Диссертация (1144791), страница 47
Текст из файла (страница 47)
6.8). Вострую фазу церебральной гипоперфузии совместное одномоментное применениепозднего ИПреК и цитиколина не приводило к значимому изменению числаморфологически неизмененных нейронов в слоях II, III и V коры мозга присравнении с таковым в группах «Ишемия+», «ПреК+» и «ПреКЦ» (Р>0,05) (табл.6.9). Значимое увеличение числа морфологически неизмененных нейронов былоустановлено только в поле СА1 гиппокампа на 26,6% при сравнении с таковым вгруппе «Ишемия+» (Р<0,05), при этом этот показатель был сопоставим саналогичным показателем группах «ПреК+» и «ПреКЦ» (Р>0,05) (табл.
6.10).У песчанок монгольских после применения позднего ИПреК ко 2-м суткамреперфузионного периода после 7-минутной ишемии переднего мозга (группа«ПреК а») не наблюдалось изменения выраженности неврологических симптомови уровня летальности при сравнении с аналогичными показателями в группе«Ишемия а» (Р>0,05) (табл. 6.11, 6.12). Ко 2-м суткам наблюдений в группе«ПреК а» отмечалось значимое увеличение числа морфологически неизмененныхнейронов в слое III коры головного мозга и в полях СА1 и СА3 гиппокампа на25,3 (Р<0,01), 38,5 (Р<0,01) и 24,1% (Р<0,05), соответственно, при сравнении стаковым в группе «Ишемия а» (табл.
6.13, табл. 6.14).Таблица 6.11Индекс неврологического дефицита монгольских песчанок при глобальнойишемии-реперфузии переднего мозга после совместного примененияишемического прекондиционирования и цитиколинаИшемия а0,60(0 – 2)Экспериментальная группаМе (min-max)ПреК аИшемияЦ а0,660,71(0 – 2)(0 – 2)ПреКЦ а0,57(0 – 2)Однократное применение цитиколина в дозе 500 мг/кг за 24 часа домоделирования 7-минутной ишемии переднего мозга у монгольских песчанок(группа «ИшемияЦ а») ко 2-м суткам реперфузионного периода не приводило к259значимому изменению индекса неврологического дефицита и уровня летальностипо сравнению с аналогичными показателями в группе «Ишемия а» (Р>0,05) (табл.6.11, табл. 6.12).Таблица 6.12Летальность монгольских песчанок при глобальной ишемии-реперфузиипереднего мозга после совместного применения ишемическогопрекондиционирования и цитиколинаЭкспериментальная группаИшемия а9,1(1/11)ПреК а10,0(1/10)ИшемияЦ а12,5(1/8)ПреКЦ а12,5(1/8)Таблица 6.13Количество морфологически неизмененных нейронов в слоях коры мозгамонгольских песчанок при глобальной ишемии-реперфузии переднего мозгапосле совместного применения ишемического прекондиционирования ицитиколина (на 1 мм2 на срезе)ЭкспериментальнаягруппаИшемия аПреК аИшемияЦ аПреКЦ аСлои коры головного мозгаII228±10253±13246±12249±12III199±12249±13*219±12256±14*V202±10211±15216±10209±13Различия значимы: * по сравнению с показателем в группе «Ишемия а» при Р<0,01.Ко 2-м суткам реперфузии в группе «ИшемияЦ а» число морфологическинеизмененных нейронов в слоях II, III и V коры мозга не отличалось от такового вгруппе «Ишемия а» (Р>0,05) (табл.
6.13). При этом в поле СА1 гиппокампанаблюдалось увеличение числа морфологически неизмененных нейронов на26,1% при сравнении с их количеством в группе «Ишемия а» (Р<0,05) (табл. 6.14).260Таблица 6.14Количество морфологически неизмененных нейронов в полях гиппокампамонгольских песчанок при глобальной ишемии-реперфузии переднего мозгапосле совместного применения ишемического прекондиционирования ицитиколина (на протяжении 1 мм на срезе)ЭкспериментальнаягруппаИшемия аПреК аИшемияЦ аПреКЦ аПоля гиппокампаСА192±9127±11**116±9*132±12**СА2208±10211±10216±15211±12СА3112±9140±10*123±11146±13*СА4121±13127±14119±13123±11Различия значимы: * по сравнению с показателем в группе «Ишемия а» при Р<0,05; **при Р<0,01.Совместное применение позднего ИПреК и цитиколина у песчанокмонгольских ко 2-м суткам реперфузии (группа «ПреКЦ а») не приводило кизменению индекса неврологического дефицита и летальности при сравнении сих значениями в группах «Ишемия а», «ПреК а» и «ИшемияЦ а» (Р>0,05) (табл.6.11, табл.
6.12). При морфометрическом анализе структур головного мозга былоустановленозначимоеувеличениечисламорфологическинеизмененныхнейронов в слое III коры и в полях СА1 и СА3 гиппокампа на 29,3 (Р<0,01), 45,1(Р<0,01) и 29,4% (Р<0,05) соответственно при сравнении с таковым в группе«Ишемия а» (табл. 6.13, табл. 6.14). При этом необходимо отметить: значимыхразличий количества морфологически неизмененных нейронов в слоях II, III и Vкоры мозга и в полях СА1, СА2, СА3 и СА4 в группах «ПреКЦ а» и «ПреК а»обнаружено не было (Р>0,05) (табл. 6.13, табл.
