Диссертация (1141387), страница 20
Текст из файла (страница 20)
и их статистической обработки представленыв таблице 5.10.Таблица 5.10. – Математическая обработка результатов измерений и испытаниясходимости методикиПоказателиМассовое содержание сапониновстиракса в пленке,̅ -среднее массовое содержаниесапонинов стиракса в пленке, мгСтандартное отклонение SОтносительное стандартноеотклонение Sr%Приемлемость результатовмг%мг%мг%16,83,09№ образца xi2346,66,94 6,923,00 3,15 3,156,823,10,140,0656,853,111,94Sr% ≤ 5→ удовлетворяет требованиям142 ТочностьМетодика количественного определения сапонинов в пленке должнаобеспечивать требуемую точность оценки показателей.
Для определения точностиметодики готовили 5 параллельных образцов и проводили количественноеопределение сапонинов в 5 пленках на ЯМР- 1Н.Критерии приемлемости и их оценкиОтносительное стандартное отклонение (Sr%) при оценке точностисодержания сапонинов стиракса в пленке должно быть ≤ 5 % (α=0,05).Результаты определения количественного содержания сапонинов стиракса в5 параллельных образцах (5 пленок) и их статистической обработки представленыв таблице 5.11.Таблица 5.11. – Математическая обработка результатов измерений и испытанияточности методики№ образца xiПоказатели12345Массовое содержание сапониновстиракса в пленке,мг7,016,796,636,846,88%3,193,093,113,113,13̅ -среднее массовое содержаниесапонинов стиракса в пленке, мгмг6,83%3,12мг0,14%0,04Стандартное отклонение SОтносительное стандартноеотклонение Sr%1,21Приемлемость результатовSr% ≤ 5→ удовлетворяет требованиям ВоспроизводимостьДляопределениявоспроизводимостиметодикипроводилианализколичественного определения сапонинов стиракса из одного и того же образца надвух разных ЯМР-спектрометрах, «Jeol JNM-ECA 600» и «Jeol JNM-ECS 400».143Критерии приемлемости и их оценкиОтносительноестандартноеотклонение(Sr%)приоценкевоспроизводимости полученных результатов определения содержания сапониновстиракса в пленке должно быть ≤ 5 % (α=0,05).Результаты определения количественного содержания сапонинов стираксана двух разных ЯМР-спектрометрах и их статистической обработки представленыв таблице 5.12.Таблица 5.12.
– Математическая обработка результатов измерений и испытаниявоспроизводимости методикиЯМР-спектрометрМассовое содержание сапонинов стиракса впленке,̅ -среднее массовое содержание сапониновстиракса в сухом экстракте, %Стандартное отклонение Sмг%мгJeol JNM-ECS 4006,43,092,916,6%3,00мг0,28%0,13Относительное стандартное отклонение Sr%Приемлемость результатовJeol JNM-ECA 6006,84,29Sr% ≤ 5→ удовлетворяеттребованиямВышеуказанные тесты подтверждают достоверность данной методики дляколичественного определения сапонинов в пленке с помощью ЯМР-1Н.5.4. Анализ однородности содержания / дозирования:Согласно ГФ XIII изд. ОФС.1.4.2.0008.15 «Однородность дозирования»испытание на однородность дозирования выполняли согласно методике 1, так какмасса действующего вещества составляет 25 мг и его массовая доля - 1,1 %.Количественное определение содержания действующего вещества проводили поотдельности в каждой отобранной для испытания единице препарата или в частипрепарата (прямое определение содержания действующего вещества).144Подготовка проб проводилась, как описано выше, но для анализаиспользована половина пленки с содержанием 25 мг сухого экстракта (около7,075 мг суммы сапонина/ пленка и около 3,54 в каждом половине).В результате проведенного анализа установлено, что половина пленкисодержит 2,9 мг суммы (А) и (С) сапонина и 0,8 мг (В) сапонина, чтоэквивалентно 3,7 мг ~ 104,5 % содержанию сапонинов в половине пленки.
СпектрЯМР 1Н сапонинов стиракса в пленке представлен на рисунке 5.6.Рисунок 5.6. Спектр ЯМР 1Н сапонинов стиракса из половины пленкиРезультаты испытания 10 случайных образцов представлены в таблице 5.13.Таблица 5.13. – Результаты анализа однородности содержания в половине пленке(n=10, р=95%) (t0,95, 9 = 2,262).ОбразецсодержаниеБАВ в ½пленке %12389,289,4104,5̅92,8345695,1 93,67888,6 92,7 88,3SSr %4,875,25∆3.4991091,595,4̅ ± ∆92,83±3,49145Такимобразом,результаты,представленныевтаблице5.13.,свидетельствуют о соответствии однородности содержания БАВ в пленке.Согласно ГФ XIII - ОФС.
