Диссертация (1144791), страница 46
Текст из файла (страница 46)
et al., 2010).ИзучениесовместногопримененияИПостКицитиколинаприэкспериментальном ишемическом инсульте в нашей работе было предпринятовпервые. Совместное применение ИПостК и цитиколина оказывало значимыйнейропротективный эффект, однако выраженность данного эффекта, оцениваемаяпо индексу неврологического дефицита, летальности и числу морфологическинеизмененных нейронов, не превышала таковую при отдельном примененииИПостК.Такимобразом,совместноеприменениеэндогенногоспособанейропротекции ИПостК и фармакологического нейропротектора цитиколина не252приводило к усилению или ослаблению нейропротективного эффекта ИПостК.Это свидетельствует о том, что механизмы адаптации, лежащие в основефеномена ИПостК, и механизмы действия нейропротектора цитиколина неявляются взаимосвязанными или реализуются в различные временные интервалы.6.2 Совместное применение ишемического прекондиционирования ицитиколина при ишемии-реперфузии головного мозга6.2.1 Протоколы экспериментов по изучению эффектов совместного примененияишемического прекондиционирования и цитиколина при ишемии-реперфузииголовного мозгаВ данном фрагменте работы представлены разработанные протоколыэкспериментов для изучения эффектов совместного применения ИПреК инейропротектора цитиколина при глобальной ишемии-реперфузии переднегомозга у монгольских песчанок и в острую фазу хронической церебральнойгипоперфузии у крыс.6.2.1.1 Совместное применение ишемического прекондиционирования ицитиколина при хронической церебральной гипоперфузии у крысВ исследовании была произведена оценка нейропротективного эффектасовместного применения ИПреК и цитиколина в острой фазе хроническойцеребральной гипоперфузии у крыс.
Для решения поставленной задачи былразработан протокол проведения эксперимента (рис. 6.3). Животные случайнойвыборкой были распределены на экспериментальные группы:1) «Ишемия+» (n=20). Животным данной группы, как и всем животным издругих экспериментальных групп, данного фрагмента исследования,проводили перманентную билатеральную окклюзию ОСА. Животным за 24часа до окклюзии ОСА внутрибрюшинно вводили физиологический253раствор в объеме, соответствующем объему вводимого цитиколина (0,9%NaCl, ОАО НПК «ЭСКОМ», Россия).2) «ПреК+» (n=16).
Крысам данной группы моделировали ишемическоестимулирующее воздействие в виде однократной 5-минутной окклюзииОСА за 24 часа до постоянной билатеральной окклюзией ОСА иодновременно внутрибрюшинно вводили физиологический раствор вобъеме, соответствующем объему вводимого цитиколина.3) «ИшемияЦ» (n=18).
Животным данной группы, за 24 часа перед окклюзиейОСА внутрибрюшинно однократно вводили цитиколин в дозе 500 мг/кг.4) «ПрекЦ» (n=18). Крысам данной группы моделировали ишемическоестимулирующее воздействие в виде однократной 5-минутной окклюзииОСА за 24 часа до постоянной билатеральной окклюзией ОСА иодновременно внутрибрюшинно однократно вводили цитиколин в дозе 500мг/кг в момент моделирования эпизода ишемии.Спустя 2 суток после проведения хирургических манипуляций оценивалиневрологический статус животных и летальность.
Выживших животных повторнонаркотизировали, извлекали мозг из полости черепа для дальнейшего проведенияморфометрического анализа структур головного мозга.ГруппаИПреК5с/5сРеперфузия24 часаИшемия2 сутокИшемия+ПреК+↓*ИшемияЦ↓*ПреКЦРис. 6.3. Схема протокола эксперимента, направленного на изучение нейропротективныхэффектов совместного применения ишемического прекондиционирования и нейропротекторацитиколина в острой фазе хронической церебральной гипоперфузии у крыс. ↓* - внутрибрюшинноевведение цитиколина в дозе 500 мг/кг.2546.2.1.2 Совместное применение ишемического прекондиционирования ицитиколина при глобальной ишемии-реперфузии переднего мозгау монгольских песчанокИзучение эффекта совместного применения ИПреК и цитиколина былопроизведено при глобальной ишемии-реперфузии переднего мозга у монгольскихпесчанок.
Для проведения исследования был разработан протокол эксперимента(рис. 6.4). Животные случайной выборкой были разделены на экспериментальныегруппы:1) «Ишемия а» (n=11). Животным данной группы проводили 7-минутнуюбилатеральную окклюзию ОСА, за 24 часа до окклюзии внутрибрюшинновводили физиологический раствор в объеме, соответствующем объемувводимого цитикола. Длительность реперфузионного периода в даннойгруппе, как и во всех остальных группах этой серии, после проведенияхирургических манипуляций составляла 2 суток.2) «ПреКа»(n=10).билатеральнойЖивотнымокклюзиейОСАданнойгруппы,моделировалипередодно7-минутнойишемическоестимулирующее воздействие в виде 2-минутной окклюзии ОСА содномоментным внутрибрюшинным введением физиологического растворав объеме, соответствующем объему вводимого цитиколина, и последующей24 часовой реперфузией.3) «ИшемияЦ а» (n=8).
В группу входили животные, которым за 24 часа передмоделированием7-минутнойбилатеральнойокклюзииОСАвнутрибрюшинно однократно вводили цитиколин в дозе 500 мг/кг.4) «ПреКЦ а» (n=8). Песчанкам данной группы за 24 часа перед 7-минутнойбилатеральной окклюзией ОСА проводили один эпизод 2-минутнойокклюзии ОСА с одномоментным однократным внутрибрюшиннымвведением цитиколина в дозе 500 мг/кг.255ИПреКРеперфузияИшемияРеперфузия2мин24 часа7 минут2 сутокИшемия аПреК а↓*ИшемияЦ а↓*ПреКЦ аРис.
