Диссертация (1141389), страница 4
Текст из файла (страница 4)
Основнымикритериямиоценкиподлинностимногокомпонентныхпрепаратоврастительного происхождения являются определение суммы БАВ (эфирногомасла, дубильных веществ и др.) и некоторых отдельных компонентов [57,68, 78, 89].Например, препарат мараславин (АО Софарма, Болгария) [18],применяемый для лечения и профилактикивоспалительных заболеваний22пародонта, содержит отвары пяти видов растительного сырья содержащихразличные группы БАВ:1. Трава полыни понтийской – не является фармакопейным растительнымсырьем. Содержит эфирное масло, основными компонентами которогоявляются: α-туйон, β-туйон, туйол, туйилацетат, хамазулен [47].2. Трава чабера – не является фармакопейным растительным сырьем.Содержит эфирное масло, дубильные вещества, горечи, ситостерин,урсоловую кислоту. Основными компонентами эфирного масла чабераявляются карвакрол, цимол, тимол, дипентен, фенол и др.
[82].3. Бутоны гвоздичного дерева – содержат эфирное масло в состав котороговходит эвгенол (до 85 %), кариофиллен, ацетилэвгенол, смесь бициклическихсесквитерпенов. Кроме того, в состав бутонов гвоздичного дерева входятдубильные вещества, слизи, жиры. Фармакопейным растительным сырьем неявляется [50, 59, 57, 66, 92, 93].4. Плоды черного перца – содержат эфирное масло, в состав которого входятдипентен, фелландрен и сесквитерпен кариофиллен ; содержат смолу,жирноемасло, крахмал, алкалоидпиперин [50, 59, 66, 57, 92].5. Корневища имбиря содержат эфирное масло, главным его компонентомявляется зингиберен — до 70 %, также содержатся, камфен, бисаболен,борнеол, цитраль, линалоол [50, 59, 66].В состав препарата мараславин входят аммония хлорид и винный уксус.Спецификация на препарат мараславин предусматривает качественноеопределение гвоздики, понтийской полыни и имбиря методом ТСХ (сорбентпластинки-алюминиевая фольга Кизелгель, подвижная фаза н-гексан:этилацетатвсоотношении7:3).Определениедубильныхвеществ(качественная реакция с железоаммониевыми квасцами).Таким образом, определение подлинности предусмотрено только длятрех видов растительного сырья.
Идентификация травы чабера и плодовчерного перца не предусмотрена НД на препарат мараславин. Количественноопределяют только дубильные вещества методом перманганатометрического23титрования.НДнапрепаратмараславиннепозволяет достоверноидентифицировать все заявленные в составе препарата компоненты.Напримеремногокомпонентныхпрепаратоврастительногопроисхождения стоматофит и стоматофит А (АО «Фитофарм Кленка»,Польша) [18]была проведена оценка существующих подходов к анализукачества.
Стоматофит представляет собойрастительногосырья,содержащегоэкстракт из семи видовбольшоеколичествоБАВ.Этотрадиционно применяемые виды растительного сырья с выраженнойантисептической и противовоспалительной активностью. В результатепроведенного анализа фармакопейных статей на растительное сырье былоустановлено, что оценка качества основана на определении суммы БАВ:эфирногомасла,дубильныхвеществ,флавоноидов.Идентификацияиндивидуальных соединений основных групп БАВ не предусмотрена.(таблица 3).ПодходыкопределениюпредложенныевНДнаподлинностипрепаратыианализустоматофитикачества,стоматофитА,предусматривают идентификацию не всех заявленных в составе видоврастительного сырья [18].Согласно стандарту качества идентификация компонентов препаратастоматофит основана на применении тонкослойной хроматографии (ТСХ). Вкачестве сорбента используется Силикагель 60 (фирма Мерк), в качествеподвижной фазы смесьтолуол:этилацетат (93:7). Испытуемый растворпредставляет собой растворенный в толуоле сухой остаток извлечения изпрепарата пентаном (1:2).
