Диссертация (1141387), страница 21
Текст из файла (страница 21)
4, Рис. 5.1.).Проведено исследование контрацептивного действия и биологическойбезвредности по методикам, подробно изложенным в гл.2, п 2.2.7.3. (А, Б). Отчетисследования приведен в приложении № 2.В результате исследования спермицидной активности in vitro ранее былоустановлено, что эффективность сапонинов стиракса проявляется уже вконцентрации 0,5%, вызывая мгновенную гибель сперматозоидов при полномотсутствии подвижных.СЭСЛ вводили в состав аппликационного геля 15 %, который легкосмешивается с вагинальным секретом и просто вводится крысами.В результате изучения установлено (см. таблицу 5.16.), что изученныеобразцы (гель 1,5% СЭСЛ) обладают контрацептивным эффектом, сопоставимымс действием зарубежного контрацептивного препарата «Фарматекс, кремвагинальный» (Франция).149Таблица 5.16.
– Контрацептивное действие геля СЭСЛ 1,5 % при вагинальномвведении крысамКоличество самок в в группе, шт.ВсегоЗабеременевшихНебеременныхЭффективностьконтрацептивного действия,%1. Интактные животные(контроль I)55--2. Гелевая основа(контроль II)541203. «Фарматекс®, кремвагинальный»- (препаратсравнения)5-51004. Гель СЭСЛ 1,5 %(опыт)101990ГруппаИзучение контрацептивного действия СЭСЛ in vivo при вагинальномвведении половозрелым крысам в виде 1,5 % геля выявило 90 % эффективность.Контрацептивное действие ВСПЭС будет определяться присутствием сапониновв СЭСЛ и их принадлежностью к классу природных ПАВ, проявляющих своюактивность за счет снижения поверхностного натяжения мембраны сперматозоидаи ее разрушения под воздействием сапонинов.В результате осмотра животных, контрольной II и опытной IV групп опытаперед и после каждого нанесения аппликационной формы, не были отмечены изарегистрированы появления экссудата, изменений внешнего вида видимыхслизистых оболочек влагалища и у животных в целом, не было признаков эритеми раздражений.Гиперемии,ссадин,эритемираздраженийвыявленонебыло.Макроскопических изменений не выявлено.
Отсутствие микроскопическихизменений подтверждено гистологическим исследованием слизистой оболочкивлагалища крыс (рис.5.7.).150Рис.5.7. Гистосрез влагалища крысы - окрас Г.-Э.х20Таким образом, по показателям местно-раздражающего действия можноконстатировать, что препарат сухого экстракта стиракса лекарственного гель 1,5%не обладает местно-раздражающим действием.151ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 51. Разработан состав биорастворимых лекарственных полимерных вагинальныхпленок 25 см2 с 25 мг сухого экстракта стиракса лекарственного (около 3%сапонинов стиракса) на основе ПВС, карбопола 980 и глицерина;2.
Обоснованыпоказателиинормыкачествапрепарата«Вагинальныеспермицидные пленки с сапонинами стиракса», с использованием методикЯМР, ТСХ и УФ определения подлинности и количественного содержаниясапонинов стиракса А, В и С в ЛФ;3. Проведенавалидацияразработанныхметодиккачественногоиколичественного анализа ВСПЭС в процессе хранения в естественныхусловиях.Установленастабильностьразработанныхпленокповсемпоказателям исследованным качества, что позволило установить срок годности24 месяца в упаковке - буфлен.4.
Исследование специфической активности и биологической безвредностилекарственной формы на основе сапонинов Styrax officinalis L.в геле in vivo налабораторных животных (крысы) показало, что 1,5% гель сухого экстрактастиракса лекарственного проявляет спермицидную активность при местномприменении и не обладает местно-раздражающим действием.152ОБЩИЕ ВЫВОДЫ1. На основе сравнительного анализа данных литературы и результатов оценкибиологической активности тритерпеноидных сапонинов Styrax officinalis L.
insilico обоснована актуальность разработкиместного контрацептивногосредства;2. Методами оптической и СЭ микроскопии установлены диагностическиепризнаки в анатомическом строении нового вида сырья "Околоплодникистиракса лекарственного" и разработан проект НД на него по ряду показателей(внешние признаки, микроскопические признаки, определение основных группбиологически активных веществ, влажность, зола общая, зола не растворимая в10%раствореНСl,измельченность,коэффициентводопоглощения,количественное определение экстрактивных веществ и суммы сапонинов);3.