1.4.2.0009.15 "испытание однородности массыдозированных лекарственных форм" не применяют в случае, когда проводятиспытание на однородность дозирования.5.5. Микробиологическое исследование ВСПЭСИсследованиемикробиологическойчистотыпроведеносогласнотребованиям ГФ XIII, ОФС 1.2.4.0002.15 «Микробиологическая чистота»категории 2 (см. 2.2.9.). Результаты исследования представлены в таблице 5.14 .Таблица 5.14 . – Результаты изучения микробиологической чистоты ВСПЭСНазваниемикроорганизмовРекомендуемые(нормы) ГФ XIIIв 1 пленкеРезультаты испытаний:наличие и количествомикроорганизмовв 1 пленкесуммарноКМАФАнМ, грибки,дрожжи, плесеньНе более 100 КОЕМенее 10 КОЕSalmonella / ListeriamonocytogenesStaphylococcaceaeОтсутствуютОтсутствуютОтсутствуютОтсутствуютListeria monocytogenesОтсутствуютОтсутствуютE. coliОтсутствуютОтсутствуютКак видно из результатов, представленных в таблице 6.14, ВСПЭСсоответствуют требованиям Государственной Фармакопеи РФ XIII, ОФС1.2.4.0002.15.
Такие же результаты исследования микробиологической чистотыполучены и при хранении приготовленных ЛФ через 0, 6, 12, 18 и 24 мес.5.6. Установление срока годности - исследования стабильности:В соответствии с Международным советом по гармонизации (МСГ)(International Council for Harmonisation: ICH): Стабильность пленочных продуктовоценивают в течение 24 месяцев в условиях окружающей среды илипромежуточных условий (при температуре 25±5°C и влажности 60±2%).На каждой контрольной точке (после 6, 12, 18, 24 месяцев) были провереныцвет, запах, внешний вид, подлинность, рН, количественное содержание суммы146БАВ, микробиологическая чистота и масса содержимого упаковки.Дляустановлениясрокагодностипленкивупаковке(буфлен),исследовалась стабильность в процессе хранения.
Стабильность определялась попоказателями качества, установленным ранее и предложенным в проект НД наВСПЭС - (приложение № 6). Результаты изучения стабильности при хранениипредставлены в таблице 5.15.Таблица 5.15. – Результаты изучения стабильности ВСПЭС при хранении вбуфлене при температуре 25±5°C и влажности 60±2%.ПоказателикачестваСерия01-0615Описание02-061503-061501-0615Подлинность02-061503-0615Содержаниесапонинов01-061502-061503-0615Сроки хранения, месМетод и норма0612Пленка желтоватого цвета, соотв. соотв. соотв.размером 5×5 см, толщина –около 200 мкм, с гладкойсоотв.
соотв. соотв.поверхностью, безвоздушных включений,прозрачная, складывается, несоотв. соотв. соотв.липкая, без запаха.4) УФ:Наличие характерныхмаксимумов поглощенияпри 270±1 нм и 315±1 нм. соотв. соотв. соотв.5) ТСХв системе хлороформметанол-вода (6:3:1) (УФсвет, 245 нм/ детекторсоотв. соотв. соотв.раствор взвесидефибринированнойкрови). Нахроматограммеобнаруживаются зоныадсорбции белого цвета с соотв. соотв. соотв.Rf около (0,68((сапонины).6) ЯМР 1H спектр.ЯМР HОт 6,0 мг до 7,5 мг(2,7% - 3,4%)1824соотв.соотв.соотв.соотв.соотв.соотв.соотв.соотв.соотв.соотв.соотв.соотв.7,17,07,16,97,06,96,56,97,06,86,86,96,66,86,41147Масса однойпленки 25см2при хранении,гСодержаниевлаги %01-06150,230,230,230,230,220,200,210,210,200,2003-06150,220,220,230,210,2001-061513,313,513,214,113,616,517,117,315,917,414,814,414,114,716,2соотв.
соотв. соотв.соотв.соотв.02-061502-06150,22 ±0,0314,5±1,3603-0615МикробиологическаячистотарН в 20млрастворауксуснойкислоты (рН3,5)Времярастворения,секСуммарноКМАФАнМ, грибки,дрожжи, плесеньНеболее100КОЕSalmonella /Listeriamonocytogenesотсутствуютотсут.отсут.отсут.отсут.отсут.Staphylococcaceaeотсутствуютотсут.отсут.отсут.отсут.отсут.Listeriamonocytogenesотсутствуютотсут.отсут.отсут.отсут.отсут.E.coliотсутствуютотсут.отсут.отсут.отсут.отсут.4,64,64,54,64,54,34,34,34,34,203-06154,54,54,54,34,301061580817978798483858584757073807401-061502-061503-061501-061502-0615020615030615от 4,1 до 4,8От 60 до 120Как видно, из представленных данных в таблице 5.15., разработанныеВСПЭС соответствуют установленным требованиям по всем исследованнымпоказателям качества, что свидетельствует о их стабильности при хранении в148условиях комнатной температуры в упаковке из буфлена и позволяет уставитьсрок годности в течение 24 месяцев.
Мы продолжаем исследование стабильностидля возможности увеличения срока хранения до 3-х лет.5.7.Изучение контрацептивного действия ВСПЭС на основе СЭСЛв опыте in vivoКомплекспроведенныхисследованийпоразработкевагинальныхспермицидных пленок на основе сапонинов стиракса лекарственного и оценкебиологической активности in silico, in vitro предполагается завершить оценкойконтрацептивного действия in vivo.Для поведения эксперимента на лабораторных животных – крысах, дляудобства введения была приготовлена ЛФ с СЭСЛ – гель, соответствуетразработанным ВСПЭС (полупродукт Т.П.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