В качестве растворов сравнения используютрастворы линалоола, ментола и тимола в толуоле. Хроматограммупроявляют, опрыскивая пластинку 10 мл 5 % раствора серной кислоты вэтаноле и сразу за этим 10 мл 1 % раствора ванилина в этаноле, с последующимнагреванием притемпературе105°С в течение 1 0хроматограммы проводится при дневном освещении.минут. ОценкаНа хроматограммеисследуемого образца должны быть идентифицированы следующие зоны24адсорбции: серо-голубого цвета на уровне зоны аналогичного цвета нахроматограмме раствора сравнения RS1(Rf ~0,18) – линалоол; голубого цветана уровне зоны аналогичного цвета на хроматограмме раствора сравненияRS2(Rf~0,35) – ментол; темно-фиолетового цвета немного ниже зоны розовогоцвета на хроматограмме раствора сравнения RS3 – тимол; розового цвета науровне зоны тимола (Rf~0,53) розового цвета и голубого цвета выше зонытимола розового цвета.Такимобразом,настоящийстандарткачествапредполагаетидентификацию трех БАВ, а именно, линалоола – компонента эфирногомасла шалфея, тимола – основного компонента эфирного масла тимьянаобыкновенного, и ментола – основного компонента эфирного масла мятыперечной, и, соответственно, доказывает присутствие трех из семизаявленных в составе видов растительного сырья.Количественный анализ основан на определении двух групп БАВ –танинов и эфирных масел.
Около 5,0 г (точная навеска) препаратапомещают в мерную колбу вместимостью 250 и доводят объем раствораводой до метки, фильтруют через бумажный фильтр 125 мм диаметром,отбрасывая первые 50 мл.Определение общих танинов проводят методом спектрофотометрии вмаксимуме поглощения при длине волны 760 нм (D 1 ) в кювете с толщинойслоя 10 мм относительно воды.Так же определяют танины, не поглощаемые порошком из кожи. Послепредварительнойисследуемыхпробоподготовкиобразцовсизмеряютпомощьюоптическуюспектрофотометравплотностьмаксимумепоглощения при длине волны 760 нм (D 2 ) в кювете с толщиной слоя 10 ммотносительно воды.25Таблица 3.Требования стандартов качества по содержанию основных группбиологически активных веществ для видов растительного сырья, входящего всостав препарата стоматофитСырьеОсновные БАВСодержание основныхгрупп БАВКора дуба(CortexQuercus)Дубильныевещества:галловая кислота,эллаговаякислота.Эфирное масло:матрицин,матрикарин;флавоноиды.Дубильных веществне менее 8 % в пересчете натанин (ГФ XIII).Ромашкиаптечнойцветки(Chamomillaerecutita flores)Шалфеялекарственноголистья(Salviaeofficinalis folia)Эфирное масло:Цинеол, камфора,α и βтуйон и др.;дубильныевещества.Трава арники(Herba Arnicae)НД фирмыЭфирное масло:арнифолин,арницин.Флавоноиды:кверцетин,кемпферол,лютеолин,апигенин, рутин.Эфирное масло:тимол,карвакрол,линалоол.Эфирное масло:ментол, ментон,пинен, лимонен,пулегон,ментофуран.Цветки арники(Flowers ofArnica)ГОСТ 13399-89Трава тимьянаобыкновенного(Herba Thymivulgaris)Трава мятыперечной(Herba Menthaepiperitae)НД фирмыМяты перечнойлистья(Menthaepiperitae folia)Корневищааира(RhizomataCalami)Эфирное масло:камфен, камфора,борнеол, акорон,азарон, эвгенол.Эфирного маслане менее 0,3 % (ГФ XIII);Суммы флавоноидов впересчете на рутин неменее 1,2 % (ГФ XIII);Экстрактивных веществ неменее 18 % (ГФ XIII).Эфирного маслане менее 0,8 % (ГФ XIII);Дубильных веществ впересчете на танин неменее 4,5 % (ГФ XIII);Экстрактивных веществ неменее 30 % (ГФ XIII).Методколичественногоопределения БАВПерманганатометрия(ГФ XIII)Метод 1 или 2определения эфирногомасла (объемновесовой) (ГФ XIII)Метод спектрофотометрии (ГФ XIII)Метод 1 или 2определения эфирногомасла (объемновесовой) (ГФ XIII)Перманганатометрия(ГФ XIII)Метод спектрофотометрии (ГФ XIII)Суммы флавоноидов впересчете на рутин неменее 1,5 %.Эфирного маслане менее 1 % (ГФ XIII).Эфирного маслане менее 1 % (ГФ XIII);Суммы флавоноидов впересчете на рутин неменее 0,6 % (ГФ XIII).Эфирного масла (дляизмельченного сырья) неменее 2 % (ГФ XIII).Метод 1 или 2определения эфирногомасла (объемновесовой) (ГФ XIII).Метод 1 или 2определения эфирногомасла (объемновесовой) (ГФ XIII);Метод спектрофотометрии (ГФ XIII).Метод 3определения эфирногомасла (объемновесовой) (ГФ XIII).26Количественное определение эфирных масел осуществляют объемновесовым методом.