Разработана новая методика получения СЭСЛ из фракции частиц сырьяразмером 2,5-0,25 мм за 8-10 циклов экстракции метанолом (или 70% спиртом)в аппарате Сокслета в течение 6-7 часов с выходом 35% и количественнымсодержанием суммы сапонинов - 27%, установленной методом ЯМР− Н1;4. Разработаны состав ВСПЭС, содержащий 25 мг СЭСЛ на основе ПВС,карбопола 980, глицерина и технология их получения;5. Разработанаметодикаустановленияподлинностииколичественногоопределения сапонинов стиракса лекарственного с использованием ЯМР− Н1.6. Установлена стабильность ВСПЭС по показателям качества в течение 24месяцев в упаковке из буфлена;7. Установлена 99,96% фармацевтическая доступность комплекса сапонинов invitro, выявлено 90% контрацептивное действие и биологическая безвредностьВСПЭС на лабораторных животных in vivo.153ЗАКЛЮЧЕНИЕВ результате проведённых исследований дана фармакогностическая оценкасырья "околоплодники стиракса лекарственного", получен и стандартизовансухой экстракт околоплодников стиракса лекарственного и разработаны состав итехнология вагинальных спермицидных пленок с сухим экстрактом стираксалекарственного.
Подтверждена спермицидная активность ВСПЭС in vitro иконтрацептивное действие in vivo на лабораторных животных.Практические рекомендацииРезультаты диссертационного исследования могут быть внедрены вучебныйпроцессдлястудентовподисциплинам«Фармацевтическаятехнология», «Фармацевтическая химия», «Фармакология» и «Фармакогнозия».Можнопровестидополнительноеизучениеконтрацептивногодействияразработанных ВСПЭС для внедрения в качестве инновационного лекарственногосредства.Перспективы дальнейшей разработки темыВразвитиестандартизоватьнаучныхсырьеисследований"околоплодникицелесообразностираксаполностьюлекарственного",усовершенствовать методику очистки сапонинов при получении СЭСЛ, провестиполный комплекс фармацевтической разработки новых вагинальных ЛФ СЭСЛ ввиде крема, геля и пены.154ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙАФС – активная фармацевтическая субстанцияБАВ – биологически-активные веществаВЖИ–искусственная вагинальная жидкостьВЖС – вагинальная жидкость стимулятораВЛФ – вагинальные лекарственные формыВМС – внутриматочная спиральВОЗ –всемирная организация здоровья (WHO)ВПЧ –вирус папилломы человекаВР – вспомогательные работыВСПЭС – спермицидные вагинальные пленки с экстрактом околоплодниковстиракса лекарственногоВЭЖХ – высокоэффективная жидкостная хроматографияГОСТ– государственный отраслевой стандартГФ – государственная фармакопеяГХ – газовая хроматографияГХ-МС – газовая хроматография с масс-селективным детекторомДМСО – ДиметильсулфоксидККМ – критическая концентрация мицеллообразованияКМАФАнМ – Количество мезофильных аэробных и факультативно-анаэробныхмикроорганизмовКОЕ – Колониеобразующая единицаЛП – лекарственный препаратЛРС – лекарственное растительное сырьеЛФ – лекарственная формаМБЧ – микробиологическая чистотаМС – масс-спектрометрияМСГ – международный совет по гармонизацииМЦ – метилцеллюлозаНД – нормативный документ155ОФС – общая фармакопейная статьяОМ – оптический микроскопПАВ – Поверхностно-активное веществоПВС – поливиниловый спиртПГ – пропиленгликольПЭГ – полиэтиленгликольПЭМ – просвечивающая электронная микроскопияПМР – протонный магнитный резонансРАП–редкосшитые акриловые полимерыСВ – среда высвобожденияССС – сумма сапонинов стираксаСО PQS– стандартный образец (Purified Quillaia Saponin)СЭМ – сканирующая электронная микроскопия (сканирующий электронныймикроскоп)СЭСЛ – сухой экстракт стираксаТП – Технологический процессТСХ – тонкослойная хроматография.ТЭА – триэтаноламин.УЭЖХ-МСВР – ультра высокоэффективная эффективная жидкостнаяхроматография с масс-спектрометром высокого разрешенияУМО – упаковка, маркировка, отгрузкаУФ - СФМ – ультрафиолетовая спектрофотометрияФС – фармакопейная статьяЯМР – ядерно-магнитный резонансCaspase – Cysteine-aspartic acid proteasesEP – European Pharmacopoeia / Европейская фармакопеяICAM1 – Intercellular Adhesion Molecule 1NF–National Formulary/ Национальный формулярPASS– Prediction of Activity Spectra for SubstancesSAR–Structure–activity relationshipUSP– Фармакопея США /United States Pharmacopeia156Список используемой литературы1.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
