Диссертация (1151487), страница 19
Текст из файла (страница 19)
У павших мышей в группах ЭДx10, ЭДx20, ЭДx40до смерти отмечали меньшую двигательную активность и большуюпотребность в потреблении воды. Внешний вид мышей не отличался отконтроля. Среди выживших мышей не отмечали случаи сколько-нибудьзначимых признаков интоксикации и отличия от контроля.При аутопсии различий между контрольной и опытными группами дляЦигалина и Фероцита (всех выживших животных) выявлено не было.Расположение внутренних органов соответствует норме. Просвет трахеи ибронхов свободен, слизистая их чистая, влажная, блестящая. Сердцеправильной формы, не увеличено, миокард упругой консистенции, влажный,блестящий, рисунок волокон выражен хорошо.
Большие сосуды, лежащие вобласти перикарда, хорошо выражены. В полости сердечной сумкинаходится несколько капель прозрачной соломенно-желтого цвета жидкости.Легкие умеренно спавшиеся, имеют гладкую мягкую поверхность. Селезенкане увеличена, вытянутой формы, поверхность гладкая, консистенцияплотная, на разрезе: пульпа не соскабливается, фолликулы и трабекулыимеют вид серых точек и полосок. Печень правильной формы, не увеличена,плотной консистенции, гладкая и блестящая. Почки правильной бобовиднойформы, фиброзная капсула легко отделяется.
На разрезе хорошо виднаграница коркового и мозгового слоев. Желудок и кишечник без вздутия, безспаек.Тимусбезсимметричнымикровенаполнения,кровоизлияний.долями.Оболочкивлажные,Щитовиднаяголовногоблестящие.Мозговоежелезаплотнаямозгаумеренноговеществосимеетсимметричный рисунок на разрезе. У павших животных после внутривенноговведения высоких доз Фероцита отмечали незначительное потемнениепечени в сравнении с контролем.1175.2.
Исследование хронической токсичностиОбщее состояние животных на протяжении всего эксперимента было внорме, отклонений не обнаружено, павшие животные отсутствовали. Порезультатам контрольных взвешиваний, во всех группах животных отмеченаположительная динамика. Результаты по общему клиническому анализукрови (ОКА) представлены в таблице 14.Таблица 14. Сравнение полученных результатов ОКА крови исследуемыхВременные точки, суткиЭДЭДx10ЭД ЭДx10ЭД ЭДx10ЭДЭДx10ЭДДозаЭДx10Контроль5,9±0,735,4±2,5119,9±12,214,4±2,8140,2±10,3HGB, г/лWBC, 109/лPLT, 109/лHCT, %RBC, 1012/лГем.показателькрыс (Ц – Цигалин, Ф – Фероцит)05101521ЦФ6,5±0,97,1±0,77,1±0,56,1±1,47,2±0,18,7±1,78,2±0,97,9±2,17,0±0,88,4±0,6Ц6,9±1,07,8±0,3*33,6±4,028,9±4,335,9±4,07,2±0,98,6±0,2*/**36,3±1,626,7±6,337,4±2,6ЦФЦ6,5±0,87,2±0,87,6±1,09,3±0,49,3±0,38,1±1,7*/***/**37,5±2,041,3±4,935,5±2,938,7±7,334,9±3,134,4±0,435,0±0,837,2±2,037,3±1,241,5±1,441,0±1,737,4±1,737,4±1,041,0±0,7*/***/**119,3±14,0 110,0±18,5 138,3±3,6 141,0±3,6 143,0±10,6125,1±7,3 133,7±11,6 110,3±18,2 115,3±16,2 128,3±5,8124,3±6,8 142,0±14,8 130,3±6,1 129,3±2,1 132,7±5,149,3±5,6 86,0±12,0107,5±7,7108,3±5,6 118,3±12,9*/***/**15,7±0,913,6±5,114,8±2,418,3±1,116,9±2,014,7±4,013,9±2,610,9±1,716,4±6,813,9±4,914,8±3,510,9±2,612,4±1,112,3±2,113,7±0,428,8±3,718,7±2,512,2±2,215,0±1,710,8±2,2*/**136,7±8,5 142,3±1,5 138,0±7,2 153,7±17,4 142,3±8,1137,7±3,9 112,3±23,1 157,3±22,2 135,3±35,6 163,0±12,0134,0±15,1 140,7±8,6 131,3±2,5 137,7±5,0 155,0±11,0Ф144,7±1,5146,0±3,3 162,3±15,6 159,0±16,7 159,3±11,1ФЦФЦФЦФЦФЦФЦФ* различие в сравнении с контролем значимо по t-критерию Стьюдента (p<0,05)** различие в сравнении с группой ЭД значимо по t-критерию Стьюдента (p<0,05)118Следует отметить отсутствие статистически достоверной разницы пополовому признаку между значениями показателей крови.
