Диссертация (1150369), страница 8
Текст из файла (страница 8)
Данные по концентрациям толуола, 1бутанола иN,N-диметилформамида в зависимости от степени разбавления и50соответствующие им количества в хроматографических зонах приведены втаблице 3.12.Таблица 3.12 Концентрации толуола и 1-бутанола в образцах, проанализированных со стекловатой и без стекловаты в лайнере испарителя(мкг/мкл), концентрации ДМФА в образцах, а также количествацелевых аналитов в хроматографических зонах (мкг) в зависимостиОбразец (XXVI)*исходного образцаСтепеньразбавленияот степени разбавленияОбразец (XXXI)C(BuOH) m(BuOH)C(толуола) m(толуола) C(ДМФА) m(ДМФА)ввв образце, в дозируе- в образце, в дозируе-образце,дозируе-мкг/мклмкг/мклмойпробе**,пробе**,пробе**,мкгмкгмоймкг/мклмоймкг-57.94.061.94.27351:231.22.133.42.338.02.61:421.31.522.81.625.71.81:816.21.117.31.219.41.31:1613.10.914.01.015.61.11:32----130.9Примечание к таблице 3.12 *) при анализе образца (XXVI) со стекловатой и безстекловаты в лайнере испарителя дозировали одни и те же количества; **) придозируемом объеме 0.5 мкл и делении потока 6.3:1.Пять точек таблицы 3.12 перекрывают интервал концентраций от 13.1 до57.9 мкг/мкл для 1-бутанола и от 14.0 до 61.9 мкг/мкл для толуола.
Шесть точекэтой же таблицы перекрывают интервал концентраций от 13 до 73 мкг/мкл дляN,N-диметилформамида. Соответственно, интервалы перекрытия дозируемыхколичеств 1-бутанола, толуола и N,N-диметилформамида по данным таблицы 3.12составляют [0.9 - 4], [1 - 4.2] и [0.9 - 5] мкг, соответственно.51Следующие эксперименты предполагали значительное смещение интервалаколичеств дозируемых веществ сторону их минимальных значений длядостижения области следовых концентрацийпри интерпретации одного извозможных критериев перегрузки колонки – зависимости RI(m) в этой области. Всвязи с этим образец (XXVI) был разбавлен образцом (XXXII) в 10, 100, 103, 104 и105 раз с получением образцов (XXXIII), (XXXIV), (XXXV), (XXXVI), (XXXVII),соответственно.
В таблице 3.13 приведены объемы характеризуемых соединений,изопропилового спирта и реперных н-алканов (C6, C7, С8), которые смешивали дляприготовления как исходного образца (XXVI), так и образца (XXXII), с помощьюкоторого проводили разбавление, а также способы дальнейшего разбавлениясмесей.Шесть точек таблицы 3.13 перекрывают интервал концентраций от 0.0002до 57.9 мкг/мкл для 1-бутанола и от 0.0002 до 61.9 мкг/мкл для толуола.Соответственно, интервал перекрытия дозируемых количеств 1-бутанола итолуола по данным таблицы 3.13 составляет [0.000014 - 4.0] и [0.000014 - 4.2] мкг,соответственно.Так как область ожидаемой перегрузки хроматографической колонки былавыявленапослецелесообразнымэкспериментоврассмотретьпоболеегрубойдетальноееэтуоценке,областьпредставлялосьспомощьюдополнительных серий экспериментов. Исходный раствор (XXVIII) готовилипутем смешения 0.5 мл изопропилового спирта, 50 мкл толуола, 50 мкл 1бутанола и реперных н-алканов С6 – С8 в количествах 50, 50 и 100 мкл,соответственно.
