начиная с 140оС начинает медленно деградировать и полностью разрушаются при 200оС(Kroyer, 1999).Стевиозид и РебА при 30оС в течение 30 суток не претерпевают изменения в соусах игидролизатах белков, однако, частично разлагаются в уксусе при 80оС (Shirakawa, Onishi, 1979).При комнатных температурах они достаточно стабильны в газированных напитках,подкисленных фосфорной или лимонной кислотами, а также в разбавленных растворах уксусной,лимонной, винной и фосфорной кислот, в кофейных и чайных напитках (Chang, Cook, 1983).18Кроме того, при температурах до 80оС в течение 4-х часов стевиозид и РебА не вступаютв реакцию с другими подсластителями типа сахарин, цикламат, аспартам, ацесульфам К инеогеспиридин дигидрохалкон, что важно при приготовлении синергических смесей.Таким образом, стевиозид и РебА показывают хорошую стабильность в обычныхусловиях их применения.
Однако, при высоких температурах и крайних значениях рН протекаетих частичный химический гидролиз (Kroyer, 1999).Гликозилированный стевиозид имеет достаточную стабильность при 50°С и рН 2,0-6,5 втечение 72 ч, однако, до 55% деградация наблюдалась при рН 3,0 и 80°С.Анализ гидратной формы РебD был проведен при различных температурах от 40°С до300°С при согревании 10°С/мин. Результаты показывают небольшое изменение тепловойэнергии (эндотермический тепловой эффект) около 81-104°C и до достижения точки плавлениявыше примерно 260°С, т.е. происходит потеря воды (или гидратов) в этом диапазоне температур.Помимо этого, небольшого изменения энергии, РебD оставался стабильным до 260°С (Patent USAppl.
2011/0104353, 2011).В виде сухого порошка, РебM стабилен в течение не менее одного года при температуреокружающей среды и в условиях контролируемой влажности. Поведение РебМ очень похоже наРебА (Prakash et al., 2014c).В растворе РебM наиболее стабилен при рН 4,0-8,0 и заметно менее стабилен при pH<2,0.Аналогично РебА, стабильность РебМ уменьшается с увеличением температуры.В водных растворах (рН 2,0-8,0) основные пути обмена реакции, ведущие к потере РебMявляются: (а) изомеризация C-16 олефина с образованием C-15 изомера, (б) гидратация С-16олефина, (в) гидролиз глицидилового эфира в C-19, (г) изомеризация C-16 олефина собразованием C-15 изомера. Все эти соединения являются сладкими на вкус и имеют похожые сРебМ вкусовые характеристики. В экспериментах in vitro, РебМ и РебА превращаются в агликонстевиол и глюкуроновую кислоту стевиола, известную как стевиол глюкуронид (Prakash et al.,2014b, c).Щелочной гидролиз РебM приводит к образованию РебB. РебМ показывает хорошуюустойчивость к высокотемпературной обработке в течении короткого времени и припоследующем хранении продуктов, таких как ароматизированный холодный чай, соки, напиткидля спортсменов, ароматизированное молоко, питьевой йогурт и не подкисленные чаи (Prakashet al., 2014c).Все гликозиды достаточно стабильны к микроорганизмам и фотостабильны.Суммируя, можно заключить, что:191.
Стевиозид, РебA, РебD и РебM стабильны при хранении в полиэтиленовых мешках истеклянных бутылках.2. Гликозиды стевии устойчивы к термической обработке при широком диапазоне рН,однако стабильность в нейтральных растворах выше.3. Стевиозид, РебA, РебD и РебM стабильны в растворах различных органических кислот.4. Они стабильны в условиях газированных напитков типа кола, в сухих пищевых смесях ижевательных резинках, кисломолочных продуктах и других в течение длительногопериода хранения и пастеризации. Стевиолгликозиды фотостабильны.1.2.4. Биологические свойства гликозидов стевииСтевиозид и другие гликозиды стевии кроме интенсивной сладости обладают такжедостаточно уникальными биологическими свойствами (Chan et al., 1998; 2000; Jeppesen et al.,2002; Takahashi et al., 2001; Yasukawa et al., 2002). При его регулярном употреблении снижаетсясодержание радионуклидов и холестерина в организме, снижается содержание сахара в крови,улучшается регенерация клеток и коагуляция крови, тормозится рост новообразований,укрепляются кровеносные сосуды.
Он проявляет также желчегонное, противовоспалительное идиуретическое свойства, препятствует образованию язв в желудочно-кишечном тракте (Зубцови др., 2002).Стевиозид может использоваться при лечении диабета, а также для восстановлениянормальных функций поджелудочной железы (Soejarto et al., 1983). При этом, в экспериментахна мышах выявлено, что как стевиозид, так и стевиол в дозах от 1 нмоль/ дм3 до 1 ммоль/ дм3 вприсутствии 16,7 ммоль/ дм3 глюкозы улучшают секрецию инсулина. Их инсулинотропноедействие находится в строгой зависимости от концентрации глюкозы, так как стевиозид (1ммоль/ дм3) и стевиол (1 мкмоль/ дм3) усиливают секрецию инсулина только при концентрацииглюкозы выше 8,3 ммоль/ дм3, а также сохраняется при отсутствии внеклеточного Ca2+.
