Диссертация (1151577), страница 9
Текст из файла (страница 9)
Спиридонова, Е.В. Мурашова (2010) одинмиллилитр препарата «Монклавит - 1» содержит 2540,6 мкг йода (16,93суточных доз). По данным Е.Г. Матвеенко (2002) и А. Е. Федоренко (2003)выведение йода из организма осуществляется в две фазы: «активная» фазадлится 24 часа, в этот период выводиться до 50% от исходной концентрациипрепарата, вторая более «медленная» фаза длится до 64 часов, когдаконцентрация йода снижается до 70%.
Стабилизация концентрации йода в45организме наступает к 72 часам, а его полное выведение завершается к десятымсуткам.Таким образом, согласно расчетам через 24 часа с момента введенияодного миллилитра препарата остаточная концентрация йода не будетпревышать 1270,3 мкг, что составит 8,46 суточных доз, тогда как к исходувторых суток (48 часов) концентрация йода будет на уровне 762,18 мкг (5,08доз).Для введения разных форм йодистых препаратов в животноводствеприменимы два основных способа: для сыпучих и таблетированных форм –скармливание в смеси с кормами, а для жидких форм традиционно выпаивание,в обоих случаях это «добровольные» групповые, реже индивидуальные методы.Несомненно,что,«добровольный»групповойметоддачипрепаратовтехнологически прост, но имеет значительный недостаток: нет возможностиконтролировать точности дозирования препарата для отдельно взятой особи.Индивидуальный«добровольный»методдачипрепаратовнесколькоэффективней, однако, нет полной уверенности в том, что конкретное животноепотребит объем смеси, содержащий необходимое количество препарата.Высоко точен так называемый «насильственный» метод дачи препаратов - peros, но он сопряжен с возможностью возникновения у животных стрессов иувеличением затрат времени персонала на обслуживание.По результатам наших исследований промежуток времени (15 суток)между результативной случкой крольчих и первой половиной беременностиявляется наиболее критическим периодом в функционировании щитовиднойжелезы.
Очевидна целесообразность коррегирования йодного баланса крольчихименно в этот период.Во избежание технологического стресса, прохолостов, скрытых абортов ипадежа в кролиководстве, с момента после результативной случки и до моментаотбивки крольчат принято какие-либо манипуляции с крольчихой непроводить.46Исходя из выше изложенного, с целью коррегирования йодного балансакрольчих необходимо однократное введение препарата в объеме не менее 2 млна голову, что покроет потребность организма в йоде на продолжительныйпромежуток времени.Дляобоснованиякорректностииспользованиявыбраннойдозыпрепарата, выявления функциональных и органических изменений в организмекрольчих,намибылпроведенопыт:сформированочетырегруппышестимесячных половозрелых крольчих аналогов, по три головы в каждой (n =12). Крольчихам контрольной группы препарат не вводился. Крольчихам I - IIIгрупп внутрь был введен «Монклавит - 1» в дозе 2,0 мл.
Перед контрольнымубоем оценивали их клиническое состояние, проводили забор крови длягемато-биохимических исследований и определения концентраций тиреоидныхи тиреотропного гормонов. Далее животных подвергли контрольному убоюсогласно схеме: контрольная группа – 24,48,72 ч; I группа – 24 ч; II группа – 48ч; III группа – 72 ч с момента введения препарата. После убоя был отобранматериал для гистологического исследования: щитовидная железа, печень ипочка.Результатыисследованияпозволялиутверждать,чтопрепарат«Монклавит – 1» при даче внутрь в дозе 2 мл к моменту завершениябиотрансформации (72 ч) оказал позитивное воздействие на тиреоидный статускрольчих, что выражалось в статистически достоверном (p ≤ 0,001) увеличенииконцентрации общего тироксина во всех опытных группах.
Комплексноеклинико-морфологическое исследование не выявило негативных эффектов отэнтерального применения «Монклавит – 1», что характеризует избраннуюдозировку (2 мл/гол) как безопасную.Экстраполируясовокупностьданныхлитературыопотребностиорганизма крольчихи, способах дачи, свойствах и фармакокинетике йода,относительнотехнологическихзвеньевкролиководстваирезультатыпроведенного опыта нами была выбрана следующая дозировка препарата«Монклавит – 1» и стратегия ее применения. Ремонтным крольчихам за три днядо предполагаемой случной компании с помощью шприца внутрь (per os)47задается 2 мл «Монклавит – 1» в разведении 1:1 с 5% раствором глюкозы.Заданный препарат полностью обеспечит потребность организма крольчихи вйоде на время критического периода «эструс → 15 суток беременности».Эксперимент состоял из двух частей.
Вначале было изучено влияниеселенсодержащих препаратов на клинический статус, продуктивность игистофизиологию щитовидной железы крольчих в репродуктивном цикле, а также были выявлены критические периоды ее функциональной активности. Далеебыла разработана, обоснована и внедрена схема комбинированного примененияпрепаратов селена и йода.На первом этапе изучали влияние препаратов селена на динамикуфункциональной реактивности щитовидной железы и гистоархитектонику еетканей у крольчих в период физиологической зрелости (6 месяцев, эструс). Дляэтого были сформированы три группы шестимесячных крольчих – аналогов, потри головы в каждой (n = 9).
