Диссертация (1151601), страница 11
Текст из файла (страница 11)
Гематоксилин и эозин. Об. 10, ок.10; б – рыбы опытной группы,увеличенная лимфоидная железа. Об. 10, ок.10абРис. 30 – Микроструктура селезёнки. Гематоксилин и эозин: а – контрольнаягруппа рыб. Об.40, ок.40; б – опытная группа рыб, расширенная белая пульпа.Об.40, 10643.2.2 Опыт 2. Результаты исследований при заражении сеголетоксибирского осетра изолятом SIz6/0311.Клиническоетечениеинфекции.Продолжительностьэкспериментасоставила 49 суток.
Первые симптомы наблюдались на 32 сутки. В дальнейшемотмечалось обострение течения инфекции, которая достигла максимальногоподъёма к 38 суткам, когда погибла 1 рыба. На 39 сутки клинические признакиразной выраженности выявлялись у всех подопытных рыб, 8 из которых с явновыраженными симптомами погибли. На 40 - 49сутки погибли ещё 31 рыба с явновыраженными признаками болезни.Развития клинических признаков и кумулятивная гибельсеголетковсибирского осетра, отражена в таблице 8, 9.Таблица 8 – Развитие симптомов у сеголетков, заражённых штаммомSIz6/0311КоличестводнейсКлинические признаки и внешние изменениямоментазаражения32Апатия, вялость, отказ от корма38Нарушение координации движений, еморрагии в областижучек и рта, некроз плавников, гиперплазия эпидермиса39-40 Пятнистые кровоизлияния, геморрагии жабр, изъязвлениежучек39-49 Очаговый некроз кожи, вторичная инфекция(сапролегниоз),адинамия, плавание вверх брюхомТаблица 9 – Кумулятивная гибель сеголетков сибирского осетра (n=40),заражённых изолятом SIz6/0311КоличестводнейпослезараженияКумулятивнаягибель, экз./%323909/234428/704940/100Из таблицы 9 видно, что заболеваемость и смертность рыб составила 100%.У рыб контрольной группы патолого-анатомических изменений и гибели не было.65В процессе опыта от больных, вынужденно убитых рыб (15 экз.) были взятыпробы для микроскопических исследований.
Параллельно с этим такие же пробывзяты от рыб контрольной группы (6 рыб).Результаты вирусологических исследований. Вирус был выделен из кожи,плавников, паренхиматозных органов, сердца. Для выделения использовалиськлеточные линии SSO-2 и WSS-2. Титры вируса в пробах кожи и плавников былов среднем 7 lg ТЦД50/мг ткани, в печени, почках, кишечнике – 6 lg ТЦД50/мгткани, в сердце, жабрах – 5 lg ТЦД50/мг ткани, селезёнке – 4, мозге – 3 lg ТЦД50/мгткани.Гидрохимическиепоказателикачестваводывтечениеопытасоответствовали оптимальным значениям (табл. 10).Таблица 10 – Гидрохимические показатели качества водыПоказателиО2NH4+NO2-NO3-pHdGHFeКонцентрация,мг/л6-8˂0,4˂0,2˂0,37-86-7˂0,01Клинические признаки и патологоанатомические изменения.
Первыерыбы с признаками болезни появились на 32 сутки после заражения. У этих рыбнаблюдались апатия, вялость, отказ от корма. На 38 сутки у 1 рыбы появилисьпятнистые и очаговые кровоизлияния в области жучек и рта, очаги гиперплазии вобласти боковых жучек, на кончике хвостового и анального плавников былизаметы участки распада ткани, на поверхности тела бледные пятна. За 2-3 часа догибели рыба была подвергнута вскрытию для патолого-анатомических ипатогистологических исследований. При вскрытии у неё отмечали точечныекровоизлияния на серозной оболочке брюшной полости. Печень бледная ирыхлая.
Почки бледные, уменьшенные в объёме. На 39 сутки погибли 8 рыб. Увсех рыб наблюдались признаки, описанные выше. На 40 сутки погибли 6 рыб, укоторых наблюдали пятнистые кровоизлияния, очаги некроза тканей хвостового,анального, брюшных и грудных плавников. Жучки с точечными кровоизлияниямии язвами в области вершин. У 3 рыб анус ярко-красный.
Кончики жабр у всех 766особей сильно гиперемированы. На теле, хвостовом и грудных плавникахбледные пятна. За 2-3 часа до гибели у всех 7 рыб были взяты органы дляпатологоанатомических и патогистологических исследований. У всех рыбнаблюдалиследующие изменения: печень бледная, рыхлая (рис 16), почкиуменьшены в объёме, селезёнка светло-розового цвета. На 41 сутки – погибли 3рыбы с кровоизлияниями на теле, признаками некроза на кончиках хвостового,анального, брюшных плавников. На 42 сутки погибли 4 рыбы с точечными ипятнистыми кровоизлияниями на теле, воспаллённым анусом, некротическимиучастками на коже и кончиках плавников. На 43 сутки погибли 4 рыбы. У всехрыб наблюдали кровоизлияния на теле, участки с бледными пятнами, бледныеочаги на кончиках жабр.
