Диссертация (1150369), страница 6
Текст из файла (страница 6)
Исходные растворыдля анализа готовили по объему. Для приготовления образцов использовалистандартные пипетки на 1, 2 и 10 мл, шприц на 2 мл, микрошприц объемом 50 мкл(VEB Werk für Technisches Glas Ilmenau, ГДР). Для дозирования образцовиспользовали микрошприц Hamilton объемом 10 мкл и микрошприц объемом 1мкл.Одной из главных задач всех экспериментов по выявлению аномалийзависимости RI(T) и критериев перегрузки хроматографической колонки являлосьприготовление таких образцов, с помощью которых удалось бы перекрытьопределенные диапазоны концентраций целевых компонентов.
Ниже приведеныоднотипные таблицы (3.3-3.7, 3.13), в которых представлены результатыприготовления различных образцов для решения конкретных задач, указанных взаголовках соответствующих подразделов и в названиях соответствующих35таблиц. Помимо этого, в таблицах (3.3-3.15) приведены данные по концентрациямцелевых компонентов в приготовленных образцах, пересчитанных в массообъемные единицы (мкг/мкл) (с учетом относительных плотностей компонентовпри комнатной температуре, см. таблицу 3.1), а также соответствующие этимконцентрациям количества аналитов в хроматографической зоне (мкг) с учетомдозируемого объема и деления потока газа-носителя при дозировании.Дозируемое количество характеризуемого компонента (m, г) в пробекаждого образца вычисляли по следующему соотношению:m=V1 d 1 1000v пробы(VS V1 Vi ) (R 1)n(3.1)i 1где V1 – объем характеризуемого аналита, мкг; d1 – относительная плотностьхарактеризуемого аналита (по данным таблиц 3.1 и 3.2); VS – объем растворителя,мкл;nVi 1i- суммарный объем других компонентов, присутствующих в образце(реперных н-алканов и других характеризуемые компонентов, присутствующие вобразце, в случае их одновременного определения), мкл; vпробы – объемдозируемой в хроматограф пробы, мкл; R – деление потока при дозировании проб;1/(R+1) – часть пробы, попадающая в колонку после деления потока газаносителя.В зависимости от используемой колонки и задач эксперимента дозируемыйобъем варьировал от 0.5 до 3 мкл, а сброс составлял (6.3 - 6.4): 1, 10:1, а также25:1.
Под каждой таблицей в примечании указан дозируемый объем и делениепотока, которое использовали при проведении экспериментов. Жирным шрифтомв таблицах набрана целевая информация: концентрация целевого компонента врастворе (мкг/мкл) и/или его количество в хроматографической зоне (мкг), всеостальные данные в таблицах являются вспомогательной информацией.363.2.1 Приготовление образцов для выявления аномалий зависимостигазохроматографических индексов удерживания от температурыЗадачей этой серии экспериментов было расширение перечня аналитов, длякоторых уже были выявлены примеры аномальной зависимости RI(T), преждевсего за счет включения в него соединений, сравнимых по полярности с ранееохарактеризованными аналитами.