К точной навеске препарата (10 мл) добавляют 100 млводы и перегоняют с помощью прибора для определения спирта в настойках.К полученному дистилляту добавляют 10 мл пентана. Смесь взбалтывают ипосле разделения слоев отделяют пентановый слой. Спиртоводный слойобрабатывают пентаном еще дважды и объединяют. Пентановые извлечениясушат натрия сульфатом безводным и фильтруют через бумажный фильтрсредней плотности.
Упаривают на водяной бане при температуре не выше50°С до полного удаления пентана. Первое взвешивание проводят через 2часа.В соответствии с фармакопейными методами также определяютплотность, содержание спирта, сухой остаток, тяжелые металлы, проводятиспытания микробиологической чистоты.Параллельно проводился анализ действующей НД на препаратстоматофит А (АО «Фитофарм Кленка», Польша) [18]. Стоматофит Амногокомпонентный препарат, представляющий собой жидкий экстракт изсмеси растительного сырья, использующегося для производства препаратастоматофит. В состав препарата также входит анестезин.Аналогичнонормативнойдокументациипрепаратастоматофитспецификация на препарат стоматофит А предусматривает методикиопределения подлинности и анализа качества не позволяющие доказатьприсутствие всех компонентов препарата.В соответствии с описанием препарат стоматофит А - вязкаянепрозрачная жидкость темно-коричневого цвета с характерным запахом.Анализ подлинности препарата стоматофит А осуществляется методомтонкослойной хроматографии (ТСХ).
В качестве сорбента используютсиликагель 60 F 254 (фирма Мерк), в качестве подвижной фазысмесьтолуол:этилацетат (93:7). Испытуемый раствор представляет собойрастворенный в толуоле сухой остаток извлечения из препарата пентаном. Вкачестве растворов сравнения используют раствор тимола в толуоле и27раствор анестезина в этаноле 70%. Хроматограмму проявляют, опрыскиваяпластинку последовательно 5% раствором серной кислоты в 96% этаноле и 1 %раствором ванилина в 96% этаноле, с последующим нагреванием притемпературе 100-105°С в течение 1 0 минут.
Оценку хроматограммы проводятпри дневном освещении.В соответствии с требованиями нормативнойдокументации препарата стоматофит А на хроматограмме исследуемогообразца должны быть идентифицированы следующие зоны адсорбции:фиолетовая близко к линии старта с R f около 0,07-0,09; серо-голубая с R f около0,16-0,18 ниже желтой зоны стандарта анестезина; желтая, соответствующаяанестезину, с R f около 0,26-0,28, на уровне зоны стандарта анестезина; розоваяна уровне розовой зоны стандарта тимола с Rf около 0,51-0,53. Нахроматограмме могут быть видны и другие зоны.Таким образом, имеющаяся методикаТСХ позволяет достоверноидентифицировать в стоматофите А анестезин и тимол – основной компонентэфирного масла тимьяна, т.е. доказывает присутствие только одного из семизаявленных в препарате видов растительного сырья.Количественно в препарате стоматофит А определяют две позиции:анестезин и дубильные вещества с использованием титриметрического испектрофотометрического методов анализа, соответственно.В соответствии с фармакопейными методами определяют плотность,содержание спирта, сухой остаток, тяжелые металлы, микробиологическуючистоту.В нормативной документации на указанные препараты в целом непредусмотрена оценка качества, включая идентификацию химическихсоединений основных групп БАВ растительного сырья нормируемогосостава с последующей их количественной оценкой.Поэтому, учитывая описанные в пункте 1.1 тенденции расширенияассортимента лекарственных препаратоврастительного происхождения,применяемых в стоматологии, а также возросшее в последнее время числослучаевфальсификации,актуальнымнаправлениемисследований28представляется совершенствование и унификация методов стандартизациимногокомпонентных препаратов с целью оптимизации оценки их качества.1.3 Анализ химического состава видов растительного сырья, традиционноиспользуемого в производстве препаратов, применяемых в стоматологииДля лечения и профилактики воспалительных заболеваний полости ртатрадиционноиспользуютрастительноесырье,содержащееБАВ,представленные терпеноидами, ароматическими соединениями, дубильнымивеществами и др.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