Контролем служила I группа, крольчихам II и IIIгрупп за десять дней до планируемой случки вводили препарат «Е-селен» и«Селенолин®» в рекомендуемых дозах.На втором этапе изучали влияние селенсодержащих препаратов наморфофизиологию и адаптационную пластичность щитовидной железы впериод первой половины беременности и родов. Для этого сформировали 3группы животных – аналогов в возрасте шести месяцев, живой массой не менее3,5 кг с уровнем упитанности выше среднего, по 3 головы в каждой (n = 9).Животные I группы служили контролем, крольчихам II и III группы вводилипрепараты «Е-селен» и «Селенолин®», после чего через 9-10 дней в раннееутреннее время проводили покрытие крольчих в соответствии с графикомэксперимента.Готовность самок к коитусу определяли по поведенческим аспектам(повышенная активность, беспокойство, положительная реакция на самца) иклиническому состоянию наружных половых органов (гиперемия и отекслизистойоболочкипреддвериявлагалища).Приэтомучитывалисьособенности половой цикличности крольчих, в среднем продолжительность48половогоцикладлитсясемьсуток.Половаяцикличностьнаиболеедетерминирована в теплое время года с мая по август, но при выраженномтермическомстрессе(температурасвыше25°C)еѐпризнакимогутсглаживаться.Рис.
№ 3. Цитологическая картина диэструса крольчих. Окрашено поРомановскому – Гимзе. Об.40.Ок.15 (А); Об.90.Ок.15 (Б).Для верификации оптимальности выбранного для случки крольчих срока,проводили эксфолиативную цитологию влагалища. С помощью стерильноговатного тампона производили забор клеточного материала верхних слоевэпителия влагалища. Далее изготавливали мазок путем прокатывания тампонапо поверхности обезжиренного предметного стекла, затем фиксировали 95%этанолом, последующее окрашивание осуществляли по Романовскому – Гимзе.Фаза диэструса (метэструс) у крольчих характеризовалась присутствиеммножества сегментоядерных нейтрофилов с признаками фагоцитоза (Рис. № 3,А), а так же незначительного количества полиморфных клеток округлоовальной формы росткового слоя эпителиальной выстилки эндометрия (Рис.
№3, Б). Оплодотворение в этот период полового цикла невозможно.Эструс характеризуется увеличением диаметров клеток и усилениемкератинизации, в процессе прогрессирования которой, ядро подвергаетсяпоследовательной деградации: кариопикноз → кариорексис→ кариолизис(Рис. № 4, В – Е). В раннем проэструсе в мазках обнаруживаются пласты клетокбазального слоя, с характерной морфологией: округло-овальная форма, ядрогиперхромное, занимает большую часть объема клетки (Рис.
№ 3, А).49Рис. № 4. Дифферон эпителиоцитов эндометрия крольчихи. Окрашено поРомановскому – Гимзе. Об.40.Ок.15 (А); Об.90.Ок.15 (Б – Е).К концу проэструса клетки приобретает угловатую форму, нарастаетобъем цитоплазмы, где обнаруживаются первые признаки ороговения (мелкаязернистость), ядра достаточно большого размера, визуализируются ядрышки(Рис. № 3, Б). Оплодотворение в этот период маловероятно.Начало собственно эструса характеризуется увеличением диаметровклеток и усилением кератинизации, по мере прогрессирования, которой ядроподвергается последовательной деградации: кариопикноз → кариорексис →кариолизис (Рис. № 4,В – Е).
Момент, когда безъядерные плоскиеороговевшие клетки (Рис. № 4, Е) составляют 95 – 100% от всего клеточногоматериала мазка оптимален для проведения случки.Через 7 – 10 суток с момента коитуса, во избежание прохолостовпроводили контрольную случку, в случае ярко выраженной негативной реакциинасамца(агрессия)крольчихаусловносчиталасьбеременной.Дляподтверждения наличия беременности также проводились дополнительныеклинические исследования: на 12 – 15 сутки после случки крольчих осторожнопальпировали по ходу рогов матки, при наличии эмбрионов самку считалисукрольной. Однако при таком способе диагностики есть вероятностьтравмировать крольчиху или ошибочно принять каловые массы в кишечнике заэмбрионы.Дляопределениябеременноститакжеприбегаликвысокоинформативному методу УЗИ.
За 12 часов до запланированного исследования50животных выдерживали на голодной диете со свободным доступом к воде.Крольчих фиксировали в спинном положении на специальном столике (Рис. №5).Рис. № 5. Фиксация крольчихи и подготовка поля длясонографического исследования на предмет беременности.Для улучшения визуализации органов брюшной и тазовой полостиосуществлялась депиляция шерстного покрова брюшной стенки, от верхнейграницыэпигастриядолонногосращения.Непосредственнопередобследованием на кожу тонким слоем наносился контактный гель для УЗИ.Сонографическое исследование проводили на ветеринарной модификацииультразвуковогосканера«РАСКАН»ЭТС-Д-05(Россия)секторнымидатчиками в частотном диапазоне 3,5 – 7,5 МГц.Акустическим окном при УЗИ традиционно служил мочевой пузырь, дляобнаружения которого датчик располагали в каудальной части брюшнойполости, далее меняя углы его наклона, визуализировали анэхогеннуюэллипсоидно-округлую структуру с тонкой эхогенной стенкой.Так как большую часть брюшной полости кролика занимали петликишечника, возникала необходимость дифференцировки структур матки отеѐокружения.визуализировалсяТонкийотделкаккруглаякишечникаиливовальнаяпоперечномсеченииструктуравнешне51напоминавшая «кофейное зерно».
Толстый отдел визуализировался хуже,так как он был заполнен значительными объемами каловых масс и газом,что давало множество артефактов. Топография беременной матки кроликабыла вариативна, еѐ положение во многом определялось перистальтикой истепенью наполнения кишечника.Рис. № 6. Эхограмма плодов А – 14 - 15 сутки; Б – 24 - 25 сутки беременностикрольчихи.Экспериментальная часть включала в себя комплексное исследование,которое проводили согласно схеме опыта, представленной на Рис.