Диссертация (1151613), страница 6
Текст из файла (страница 6)
Серинявляется источником углеродного скелета для синтеза цистеина.Каталитические функции ряда ферментов (химотрипсин, трипсин,бактериальныещелочнаяпротеазы,фосфатаза)эстеразы,фосфорилаза,обусловливаютсяфосфоглюкомутаза,реакционнойспособностьюгидроксильной группы остатка серина, входящего в состав активного центраэтих ферментов. В сферу действия ферментов сериновой группы входятреакции гидролиза пептидов, амидов, эфиров карбоновых кислот и переносаостатка фосфорной кислоты. Производными серина являются антибиотикициклосерин, азасерин (Северин Е.С., 2010). Серин способствует болееэффективному всасыванию железа и его поступлению в системный кровоток(Финогенова Н.А., 2005), участвует в превращении фибриногена в фибрин32(Бышевский А.Ш., 1983), а также играет роль во включении селена в составселеноспецифических протеинов, к которым относятся дейодиназы иглутатионпероксидазы (Глинник С.В., 2009).
Серин является важнойаминокислотой для коконопрядущих насекомых (Клунова С.М., 2005). Унасекомых, как и другие аминокислоты, серин влияет на регуляциюактивности множественных форм дегидрогеназ (Гаверова Ю.Г., 2000).Известно, что аминокислоты являются элементами пептидных групп,необходимыхдляобразованиябелков(КоротенкоВ.Н.,2014).Вживотноводстве в качестве кормовых добавок применяют различныеаминокислотные препараты, в том числе, содержащие серин (Подобед Л.И.,2010).Так, при даче аминокислотного, витаминно-минерального препарата«Валеонорм» (содержит комплекс микроэлементов и аминокислот, вчастности в значимом количестве серин) песцам выход щенков прирождении на одну самку в опытной группе составил 6,78, что на 1,68 больше,чем в контроле (Титов А.С., 2006).
Необходимо отметить, что данных поиспользованию серина в животноводстве достаточно мало.Выбор серина в качестве составляющего композиции для обработкиинкубационных яиц обусловлен тем, что он является компонентомфосфолипида - фосфатидилсерина, а коламин- фосфатидилэтаноламина ифосфатидилхолина. Эти фосфолипиды входят в состав бислоя мембранклеток, который непременно повреждается при оксидативном стрессе.
Дляпополнения резерва фосфолипидов необходимы интенсивные процессысинтеза, которые энергозатратны. Поэтому нами были проведены несколькосерий экспериментов по подбору различных энергостимулирующих БАВ.Среди прочих максимальный эффект был получен при сочетанномиспользовании ранее заявленных БАВ и янтарной кислоты.Таким образом, на основании анализа литературных данных можнопредположить, что нивелирование последствий оксидативного стресса уэмбрионов кур вышеприведенными метаболитами, за счёт универсальности33их действия, в частностиантиоксидантного, непременно обусловитоптимизацию обменных процессов, а вместе с тем качества становления,повышение жизнеспособности, а, в дальнейшем, и продуктивности особей(СеверинЕ.С.,2010;АзарноваТ.О.,2013).Схемацентральныхбиохимических аспектов действия заявленных БАВ представлена ниже(Рисунок 6).Рисунок 6 - Центральные биохимические аспекты действия коламина,янтарной кислоты и серина при стрессе (схема составлена на основанииданных Березова Т.Т.
и др., 1998)Как видно из предшествующих разделов, использование коламина,янтарной кислоты и серина распространено в сельском хозяйстве, а также вмедицине.Однакосочетанноеихприменениедлястимуляцииэмбрионального развития сельскохозяйственной птицы до сих пор неизучено.34ГЛАВА 2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ2.1. Материалы и методы исследованийИсследования проводили во ФГУП ППЗ «Птичное», на кафедрезоогигиены и птицеводства имени А.К. Даниловой, а также на кафедре химииимени профессоров С.И. Афонского, А.Г. Малахова, в лабораториях«Веттест», «Гемотест».Были подобраны контрольная и опытные партии яиц по принципуаналогов с учетом времени снесения яиц, сроков хранения и массы.
Яйцаопытных партий обрабатывали растворами БАВ методом орошения.Условия кормления и содержания птицы, а также характеристика кросса«Шейвер 2000» представлены в приложениях А, Б, В. Яйца инкубировали винкубаторах типа ИУВ-Ф-15-31. Птицу выращивали в клеточных батареях L103 и L-102.
Все эксперименты кроме третьей серии осуществляли сдвукратной повторностью.Общая схема экспериментов представлена в Таблице 1.Таблица 1 - Общая схема исследованийСерииэкспериментовНаименование серий экспериментов1Поиск оптимальных концентраций коламинаи янтарной кислоты для предынкубационнойобработки яиц курПодбор оптимальной концентрации серинапри сочетанном использовании с коламиноми янтарной кислотойСравнительный анализ применения Як, Кол иСер отдельно и сочетанноЭффективностьдвукратнойобработкиинкубационныхяиц:доинкубациирастворами Кол, Як и Сер и на 19-е суткираствором КолПроизводственная проверка234548963808272016324680Общее колво цыплятдля дальнейшеговыращивания, гол900700500300600918300727205008326460091632300-21681000Эксперимент123456Общеекол-воинкуб.яиц, шт.За период исследований проинкубировано 28438 яиц и выращено 5700головмолоднякакурвусловиях35птицефабрики.Болееподробноеобоснование каждой серии экспериментов будет дано в соответствующихразделах.Материалом для исследования служили:1.