Более того,введение крысам раствора Цигалина в десятикратной дозе не приводило кзначимым(достоверным)изменениямпоказателейкрови.Напротив,введение Фероцита в 10-кратной дозе привело на 5 сутки к резкомуповышению лейкоцитов (рис. 39) и понижению тромбоцитов (рис. 40),однако скачки имели функционально-обратимый характер – к 10-15 суткаммежду значениями для разных групп лиофилизатов и контролем не былостатистически достоверной разницы.Лейкоциты, 109/лЦигалин, ЭДх10Фероцит, ЭДх1027189051015Время, сутки20Рисунок 39. Динамика изменения значений концентрации лейкоцитов в цельной кровикрыс после введения десятикратных доз Цигалина и ФероцитаТромбоциты, 109/лЦигалин, ЭДх10Фероцит, ЭДх101301007040051015Время, сутки20Рисунок 40.
Динамика изменения значений концентрации тромбоцитов в цельной кровикрыс после введения десятикратных доз Цигалина и Фероцита119Повышениеуровнялейкоцитовсвязано,скореевсего,сдополнительной попыткой утилизации излишнего количества железапосредством его связывания с лактоферрином в лейкоцитах и последующейдоставкой в депо – печень.
В свою очередь, тромбоцитопения в течениепервых 10 суток связана, скорее всего, с признаками токсического гепатита.Результаты биохимического анализа плазмы крови позволили сделатьвывод о высокой степени безопасности применения лиофилизата Цигалин. Висследуемых дозах раствор лиофилизата не приводил к статистическизначимымизменениямконтрольнымипоказателейживотными.Следуетплазмытакжекровиуказатьвсравнениинасотсутствиестатистически достоверной разницы между концентрациями различныхбиохимических показателей крови у самцов и самок (табл.
15).Напротив, резкое повышение концентрации железа в крови (рис. 41)после введения Фероцита в десятикратной дозе запускало механизмыутилизации лишнего количества железа из крови посредством соединенияжелеза с транспортными белками и их аккумуляции в печени, что явилосьпричиной резкого снижения уровня общего белка в крови (рис.
42).Излишнеенакоплениежелезавпеченипривелокувеличеннойметаболической активности гепатоцитов, смещению равновесия междуконцентрациями трансаминаз (рис. 43, 44) и резкому повышению уровня ЩФ(рис. 45) и ЛДГ (рис. 46).120Таблица 15. Сравнение полученных результатов БХА плазмы кровиисследуемых крыс (Ц – Цигалин, Ф – Фероцит)ДозаЭДБ/хКонтрольпоказательЭД1072,8±4,3ЭДОбщийбелок, г/л77,1±7,8ЭДЭД10АЛТ, Е/л95,2±28,1ЭДЭД10АСТ, Е/л83,1±19,7ЭДЭД10ЩФ, Е/л47,5±15,5ЭДЭД10Железо,мкмоль/л54,5±6,7ЭД10ЛДГ, Е/лЦВременные точки, сутки10150574,3±2,880,9±6,12182,6±5,279,9±4,679,9±6,5Ф 24,9±5,1 */** 61,4±3,7 */**80,0±13,062,1±3,968,4±5,7Ц80,7±9,581,3±1,977,7±3,279,2±10,350,8±3,6*/**84,7±9,365,5±2,862,3±2,683,0±5,329,7±10,0*/**32,5±1,6*/**70,7±4,725,8±6,0*/**119,0±15,770,3±25,4125,7±21,6100,4±17,680,0±19,5104,7±9,576,3±8,390,7±5,595,7±8,081,7±7,227,9±6,1*/**67,7±7,0106,7±2,0*/**25,9±3,2*/**76,3±19,8118,5±5,9*/**78,1±9,996,6±70,2109,0±10,881,2±23,9142,8±95,2*/**96,7±12,5147,8±26,7*/**73,3±29,8Ц94,7±9,385,3±36,9104,7±25,790,7,7±11,9109,0±17,6Ф84,7±16,689,1±11,9Ц54,7±8,7138,1±6,5*/**69,0±10,2143,3±33,8*/**240,8±7,3*/**79,3±11,1150,0±9,3*/**186,7±16,1*/**113,0±4,0142,3±17,8*/**Ц72,0±12,555,7±16,583,5±7,8111,7±14,974,3±18,5Ф383,0±12,7*/**340,3±50,9*/**460,7±64,2*/**256,0±98,0*/**135,3±14,0*/**Ц37,5±8,246,0±31,034,3±10,246,0±9,151,1±7,6Ф68,9±14,6*/**76,6±12,8 */**72,7±7,2*/**60,4±24,556,9±15,1Ц42,7±4,147,6±2,952,1±5,657,2±17,349,5±1,3Ф131,4±20,7*/**109,2±30,9*/**86,4±10,26*/**82,1±5,5 */**52,9±8,9Ц58,8±13,771,5±16,171,4±3,667,1±19,181,0±11,6174,9±17,5*/**70,0±4,6149,5±32,7*/**92,9±22,4158,6±29,8*/**70,3±1,5152,9±22,5*/**49,3±7,3125,9±17,6*/**53,5±5,7276,0±53,2*/**334,2±8,9*/**320,1±10,7*/**331,4±34,5*/**169,6±29,9*/**74,0±3,7Ф 28,8±7,7 */**ЦФЦФЦФФФЦФ64,9±71,9141,4±17,193,7±24,1110,3±3,1* различие в сравнении с контролем значимо по t-критерию Стьюдента (p<0,05)** различие в сравнении с группой ЭД значимо по t-критерию Стьюдента (p<0,05)121Железо, мкмоль/лЦигалин, ЭДФероцит, ЭДЦигалин, ЭДх10Фероцит, ЭДх1012090603000510Время, сутки1521Рисунок 41.
Динамика изменения значений железа в плазме крови крыс после введенияразличных доз Цигалина и ФероцитаОбщий белок, г/лЦигалин, ЭДФероцит, ЭДЦигалин, ЭДх10Фероцит, ЭДх108060402000510Время, сутки1521Рисунок 42. Динамика изменения значений общего белка в плазме крови крыс послевведения различных доз Цигалина и Фероцита122Цигалин, ЭДФероцит, ЭДЦигалин, ЭДх10Фероцит, ЭДх10АЛТ, Е/л12090603000510Время, сутки1521Рисунок 43. Динамика изменения значений АЛТ в плазме крови крыс после введенияразличных доз Цигалина и ФероцитаЦигалин, ЭДФероцит, ЭДЦигалин, ЭДх10Фероцит, ЭДх10АСТ, Е/л2502001501005000510Время, сутки1521Рисунок 44.
Динамика изменения значений АСТ в плазме крови крыс после введенияразличных доз Цигалина и Фероцита123Цигалин, ЭДФероцит, ЭДЦигалин, ЭДх10Фероцит, ЭДх10ЩФ, Е/л40030020010000510Время, сутки1521Рисунок 45. Динамика изменения значений ЩФ в плазме крови крыс после введенияразличных доз Цигалина и ФероцитаЦигалин, ЭДФероцит, ЭДЦигалин, ЭДх10Фероцит, ЭДх10400ЛДГ, Е/л30020010000510Время, сутки1521Рисунок 46. Динамика изменения значений ЛДГ в плазме крови крыс после введенияразличных доз Цигалина и ФероцитаПри вскрытии у крыс во всех группах кожа была чистая, подкожножировой слой развит умеренно.
Внутренние органы не увеличены,расположение правильное; гидроторакс отсутствует; слизистая трахеи ибронхов чистая, влажная, блестящая, просвет свободен.Таким образом, введение Фероцита крысам в десятикратной дозе124приводилоксимптомамтоксическогогепатита,однаконосящегофункционально-обратимый характер – к 15-20 суткам после введения нефиксировали статистически достоверной разницы между значениями вэкспериментальных и контрольной группах.5.3.
Аллергизирующие свойстваАллергезирующее действие растворов лиофилизатов было оценено дляэквивалентных доз. После введения тест-препарата отмечено покраснение налапке, скорее всего, являющееся следствием укола. Разницы в толщине обеихлапок не выявлено, отечности не было.ВыводыВ экспериментах были получены и проанализированы данные одействии растворов лиофилизатов для приготовления РФП и РФК наорганизм грызунов (крысы, мыши) с точки зрения токсичности. В ходеэксперимента установили хорошую переносимость, полное отсутствиевыраженных симптомов, аллергизирующего действия.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