Кроме того, необходимо было проверитьособенности проявления аномального эффекта в зависимости от дозируемыхколичествполярныхприготовлениеаналитов,различныхатакжеобразцовцелесообразнымхарактеризуемыхпредставлялосьаналитоввтакихконцентрациях, которые перекрывали бы диапазон концентраций серий образцовДМФА (как впервые выявленного нами примера аномальной зависимости RI(T)).Для выявления аномалий зависимости RI(T) характеризуемые соединения(от 10 до 250 мкл) и реперные н-алканы (50-100 мкл) растворяли в 0.5-5 мл изопропилового спирта. В таблице 3.3 приведены объемы характеризуемых соединений, реперных н-алканов и изопропилового спирта, которые смешивали дляприготовления образцов разных серий.Таблица 3.3 Количества компонентов, использованных для приготовления ихрастворов в изопропиловом спирте для выявления аномалийзависимости RI(T)Характеризуемые Объем,ОбъемОбъемсоединенияизо-PrOH,реперныхмлалканов, мклмклКоличестван- веществхроматографических зонах, мкг*ДМФА10, 50,2500.5 – 5.0С6 (50)С7 (50)С8 (100)0.6; 0.9; 4.3; 16.9в37Продолжение таблицы 3.3ДМСО100.550С6 (50)1.0С7 (50)5.0С9 (100)1-Бутанол,1000.5С6 (50)6.1 и 6.1;1-Пентанол100+1.8**С7 (50)2.0 и 2.0;+5.4***С8 (100)0.7 и 0.7;0.2 и 0.2+(1:3)****Толуол500,5С6 (50)3.9С7 (50)С8 (100)HO(CH2CH2O)2H500.5С6 (50)4.7С7 (50)С9 (100)CH3CON(CH3)2С6 (50)0.850С7 (50)4.0150С8 (50)10.6100.5С9 (100)CH3COOH500.5С6 (50)5.1С7 (50)С8 (100)1-Нитропропан500.5200+0.5*****С6 (50)4.5С8 (50)15.0С9 (100)9.6*) при объеме пробы 0.5 мкл и делении потока 6.4:1; **) добавление 1.8 млизопропилового спирта к образцу из первой серии эквивалентно разбавлению втри раза; ***) добавление еще 5.4 мл изопропилового спирта эквивалентноразбавлению образца из второй серии в три раза; ****) смешение одной частиобразца из третьей серии и трех частей изопропилового спирта (по объему)эквивалентно разбавлению смеси в три раза.
*****) добавление 0.5 млизопропилового спирта к 0.9 мл смеси.383.2.2 Приготовление образцов для проверки возможности газохроматографического разделения энантиомеров на колонке с ахиральной фазойДляпроверкивозможностигазохроматографическогоразделенияэнантиомеров на колонке с ахиральной фазой необходимо было приготовитьобразцы (I)-(IV), содержащие (+)-α-пинен и (-)-α-пинен в соотношении 1:1, 1:3 и3:1, соответственно.
Для моделирования оптически неактивной рацемическойстепени был приготовлен образец (I), содержащий (+)-α-пинен и (-)-α-пинен всоотношении 1:1, а для характеристики возможной динамической модификациинеподвижной фазы определяемым сорбатом готовили образцы (II)-(IV), в которыходин из энантиомеров находился в избытке по сравнению с другим.Для проверки энантиомерной чистоты промышленных образцов (+)-αпинена и (-)-α-пинена были приготовлены два раствора (V и VI), содержащие (+)α-пинен и (-)-α-пинен.
В таблице 3.4 приведены объемы характеризуемых соединений, реперных н-алканов и изопропилового спирта, которые смешивали дляприготовления образцов (I)-(VI).Для проверки энантиомерной чистоты промышленных образцов по 0.5 мкл(+)-α-пинена, (-)-α-пинена, (S)-(+)-2-бутанола и (R)-(-)-2-бутанола дозировали (поотдельности) в газовый хроматограф без разбавления изопропиловым спиртом.39Таблица 3.4 Количества компонентов, использованных для приготовленияобразцов (I)-(VI) для проверки возможности газохроматографического разделения энантиомеров на колонке с ахиральной фазойОбразец Характеризуемое Объем, ОбъемсоединениемклОбъемКоличествоизо-реперных веществавPrOH,н-хроматографичес-мклалканов,кой