Диссертация (1145887), страница 12
Текст из файла (страница 12)
В настоящее время роль этих клаудиновв осуществлении функций альвеол молочной железы остается не известной.Обсуждая проблему транспорта ионов кальция, стоит упомянуть значениеклаудина-12 для этого процесса. Используя метод РНК-интерференции исверхэкспрессии белков было установлено, что в эпителии кишки мышитранспорт ионов кальция осуществляется совместно клаудином-2 и клаудином12.
Регулируется этот процесс через рецептор к активной форме витамина D(Yamamoto et al., 2012).Наличие клаудина-7 важно для осуществления функций альвеол молочнойжелезы. Это следует из анализа экспрессии гена клаудина-7 в молочной железе.Количество мРНК клаудина-7 возрастает на протяжении беременности илактации и резко снижается в ходе инволюции (Baumgartner et al., 2012).
Можнопредположить, что клаудин-7 также вносит свой вклад в парацеллюлярныйтранспорт ионов. Данные, полученные на нокдаунных мышах, показывают, что65наличие клаудина-7 является необходимым для регуляции солевого баланса, таккак животные погибают в течение двух недель после рождения от сильнейшейпотери солей в почках и обезвоживания организма (Tatum et al., 2010).Существует и другая точка зрения. Иммуногистохимическое исследование вткани молочной железы локализации клаудина-7 показывает, что он ассоциированс какими-то цитоплазматическими структурами секреторных клеток, часто вблизибазолатеральной поверхности этих клеток. Авторы считают, что клаудин-7 можетбыть вовлечен в везикулярный транспорт внутри клетки или участвовать вовзаимодействии с тканевым матриксом (Blackman et al., 2005).Клаудин-4, относится к тем клаудинам, количество траскриптов которогоуменьшается в ходе лактации, но резко возрастает с первого дня инволюции.Клаудин-8 демонстрирует прямо противоположную динамику.
Количествотранскриптов клаудина-8 значительно увеличивается в начале лактации и резкоснижается в ходе инволюции (Baumgartner et al., 2012). Особый интерес этимфактам придает наблюдение, что для встраивания в структуру плотного контактаклаудин-4 нуждается во взаимодействии с клаудином-8. В условиях нокдаунаклаудина-8 в этих клетках клаудин-4 исчезал из плотных контактов (Hou et al.,2010).Возможная связь между клаудином-4 и клаудином-8 является отражениемболее общего вопроса в изучении тканевых барьеров – как одна структура(плотные контакты) одновременно обеспечивает противоположные функции, тоесть является барьером для межклеточного транспорта и порой для селективноготранспорта ионов? Надо иметь в виду, что каждый тип клеток или ткани имеетразличный спектр клаудинов, и пока нет полного понимания того, каким образомвзаимодействие различных клаудинов обеспечивает избирательную ионнуюпроницаемость плотных контактов.
Внедрение одного специфического клаудина вужесуществующийплотныйконтакт,кпримеру,путемэкзогеннойсверхэкспрессии, может иметь различные последствия в зависимости от составаэндогенных клаудинов этого плотного контакта. Так, при трансфекции клаудина3 в клоны линии клеток MDCK его влияние на ионную проницаемость зависело66от количества клаудина-2, присутствующего в них. В MDCK-клонах, содержащихнезначительное количество клаудина-2, клаудин-3 увеличивал непроницаемостьплотных контактов примерно в одинаковой степени для катионов и анионов.
ВMDCK-клонах, с высокой экспрессией клаудина-2, эффект клаудина-3 поотношению к катионам был существенно выше. Это свидетельствует о том, чтовключение клаудина-3 в плотный контакт оказывает влияние на функцииклаудина-2, как катионного канала. Однако функция клаудина-2, как водногоканала, не была изменена.
Известно, что клаудин-3 способен взаимодействовать склаудином-2 гетерофильным способом (Furuse et al., 1999). Таким образом, былсделан вывод, что в присутствии клаудина-2 клаудин-3 может формироватьгетеромеры, которые сохраняют водную проницаемость, основанную наприсутствии клаудина-2 (Milatz et al., 2010). Это свидетельствует о том, чтонеобходимо рассматривать не только функции отдельного клаудина, но брать врасчет его взаимодействие с другими белками плотных контактов, которыеобразует функциональный кластер взаимосвязанных белков (Markov et al. 2015).О роли клаудинов в физиологии лактации, можно также было бы сделатьзаключение, основываясь на сравнительном принципе изучения физиологическихфункций Известно, что самки разных видов млекопитающих существенноразличаются по характеру лактации.