6.4. Схема протокола эксперимента, направленного на изучение нейропротективногоэффекта совместного применения ишемического прекондиционирования и нейропротекторацитиколина при ишемии-реперфузии переднего мозга у монгольских песчанок. ↓*внутрибрюшинное введение цитиколина в дозе 500 мг/кг.Спустя 2 суток после проведения хирургических манипуляций оценивалиневрологическийстатусживотныхилетальность.Выжившихпесчанокнаркотизировали и проводили декапитацию, после чего извлекали головной мозгиз полости черепа для дальнейшего проведения морфологического анализаструктур головного мозга.6.2.2 Эффекты совместного применения ишемического прекондиционирования ицитиколина на различных экспериментальных моделях ишемии-реперфузииголовного мозгаКо 2-м суткам реперфузионного периода применение позднего ИПреКпредставленноговвидеоднократного5-минутногоишемическогостимулирующего воздействия за 24 часа до постоянной билатеральной окклюзииОСА и одновременное внутрибрюшинное введение физиологического раствора(группа «ПреК+») у крыс приводило к значимому снижению индексаневрологического дефицита при сравнении с аналогичным показателем в группе«Ишемия+» (Р<0,05) (табл.
6.7). В группе «ПреК+» наблюдалось некотороеснижение уровня летальности при сравнении с таковым в группе «Ишемия+»,однако значимых различий обнаружить не удалось (Р>0,05) (табл. 6.8). Числоморфологически неизмененных нейронов в слоях II, III и V головного мозга в256группах «ПреК+» и «Ишемия+» значимо не различалось (Р>0,05) (табл. 6.9). Вострую фазу хронической церебральной гипоперфузии после применения ИПреК(группа «ПреК+») отмечалось значимое увеличение числа морфологическинеизмененных нейронов только в поле СА1 гиппокампа на 21,7% при сравнении стаковым в группе «Ишемия+» (Р<0,05) (табл. 6.10).Таблица 6.7Индекс неврологического дефицита крыс в острую фазу хроническойцеребральной гипоперфузии после совместного применения ишемическогопрекондиционирования и цитиколинаИшемия+13,1(6 – 14)Экспериментальная группаМе (min-max)ПреК+ИшемияЦ10,2*10,8*(6 – 12)(5 – 12)ПреКЦ9,8*(6 – 12)Различия значимы: * по сравнению с показателем в группе «Ишемия+» при Р<0,05.Таблица 6.8Летальность крыс в острую фазу хронической церебральной гипоперфузии послесовместного применения ишемического прекондиционирования и цитиколинаИшемия+55,0(11/20)Экспериментальная группаПреК+ИшемияЦ37,538,8(6/16)(7/18)ПреКЦ50,0(9/18)Таблица 6.9Количество морфологически неизмененных нейронов в слоях коры головногомозга крыс в острую фазу хронической церебральной гипоперфузии послесовместного применения ишемического прекондиционирования и цитиколина(на 1 мм2 на срезе)ЭкспериментальнаягруппаИшемия+ПреК+ИшемияЦПреКЦСлои коры головного мозгаII284±10302±10296±14311±15III298±10311±11308±13302±15V192±11198±12188±14202±10257Применение цитиколина за 24 до моделирования ишемии головного мозга укрыс (группа «ПреКЦ») в острую фазу церебральной гипоперфузии приводило кзначимому снижению индекса неврологического дефицита при сравнении стаковым в группе «Ишемия+» (Р<0,05) (табл.
6.7). При этом также былоустановлено некоторое понижение показателя летальности при сравнении сгруппой «Ишемия+», но достоверных различий обнаружить не удалось (Р>0,05)(табл. 6.8). В поле СА1 отмечалась некоторая тенденция к увеличению числаморфологически неизмененных нейронов при сравнении с группой «Ишемия+»(Р>0,05), для полей СА2, СА3 и СА4 гиппокампа и слоев II, III и V коры мозгатакой тенденции обнаружено не было (табл.
6.9, табл. 6.10).Таблица 6.10Количество морфологически неизмененных нейронов в полях гиппокампа крыс вострую фазу хронической церебральной гипоперфузии после совместногоприменения ишемического прекондиционирования и цитиколина(на протяжении 1 мм на срезе)ЭкспериментальнаягруппаИшемия+ПреК+ИшемияЦПреКЦПоля гиппокампаСА1173±13212±10*201±14220±12*СА2184±10194±12199±12193±11СА3162±12167±12159±14174±12СА4121±11127±9119±12131±13Различия значимы: * по сравнению с показателем в группе «Ишемия+» при Р<0,05.В острую фазу церебральной гипоперфузии совместное одномоментноеприменение позднего ИПреК и цитиколина (группа «ПреКЦ») у крыс, выжившихко 2-м суткам наблюдений, приводило к значимому снижению индексаневрологического дефицита по сравнению с группой «Ишемия+» (Р<0,05), приэтом он значимо не отличался от индекса, регистрируемого в группах «ПреК+» и«ИшемияЦ» (Р>0,05) (табл.
6.7). Совместное одномоментное применениепозднего ИПреК и цитиколина не влияло на уровень летальности в острую фазуцеребральной гипоперфузии при сравнении с аналогичным показателем в группе«Ишемия+» (Р>0,05), однако наблюдалась некоторая тенденция к ее увеличению258по сравнению с таковой в группах «ПреК+» и «ПреКЦ» (Р>0,05) (табл.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