Далее к образцу (XXVIII) последовательно (10 раз) добавляли по20 мкл характеризуемых компонентов.52Таблица 3.13 Количества компонентов, использованных для приготовленияобразцов (XXVI), (XXXII)-(XXXVII) для газохроматографическогоанализаОбразецАналитОбъем ОбъемОбъем Концентра-/Степень,репер-разбав-мклных н- PrOH,ленияалка-изо-Количест-ция аналита, во аналитамкг/мклмклвхро-матографи-нов,ческой зо-мкл*не (мкг)**1-бутанол10050, 50,толуол1001001-бутанол-500,500толуол-,1000(XXXIII)1-бутанолИз 1 мл (XXVII) + 1 мл 4.450.301:10толуол(XXXIII)4.760.33(XXXIV)1-бутанолИз 1 мл (XXXIV) + 1 мл 0.340.021:100толуол(XXXIII)0.03(XXXV)1-бутанолИз 1 мл (XXXV) + 1 мл 0.0260.0021:1000толуол(XXXIII)0.002(XXXVI)1-бутанолИз 1 мл (XXXVI) + 1 мл 0.0020.000141:10000толуол(XXXIII)0.00014(XXVI)(XXXII)(XXXVII) 1-бутанол1:100000толуол10001000057.94.061.94.2----0.370.0280.002Из 1 мл (XXXVII) + 1 0.00020.000014мл (XXXIII)0.0000140.0002Примечание к таблице 3.13 *) указаны количества реперных н-алканов (C6, C7,С8); **) при дозируемом объеме 0.5 мкл и делении потока 6.3:1.В таблице 3.14 приведены данные по концентрациями количествамтолуола и 1-бутанола в хроматографических зонах образцов в зависимости отколичеств добавок характеризуемых соединений к исходному раствору.53Таблица 3.14 Концентрации толуола и 1-бутанола в образце (XXVIII) (мкг/мкл)и их количества в дозируемой пробе (мкг) в зависимости отномера добавкиНомерC(толуола) в m(толуола)добавкиобразце,дозируемойла) в образ- дозируемоймкг/мклпробе*, мкгце, мкг/мклпробе*, мкг54.27.3/3.7**50.66.8/3.4**0в C(1-бутано- m(1-бутанола) в14.6***/21.9****13.6***/20.4****172.29.867.59.1288.712.082.811.23103.714.096.813.14117.415.9109.714.8513017.6121.516.46141.719.1132.417.97152.520.6142.519.38162.321.9151.920.59171.923.2160.621.710180.624.4168.822.8*) при дозируемом объеме 1 мкл и делении потока 6.4:1; **) при дозируемомобъеме 0.5 мкл и делении потока 6.4:1; ***) при дозируемом объеме 2 мкл иделении потока 6.4:1; ****) при дозируемом объеме 3 мкл и делении потока 6.4:1.14 точек таблицы 3.14 перекрывают интервал концентраций от 50.6 до 169мкг/мкл для 1-бутанола и от 54.2 до 181 мкг/мкл для толуола.
Соответственно,интервал перекрытия дозируемых количеств 1-бутанола и толуола по даннымтаблицы 3.14 составляет [3.4 - 22.8] и [3.7 - 24.4] мкг, соответственно.Помимо этого, для независимого контроля получаемых результатов, а такжедля расчета индексов удерживания не только по максимуму пиков, но и на высоте10 и 50% от базовой линии были проведены эксперименты, в которых кисходному раствору (XXXVIII) приливали последовательно 17 добавок по 20 мклтолуола и 1-бутанола. При этом образец (XXXVIII) готовили путем смешения 154мл изопропилового спирта, 20 мкл толуола, 20 мкл 1-бутанола, а также реперныхн-алканов С6-С8 в количествах по 300 мкл.В результате 18 точек данной серии экспериментов перекрыли интервалконцентраций от 8.4 до 111.3 мкг/мкл для 1-бутанола и от 8.9 до 119.1 мкг/мклдля толуола.
Соответственно, интервал перекрытия дозируемых количеств 1бутанола и толуола по результатам проведенной серии экспериментов составилот 0.6 до 7.6 мкг для 1-бутанола и от 0.6 до 8.2 мкг для толуола.Исходный образец (XXXIX) для детальной оценки предварительновыявленной области перегрузки на примере ДМФА готовили путем смешения 0.5мл изопропилового спирта, 50 мкл N,N-диметилформамида и реперных н-алкановС6 – С8 в количествах по 50 мкл.
Затем к образцу (XXIX) последовательно (10 раз)добавляли по 20 мкл N,N-диметилформамида. В таблице 3.15 приведеныконцентрации N,N-диметилформамида в образцах (мкг/мкл), а также количествааналита в хроматографической зоне (мкг) в зависимости от количества егодобавок к исходному образцу.Таблица 3.15 Концентрация N,N-диметилформамида в образце (мкг/мкл) и егоколичество в дозируемой пробе (мкг) в зависимости от номерадобавкиНомер добавкиC(ДМФА)вобразце, m(ДМФА) в дозируемоймкг/мклпробе*, мкг068.79.3193.512.62117.015.83139.318.84160.421.75180.424.46199.427.07217.629.455Продолжение таблицы 3.158234.931.79251.534.010264.335.7*) при дозируемом объеме 1 мкл и делении потока 6.4:1.11 точек таблицы 3.15 перекрывают интервал концентраций ДМФА от 68.7до 264 мкг/мкл.