У кроликов, например, кормление длитсятри-четыре минуты и происходит один раз в сутки (Cross, 1977). Представителигрызунов (крысы, мыши) имеют противоположный характер вскармливанияпотомства. Так, у мышей кормление детенышей длится в среднем от 30 до 60 мин,составляя в сумме более половины суток. Рефлексы выведения молока следует всреднем через каждые пять минут в ходе кормления (Марков, 1991).Физиологические условия осуществления секреции и выведения молока должныопределяться различным спектром белков, участвующих в формированиитканевогобарьера.Сопоставлениехарактералактациииособенностейпредставительства белков, в частности клаудинов, может помочь сделатьопределенные выводы о вкладе отдельных белков семейства клаудина вреализацию различных функций тканевого барьера в альвеоле молочной железы.67К сожалению, в данный момент материала для подобного рода сопоставлений ещенет.Нарушение барьерной функции плотных контактов и повышеннаяпроницаемость тканей – обычная характеристика воспалительных заболеванийкишечника, таких как язвенный колит и болезнь Крона, диареи приколлагенозном колите, некоторых болезней почек, метастаз при злокачественныхопухолях и большого числа различных патологических состояний (Kucharzik etal., 2001; Burgel et al., 2002; Muller et al., 2003; Kramer et al., 2000).Интенсивно ведутся исследования экспрессии клаудинов в патологиимолочной железа, в частности приобразовании опухоли.
Одним из важныхэффектов развития этого процесса в эпителиальных тканях является потеряклеточной полярности с сопутствующим разрушением эпителиального барьера(Mullin, 2004). Некоторые исследователи предполагают, что клаудины вовлеченыв опухолеобразование (Hoevel et al., 2002; Li, Mrsny, 2000). Было сделанопредположение, о том, что изменение в уровне или потеря белков плотныхконтактов, таких как клаудины, может приводить к клеточной дезориентации иразъединению, которые обычно происходят в неоплазиях. В настоящее времяпоказано, что в большинстве опухолей различных органов и тканей происходитснижение экспрессии клаудинов.
Однако, такие члены этого семейства какклаудины-3, -4 обнаруживают сверхэкспрессию, например, в опухолях яичника икарциноме молочной железы (Kominsky et al., 2004).Таким образом, изучение спектра клаудинов в альвеолах молочной железы– это возможность прогноза развития дисфункций этого органа, связанных сизменением уровня или спектра этих белков в плотных контактах.68ГЛАВА 4. ПЕРЕРЫВ В КОРМЛЕНИИ ДЕТЕНЫШЕЙ МЫШИ КАК МОДЕЛЬФИЗИОЛОГИЧЕСКОГО МЕТОДА РАСТЯЖЕНИЯ АЛЬВЕОЛ МОЛОЧНОЙЖЕЛЕЗЫ4.1. Изменение структуры альвеол молочной железы при перерыве вкормлении детенышейИсследование in toto. При визуальном осмотре молочных желез мышей,которыеотпрепаровалисразупослезавершениякормлениядетенышей(контрольная группа), и молочных желез мышей после 20-ти часового перерыва вкормлении детенышей (экспериментальная группа), наблюдали существенныеразличия в структуре железистой ткани. В контрольной группе животных хорошовидны отдельные доли молочной железы, с четко очерченными границамикаждой доли, группы альвеол окружены сетью кровеносных сосудов.
Прирассечении ткани молочной железы на участках, где нет больших выводныхпротоков, не наблюдали интенсивного выделения секрета на поверхность железы,область распространения секрета остается локальной, не распространяющейся надругие участки молочной железы (Рис. 6. А-а). Масса железы составляла 250 ±0,05 мг (n=10).После перерыва в кормлении детенышей невозможно визуально определитьструктурныекомпронентымолочнойжелезы:отдельныеальвеолыненаблюдаются, разделения на доли нет. На поверхности молочной железы виднытолько крупные кровеносные сосуды. После рассечения ткани наблюдалиинтенсивное выделение молока (Рис.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