На 44 сутки погибли 2 рыбы с пятнистымикровоизлияниями на всей поверхности тела, с изъязвлениями жучек, участкаминекроза на кончиках плавников. На 45 сутки – погибли 4 рыбы. Три рыбы были спризнаками истощения, у всех 4 рыб наблюдались точечные и пятнистыекровоизлияния, некроз тканей кончиков плавников. У 3 рыб анус был вывернут,ярко-красного цвета (рис 17).
Кончики жабр у всех рыб с признаками гиперемии.На 47 сутки – погибли 4 рыбы. У всех рыб признаки истощения, точечные ипятнистые кровоизлияния в области жучек, некроз тканей кончиков плавников.На 48 сутки погибли 3 рыбы с признаками истощения, кровоизлияний в областижучек, некроза тканей кончиков плавников. На 49 сутки погибла 1 рыба спризнаками истощения, некротическими участками на кончиках плавников,точечными и пятнистыми кровоизлияниями. У всех погибающих рыб отмечаласьадинамия, положение на боку на дне аквариума или плавание вверх брюхом.Патогистологические измененияОсновные микроструктурные изменения были обнаружены в коже, печени,почках спиральном отделе средней кишки, жабрах. В селезёнке и сердцемикроскопические изменения были сходны с таковыми в предыдущем опыте.В коже, на стадии максимального подъёма эпизоотического процессаотмечали: очаговую гиперплазию эпидермиса в виде узелков – бляшек (рис.31, г),гипертрофию и разрыв слизистых клеток (рис.31, а), слущивание клеток67эпидермиса, изъязвление и деформацию жучек, десквамацию эпителия в каналебоковой линии (рис.31, б,в).
На туловищном, хвостовом отделах и на плавникахвыявляли бляшки(узелки) от 1 до 4 мм. На дистальных концах хвостовогоплавника у многих рыб наблюдали некроз плавников (31, д).абвгдеРис. 31 – Микроструктура кожи рыб опытной группы. Гематоксилин и эозин: а –гипертрофия и разрыв слизистых клеток. Об. 10, ок.10; б – язва на жучке,слущивание эпителия в канале боковой линии.
Об. 10, ок.10; в – десквамацияэпидермиса на жучке и эпителия в канале боковой линии. Об.10, ок.10; г –гиперплазия эпидермиса. Об.40, ок.10; д – некроз эпидермиса хвостовогоплавника. Об.10, ок.10; е – некроз и десквамация эпидермиса в области рта. Об.10,ок1068Частота микроструктурных изменений кожи показана на рисунке 32.частота микроструктурных измененийкожи,%1051009590858075123456Рис. 32 – Частота микроструктурных изменений кожи: 1 – гиперплазияэпидермальных клеток; 2 – гипертрофия и разрывы оболочек слизистых клетокэпидермиса; 3 – десквамация эпидермиса; 4 –язвы; 5 – бляшки (узелки)гиперплазированного эпидермиса; 6 – некроз эпидермисаВ печени у всех больных рыб выявляли деформацию, дискомплексациюгепатоцитов (рис.33, а).
При более тяжёлом поражении печёночные клетки всостоянии вакуольной дистрофии (рис. 33, б), у многих рыб отмечали очаговыйили диффузный некроз паренхимы (рис. 34: а,б), который выражался вдиссоциации и лизисе гепатоцитов, сопровождающийся маргинацией хроматина,кариопикнозом, кариорексисом, кариолизисом, плазмопикнозом.абРис. 33 – Микроструктура печени рыб опытной группы: а – деформация,дискомплексация гепатоцитов.
Гематоксилин и эозин. Об 40, ок.10; б – резорбцияжира в гепатоцитах. Судан III. Об. 40, ок.1069абРис. 34 – Микроструктура печени рыб опытной группы. Гематоксилин и эозин: а– очаговый некроз гепатоцитов, маргинация хроматина (чёрные стрелки),кариопикноз (красные стрелки). Об. 20, ок.10; б – диффузный некроз паренхимы.Об.40, ок.10Частота микроструктурных изменений печени показана на рисунке 35.частота микроструктурных измененийпечени, %12010080604020012345Рис. 35 - Частота микроструктурных изменений печени: 1 – деформациягепатоцитов; 2 – дискомплексация гепатоцитов; 3 – вакуольная дистрофия; 4 –очаговый некроз паренхимы; 5 – диффузный некроз паренхимыВпочкахубольшинствабольныхрыботмечализначительныепатогистологические изменения: гиалиново-капельную дистрофию в эпителиипочечных канальцев, очаги кровоизлияний в паренхиме почек, серозныйгломерулонефрит, имевший проявления, морфологически сходный с описанным впредыдущем опыте.
У части рыб был выражен некроз эпителия канальцев70(некротический нефроз) и диффузный гломерулонефрит с распадом тканейклубочков (рис.36: г, д).абвгдРис. 36 – Микроструктура почек рыб опытной группы. Гематоксилин и эозин: а –гиалиново-капельная дистрофия эпителиальных клеток почечных канальцев.Об.20, ок.10; б – серозный гломерулонефрит. Об. 40, ок.10; в – кровоизлияние(чёрная стрелка). Об. 20, ок.10; г – некроз клубочков (чёрная стрелка) и канальцев(красная стрелка).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