Соответственно, интервал перекрытия дозируемых количествДМФА по данным таблицы 3.15 составляет от 9.3 до 35.7 мкг.3.3 Условия газохроматографического анализа3.3.1 Условия газохроматографического анализа при выявлении аномалийзависимости RI(T)Анализ приготовленных растворов проводили на газовом хроматографеХроматэк-Кристалл5000.2спламенно-ионизационнымдетекторомикапиллярной колонкой из плавленого кварца ВРХ-1 длиной 10 м, внутреннимдиаметром 0.53 мм, толщиной пленки неподвижной фазы 2.65 мкм визотермических условиях (диапазон температур 120 – 30 °C).
Объемная скоростьгаза-носителя (азот) 5.1 мл/мин (линейная 48.5 см/с), деление потока 6.4 : 1,температура испарителя 120 °C, температура детектора 150 °C. Во всех случаяхдозируемые объемы проб составляли 0.5 мкл.563.3.2 Условия газохроматографического анализа при оценке перегрузкихроматографической колонкиУсловия газохроматографического анализа для выявления критериевперегрузки хроматографической колонки были идентичны условиям, описаннымв разделе 3.3.1, за исключением того, что диапазон температур термостатаколонок составлял 120 – 100 °C, а дозируемые объемы проб варьировались от 0.5до 6 мкл.
Кроме того, некоторые пробы анализировали со стекловатой и безстекловаты в лайнере испарителя3.3.3 Условия газохроматографического анализа двухкомпонентной тестсмеси для контроля инертности газохроматографической системыУсловия газохроматографического анализа для выявления критериевперегрузки хроматографической колонки были идентичны условиям, описаннымв разделе 3.3.1, за исключением того, что температура термостата колонкисоставляла 120 °C, а деление потока было 6.3:1.3.3.4 Условия анализа для проверки возможности газохроматографическогоразделения энантиомеров на колонке с ахиральной фазойАнализ образцов проводили на газовом хроматографе Хроматэк-Кристалл5000.2 с пламенно-ионизационным детектором и капиллярной колонкой изплавленого кварца ВРХ-1 длиной 10 м, внутренним диаметром 0.53 мм, толщинойпленки неподвижной фазы 2.65 мкм в изотермических условиях (диапазонтемператур 150 – 100 °C).
Объемная скорость газа-носителя (азот) 5.1 мл/мин(линейная 51.2 см/с), деление потока 6.4 : 1, температура испарителя 150 °C,температура детектора 180 °C. Во всех случаях дозируемые объемы пробсоставляли 0.5 мкл.573.3.5 Условия хромато-масс-спектрометрического анализа для проверкивозможности разделения энантиомеров на колонке с ахиральной фазойХромато-масс-спектрометрический анализ в изотермических условияхпроводили на хромато-масс-спектрометре Shimadzu QP 2010 с установленнойколонкой RTX-5 MS длиной 30 м, внутренним диаметром 0.32 мм и толщинойпленки неподвижной фазы 0.25 мкм в режиме ионизации электронами, при этомтемпература интерфейса и источника ионов составляла 200 °C. Объемнаяскорость газа-носителя (гелий) 1.83 мл/мин, деление потока 10 : 1, температураиспарителя 200 °C, объем дозируемых проб 0.5-1 мкл.3.3.6 Условия газохроматографического анализа для проверки возможностиразделения энантиомеров на колонке с хиральной фазойАнализ образцов проводили на газовом хроматографе Хроматэк-Кристалл5000.2 с пламенно-ионизационным детектором и хиральной колонкой Permabond(R)-L-Chirasil-Val (1989 года выпуска) длиной 25 м, внутренним диаметром 0.25мм(толщинапленкинеподвижнойфазынеуказананаупаковке)изотермических условиях при температуре термостата колонки – 100в0С.Объемная скорость газа-носителя (азот) 2.1 мл/мин (линейная 50.3 см/с), делениепотока 25 : 1, температура испарителя 150 °C, температура детектора 180 °C.Объем дозируемых проб 0.5-1 мкл.3.4 Обработка результатовВ соответствии с «традиционным» определением, значение фактораасимметрии равно отношению двух составляющих ширины хроматографическогопика между перпендикуляром, опущенным из максимума хроматографическогопика на базовую линию, и его передним фронтом и «хвостом», соответственно, A58= L2/L1 (рис.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