6.14).Однократное применение цитиколина в дозе 500 мг/кг внутрибрюшинно за24 часа до моделирования ишемического повреждения головного мозга у крыс ипесчанок сопровождалось нейропротективным эффектом, степень котороговарьировала в зависимости от использованной экспериментальной модели.Обнаруженный нейропротективный эффект объясняется тем, что цитиколинэффективно проникает через гематоэнцефалический барьер.
При этом егоконцентрация в головном мозге остается высокой в течение 48 часов иэлиминация происходит довольно медленно (Saver J.L., 2008). Так, в261экспериментах на мышах с радиоактивно помеченным цитиколином былопоказано, что спустя 24 часа метка появлялась в коре, белом веществе и ядрахцентрального околоводопроводного серого вещества (Saver J.L., 2008).
Такжеполученные нами результаты о нейропротективном эффекте цитиколина,примененном до ишемического повреждения, согласуются с результатами,полученными при экспериментальном повреждении спинного мозга у крыс(Turkkan A. et al., 2010). Так, однократное введение цитиколина в дозе 600 мг/кгза 10 минут до ишемического повреждения спинного мозга обладалонейропротективным эффектом (Turkkan A. et al., 2010).Совместное применение ИПреК и цитиколина на двух экспериментальныхмоделях ишемии-реперфузии головного мозга не способствовало усилению илиподавлению нейропротективных эффектов ИПреК. В литературе описаны какслучаи взаимного потенцирования эффектов различных способов цитопротекции,в частности, при сочетанном применении ИПреК сердца и ингибиторовангиотензин-превращающего фермента (Цырлин В.А.
с соавт., 2001), так иподавления эффекта эндогенной цитопротекции при совместном применении сантиоксидантами и антигипоксантами (Бокерия Л.А., Чичерин И.Н., 2007). В рядеисследованийпоказано,чтоцитиколинобладаетантиоксидантными,мембраностабилизирующими свойствами, нормализуя энергетику митохондрий ивосстанавливая функционирование Na+-K+-АТФазы (Hurtado O.
et al., 2007; LeeH.J. et al., 2009). Теоретически можно было бы ожидать ослабления эффектаИПреК, однако в проведенном нами исследовании такой закономерностиустановить не удалось. Вторым фактом, позволяющим предположить влияниецитиколина на реализацию нейропротективного эффекта ИПреК является то, чтомногие индукторы ишемической толерантности головного мозга адаптируютпотенциал-зависимые кальциевые каналы к кальциевой перегрузке путемумеренной стимуляции NMDA-рецепторов глутаматом (Shpargel K.B.
et al., 2008).Цитиколин блокирует выброс глутамата во время ишемии путем стимуляцииобратного захвата и таким образом снижает его синаптическую концентрацию(CacabelosR. et al., 1993;Ye J. et al., 2010). Цитиколин, обладая262антиоксидантными свойствами и блокируя выброс глутамата, мог бы блокироватьэффект тренировки от применения прекондиционирующего стимула, ослабляятем самым нейропротективный эффект ИПреК. С другой стороны, ослаблениеэксайтотоксичности при ИПреК головного мозга может происходить за счетусиленного высвобождения из нейронов ГАМК, приводящего в итоге кторможению высвобождения глутамата из пресинаптических терминалей (DaveK.R.
et al., 2005).Такимобразом,совместноеприменениеишемическогопрекондиционирующего стимула за 24 часа до тестовой ишемии и однократноевведение нейропротектора цитиколина при глобальной ишемии-реперфузиипереднего мозга у песчанок и в острую фазу ишемии при хроническойцеребральной гипоперфузии у крыс не приводило к потенцированию илиподавлению нейропротективного эффекта ИПреК. Это свидетельствует о том, чтомеханизмы адаптации, лежащие в основе феномена ИПреК, и механизмыдействия нейропротектора цитиколина не являются взаимосвязанными илиреализуются в различные временные интервалы.263ЗАКЛЮЧЕНИЕАнализ результатов физиологического исследования позволил определить иисследовать эффекты и механизмы ишемического пре- и посткондиционированияголовного мозга на различных экспериментальных моделях ишемического иреперфузионногоповреждения.Прекондиционирующиеилипосткондиционирующие ишемические стимулирующие воздействия, могутобладать как нейропротективным, так и повреждающим действием.
Это действиесущественным образом зависит от количества и длительности ишемическихстимулов, а также от продолжительности реперфузионного периода. Дляизучения механизмов ишемического и реперфузионного повреждения головногомозга и возможностей эндогенной нейропротекции при его полной глобальнойишемии-реперфузии разработана экспериментальная модель.
Исследованиепроводили, применяя модели полной глобальной ишемии-реперфузии головногомозга у двух видов животных, принадлежащих к отряду грызунов, но к разнымтаксономическим подсемействам семейства мышиные: песчанка монгольская(вид - Meriones unguiculatus), подсемейства песчанковые и крысы Wistar (вид –Rattus norvegicus) подсемейства мышиные. Использованный подход позволилвыявить физиологические закономерности, отмечаемые при реализации эффектовИПостК и ИПреК, а также раскрыть особенности, присущие определенному видуживотных, со своим типом церебрального кровообращения.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