Выявленотакже, что стевиозид и стевиол усиливают секрецию инсулина из бета-клеток INS-1 линии. Приэтом они влияют на аденозин трифосфат-чувствительную К+-канальную активность, однако неимеют никакого действия на циклический аденозин монофосфат, т.е. стевиозид и стевиолусиливают секрецию инсулина через прямое действие на бета-клетки поджелудочной железы(Jeppesen et al., 2000b; Koyama et al., 2003).В опытах на больных диабетом крысах типа Goto-kakizaki установлено, что внутривенновведенный стевиозид (0,2 г/кг) значительно угнетает отклик глюкозы и, наоборот, повышаеттаковой для инсулина. Одновременно угнетается также уровень глюкагона.
В течение20эксперимента уровень инсулина поднялся до базовой единицы у нормальных крыс, т.е. стевиозидимеет не только антигипергликемическую активность, но также обладает инсулинотропнымдействием и глюкагон-снижающим эффектом (Jeppesen et al., 2000a).Поэтому, стевиозид имеет все возможности стать новым антидиабетическим средством прилечении диабета второго типа.Стевиозид не является субстратом для Streptococcus mutans, Lactobacillus plantarum иLactobacillus casei, ассоциирующие с зубным кариесом (Kinghorn, Soejarto, 1985).Экстракт стевии снижает сердцебиение и артериальное среднее кровяное давление (Boeckh,Humboldt, 1981; Jeppesen et al., 2003; Melis, 1992a). В экспериментах на крысах установлено, чтокак верхнее, так и нижнее артериальное давление находятся в прямой зависимости отвнутривенно введенной дозы стевиозида (50-200 мг/кг).
Максимальное снижение длясистолического и диастолического кровяного давления составляло 31,4±4,2% и 40,8±5,6%,соответственно. При этом эффект сохраняется по крайней мере в течение одного часа при дозестевиозида 200 мг/кг. Уровень сывороточного допамина, норадреналина и эпинефрина(адреналина) изменяется незначительно после 60 мин внутривенного введения 100 мг/кгстевиозида. Таким образом, стевиозид может быть эффективным средством для сниженияартериального кровяного давления, без какого-либо влияния на сывороточные катехоламины(Melis, 1995; Chan et al., 1998).Аналогичные результаты получены с людьми при оральном введении стевиозида.Исследования проводились на 106 пациентах, больных гипертонией возраста от 28 до 75 лет втечение 1 года с использованием одной капсулы стевиозида весом в 250 мг ежедневно.
Через тримесяца как систолическое, так и диастолическое артериальное давление существенно снизилосьи сохранилось в течение года (верхнее снизилось от 166,0±9,4 до 152,6±6,8 ммHg, а нижнее – от104,7±5,2 до 90,3±3,6 ммHg). При этом, биохимические параметры, включая липиды и глюкозу,изменилисьоченьнезначительно,т.е.стевиозидможетбытьальтернативнымилидополнительным терапевтическим средством для гипертоников (Chan et al., 2000).Стевиозид, РебА и РебС, а также дулкозид А обладают сильным ингибирующим эффектомпротив 12-О-тетра-деканолифорбол-13-ацетата (ТФА), вызывающий воспаление у мышей. Доза,оказывающая 50%-ное снижение ТФА, составляла 54,1-291,6 мкг/кг. Кроме того, стевиозид исмесь РебА и РебС, а также дулкозид А в дозах 1,0 и 0,1 мг/см3, существенно ингибируют влияниеТФА при опухоли кожи, которая инициируется 7,12-диметилбензил [a] антраценом, т.е.обладают противораковым действием (Yasukawa et al., 2002).
Это может стать важным факторомдля предупреждения и выявления злокачественной опухоли.21Интересноотметить,чтовводномэкстрактеSteviarebaudianaприсутствуетгетерополисахарид анионного характера, который в in vitro экспериментах существенноингибирует антиротавирусную активность четырех серотипов путем блокирования связываниявирусов. Полисахарид имеет молекулярную массу 9800, состоит из уроновой кислоты исодержит также серин и аланин (Takahashi et al., 2001).Ни чистый стевиозид, ни экстракт Stevia rebaudiana не проявляют активности в опытахострой токсичности на крысах (Pezzuto et al., 1985; Pezzuto, 1986; Aze et.
al., 1991). Кроме того,они не обладали мутагенной активностью против различных штаммов Salmonella typhimurium, E.coli и Bacillus subtilis (Pezzuto et al., 1985). Никаких отклонений не выявлено после вскармливанияхомяков стевиозидом в количестве 2,5 г/кг (Yodyingyuad, Bunyawong, 1991; Akashi, 1975; Akashiet al., 1975; Toskulkao et al., 1994).Изучению токсичности стевиозида в короткий и длительный периоды воздействия намлекопитающих посвящено достаточно много работ (Matsui et al., 1996a, b; Mori et al., 1981;Toskulkao et al., 1997; Toyoda et al., 1995; Toyoda, 1997; Xili et al., 1992), которые подтверждают,что он не обладает вредным воздействием на половые функции, канцерогенностью игенотоксичностью.
Фармакокинетические in vivo исследования стевиозида на крысах показали,что стевиозид сначала гидролизуется до стевиола (агликон) и, затем абсорбируется в слепойкишке крыс (Nakayama et al., 1986; Cardoso et al., 1996; Suanarunsawat et. Al., 1997). Аналогичностевиозиду, РебA в конечном счете деградируются до стевиола под действием кишечноймикрофлоры крыс в анаэробных условиях (Wingard et al., 1980).1.2.5.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