Яйца инкубационные, полученные от кур кросса «Шейвер 2000»2. Эмбрионы кур3. Цыплята в суточном возрасте и их некоторые внутренние органы4. Кровь5. Сыворотка крови, полученная от эмбрионов и цыплят суточноговозраста.Отборпробкровиуцыплятосуществлялиприконтрольных убоях, спустя сутки после вывода.6. Молодняк кур до 60-дневного возрастаВ процессе экспериментов выполняли следующие исследования:Зоогигиенические:Контроль за режимом инкубации;Определение некоторых показателей микроклимата при выращиваниицыплят:- осещенности (при помощи люксметра Ю-16);- температуры и влажности (при использовании гигрометра/термометраRcom Digilog 3). Зоогигиенические показатели представлены в приложении.Зоотехнические:Масса эмбрионов - использовали электронные весы OHAUS AdventurerAX124/E с точностью 0,0001 г.Усушка (потери в массе яиц в процессе инкубации)- электронные весы сточностью до 0,1 г).Большой и малый диаметры сосудистых полей, длина эмбрионов- сиспользованием штангенциркуля с точностью до 0,1 см.Изучали показатели биологического контроля, в том числе следующиеотходы инкубации:– неоплодотворенные– кровяные кольца36– замершие– задохлики– слабыеНа основе вышеперечисленных показателей были определены:– выводимость яиц– вывод цыплятДля оценки качества молодняка суточного возраста были использованышкалы «Пасгар» по методике Дуиндам Д.
(2004) и «Оптистарт». Так, шкала«Пасгар» включает в себя: рефлекс поведения (переворота со спины на ноги),оценку пупочного кольца, плюсны, пальцев ног, клюва и живота; шкала«Оптистарт»: мышечный тонус шеи (подъем головы в положении «провисголовой вниз»), рефлекс поведения, оценку пупочного кольца, клюва иживота (Епимахова Е.Э., 2013).При определении экстерьера использовали метод промеров (измерениестатей) в сантиметрах у цыплят в 60-дневном возрасте при помощиизмерительной ленты, а также метод вычисления индексов телосложения.Индексы вычисляли согласно установленным формулам (Коган З.М., 1979).Интерьерные показатели:- определены массы сердца, печени, селезенки, фабрициевой сумки,остаточного желтка, мышечного и железистого желудков с использованиемэлектронных весов OHAUS Adventurer AX124/E с точностью 0,0001 г.Физиологические:Ректальная температура тела цыплят определялась электротермометромSanitas SFT11/1 blau с точностью до 0,1°С, под крылом - инфракраснымтермометром Medisana FTO с точностью до 0,1°С.Ветеринарные:-патологоанатомические диагнозы павших цыплятКлинико-биохимические исследования крови и сыворотки крови (АнтоновБ.И.,1991; Кондрахин И.П., 2004; Маршалл В.
Дж., 2011; Лелевич С.В., 2013)- общие липиды (колориметрический);37- глюкоза (по цветной реакции с орто-толуидином);-ПВК (по Фреедману-Хаугену);-фосфатидилхолин (количественное определение);-ЛДГ (метод Севела-Товарека);- активность лизоцима (нефелометрический метод);- БАСК (фотоэлектронефелометрический);-общий белок (по биуретовой реакции);-альбумин (колориметрический метод);- иммуноглобулины (радиальная иммунодиффузия по Манчини)- α-фетопротеин (иммуноферментный метод);- мочевая кислота (с фосфорно-вольфрамовым реактивом);- креатинин (по реакции Яффе);- кальций (с индикатором мурексидом);- фосфор (с ванадат-молибденовым реактивом);- железо (колориметрическим тестом с феррозином);- медь (колориметрический метод без депротеинизации);- билирубин общий и прямой (метод Йендрашика-Грофа);- активность АТФ-азы (метод поверхностной клеточной мембраны)- содержание АТФ (биолюминисценция);- пентозы (метод дегидратации пентоз в фурфурол);-маркерформированиякостногоматрикса(электрохемилюминесцентный иммуноанализ, Cobas e601(Roche))- β-Cross laps (иммуноанализ)активность ферментов:- АЛТ и АСТ (по методу Райтмана-Френкеля);- α-амилаза (по методу Каравея);- щелочная фосфатаза (метод Бодански);- липаза (колориметрический)- холинэстераза (фотометрический);- СОД (колориметрический)38P1NP- пероксидаза (колориметрический)- АОА (основан на регистрации скорости окисления восстановленной формы2,6-дихлорфенолиндофенола (2,6-ДХФИФ) кислородом, растворенным вреакционной среде)- ГГТ (субстрат под действием ГГТ расщепляется с образованием 4нитроанилина, который определяют фотометрически после остановкиреакции подкислением)содержание продуктов липопероксидации:- ОШ (колориметрический)- МДА (колориметрический)- трансферрин (иммунотурбидиметрия)- церулоплазмин (иммунотурбидиметрия)Коэффициент насыщения трансферрина (ТФ) железом рассчитывали поформуле: К (%) = сывороточное железо / ТФ* 100Гематокрит определяли методом, который основан на разделенииплазмы и эритроцитов с помощью центрифугирования.
Определениепроизводили в гематокритной трубке, представляющей собой стекляннуюпипетку, разделенную на 100 равных частей, а гемоглобин - методомкапиллярного электрофореза. Подсчет эритроцитов под микроскопом вели вопределенном количестве квадратов счетной сетки камеры Горяева ипроводили пересчет на 1 мкл крови, исходя из объема квадратов и разведениякрови. Микроскопирование мазков крови и фотографирование клеток кровипроводилось с использованием микроскопа Motic Educator.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