зоне, мкг*мкл(+)-α-пинен1(I)(-)-α-пинен1(+)-α-пинен20(II)(S)-(+)-2-Бутанол50***0.1**5.530(-)-α-пинен1006016.654(III)4.1600(R)-(-)-2Бутанол18(S)-(+)-2-Бутанол240(IV)(V)0.1**10001.417.0400(R)-(-)-2Бутанол80(+)-α-пинен2050****50****5.790100***5.5(VI)(-)-α-пинен5030100***16.1*) при объеме пробы 0.5 мкл и делении потока 6.4:1; **) при объеме пробы 1 мкли делении потока 6.4:1; ***) в качестве реперных н-алканов использовали смесь налканов С6 – С10; ****) в качестве реперного н-алкана использовали толькогептан.403.2.3 Приготовление образцов для проверки возможности хромато-массспектрометрического анализа энантиомеров на колонке с ахиральной фазойАналогичным способом и для решения тех же задач, которые описаны вразделе 3.2.2, были приготовлены образцы (VII)-(XIV) для проверки возможностихромато-масс-спектрального разделения энантиомеров.С целью проверки энантиомерной чистоты промышленных образцов (+)-αпинена и (-)-α-пинена были дополнительно приготовлены образцы (XV) и (XVI).В таблице 3.5 приведены объемы характеризуемых соединений, реперных налканов и изопропилового спирта, которые смешивали для приготовленияобразцов (VII)-(XVI), а также способы их дальнейшего разбавления.Таблица 3.5 Количества компонентов, использованных для приготовленияобразцов (VII)-(XVI) для проверки возможности хроматомассспектрометрическогоанализаэнантиомеровнаколонкеахиральной фазойОбразец Характеризуемое Объем, ОбъемсоединениемклОбъемКонцентрацияреперных изо-характеризуемогон-алка-вещества, мг/млPrOH,нов, мкл* мкл(VII)(VIII)(IX)(+)-α-пинен20(-)-α-пинен60(+)-α-пинениз 1 мкл образца(-)-α-пинен(VII)(+)-α-пинен2.8(-)-α-пинен8.4100-5301001000024.272.40.240.720.240.72с41Продолжение таблицы 3.5(+)-α-пинен(X)из 1 мл образца(IX)1000(-)-α-пинен0.36(+)-α-пинен0.9(-)-α-пинен0.3(+)-α-пинен9(-)-α-пинен3(+)-α-пинениз 1 мл образца(-)-α-пинен(XII)(+)-α-пинен1(-)-α-пинен1(XV)(+)-α-пинен(XVI)(-)-α-пинен(XI)(XII)(XIII)(XIV)0.12-1000-1000010000.770.260.770.260.390.130.825010000.9210010000.720.9210010000.720.82*) смесь реперных н-алканов С6 – С10.3.2.4 Приготовление образцов для проверки возможности газохроматографического разделения энантиомеров на колонке с хиральной фазойДляпроверкивозможностигазохроматографическогоразделенияэнантиомеров на колонке с хиральной фазой был приготовлен образец (XVII),содержащий (S)-(+)-2-бутанол и (R)-(-)-2-бутанол в соотношении 3:1.В таблице 3.6 приведены объемы характеризуемых соединений и изопропиловогоспирта, которые смешивали для приготовления образцов (XVII)-(XIX).Для определения энантиомерной чистоты промышленных образцов (+)-αпинена и (-)-α-пинена были приготовлены образцы (XVIII) и (XIX).
Также дляпроверки энантиомерной чистоты промышленного образца (+)-α-пинена 0.5 мклего дозировали в газовый хроматограф без разбавления изопропиловым спиртом.42Таблица 3.6 Количества компонентов, использованных для приготовленияобразцов (XVII)-(XIX) для газохроматографического анализа наколонке с хиральной неподвижной фазойОбразецХарактеризуемое Объем, Объем изо- Количество веществасоединениемклPrOH, мклв хроматографическойзоне, мкг(XVII)(S)-(+)-2-Бутанол 30(R)-(-)-2-Бутанол 105000.9*/1.8**0.3*/0.6**(XVIII)(+)-α-пинен100.3*/0.6**(XIX)(-)-α-пинен100.3*/0.6***) при объеме пробы 0.5 мкл и делении потока 25:1; **) при объеме пробы 1 мкл иделении потока 25:1.3.2.5 Приготовление двухкомпонентной тест-смеси для контроля инертностигазохроматографической системыДвухкомпонентную тест-смесь (1-бутанол/толуол) (XX) для контроляинертности газохроматографической системы готовили путем смешения 0.5 мл 1бутанола и 0.5 мл толуола с реперными н-алканами (0.5 мл гептана и 0.5 млоктана).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
