Диссертация (1141376), страница 6
Текст из файла (страница 6)
Поэтому для оценки качества ЛП ИГВВ, произведенных поразличнымтехнологиям,стандартизованнуюнеобходимометодикуиспользоватьопределенияунифицированнуюантикомплементарныхсвойств,позволяющую определять достоверные значения АКА, необходимые дляпрогнозирования возможного возникновения нежелательных реакций, связанныхс проведением иммуноглобулинотерапии.Тем не менее, даже если сам технологический процесс выполняетсясовершенно правильно, другие параметры могут оказывать влияние на АКА.Другие загрязнения, не зависящие от технологического процесса, например,связанные с субстанцией (плазмы крови человека) и способом ее получения илинепредвиденные изменений условий технологического процесса могут повлиятьна результат АКА и привести к изменениям от серии к серии. Итак, слишкомрискованно полагаться только на контроль низкого содержания полимеров иагрегатов, образованных в кислых условиях [82].Таким образом, развитие системы контроля качества за реактивами иреагентами,являющимисякритическимипараметрамииисточникомвариабельности определения АКА, создание стабильной стандартизованной35методики определения АКА должно быть главным для испытания выпускаемыхсерий ЛП ИГВВ.1.5.
Анализ современного состояния проблемы стандартизациилекарственных препаратов иммуноглобулинов человека поантикомплементарной активностиСоздание и внедрение в практику ИЛП для активной и пассивнойпрофилактики инфекционных заболеваний поставили одной из основных задачразработку критериев для оценки их качества и, в первую очередь, разработкуметодов оценки их специфической безопасности. Выбор унифицированных,единых методов лабораторных испытаний ИЛП внутри страны, а также вмеждународном плане, является необходимым условием стандартизации широкоприменяемых профилактических и лечебных ИЛП [9, 39].ПрименениеСОпозволяетвыполнятьзадачиметрологическогообеспечения методик оценки качества ИЛП и оценивать сопоставимостьполученныхрезультатов,обеспечиваянеобходимуюточностьипрослеживаемость измерений [4, 8, 63].История развития фармацевтического анализа неразрывно связана свнедрением в его практику стандартных образцов [47].Согласно ФЗ N 61 «Об обращении лекарственных средств» от 12.04.2010 г.под стандартными образцами подразумевают вещества, посредством сравнения скоторыми осуществляется контроль качества исследуемых лекарственных средствс помощью физико-химических и биологических методов в целях подтверждениясоответствия лекарственных средств требованиям нормативной документации,установленным при осуществлении государственной регистрации, и которыеприменяютсядлякалибровкистандартныхобразцовпроизводителя36лекарственных средств, используемых для контроля качества и иных целей приобращении лекарственных средств [69].Методика определения АКА сопряжена с рядом критических параметров,связанных с использованием биологических реагентов, таких как, комплементморских свинок, эритроциты барана и гемолитическая сыворотка, вариабельностькоторых обуславливает необходимость использования СО, положительный иотрицательный контроли которого подтверждают достоверность получаемыхрезультатов в различных диапазонах значений АКА.СО для определения АКА ЛП ИГВВ, утвержденный Комитетом экспертовВОЗ по биологической стандартизации, отсутствует.
В настоящее времяразработано и аттестовано достаточно большое количество СО Европейской иБританской фармакопей. В международной практике для определения АКА ЛПИГВВ используют СО иммуноглобулина человека BRP, который является СО ЕФ,утвержден Европейским директоратом по качеству лекарственных средств издравоохранения [88, 123]. Данный СО также целесообразно использовать приразработке и аттестации национального (отечественного) СО.При производстве и оценке качества ИЛП необходимо применять СО,которые аттестованы либо по международным СО ВОЗ, либо в межлабораторныхиспытаниях, либо по специально разработанной процедуре как с использованиемСО Европейской или Британской фармакопей, так и без них [4, 141].До начала 1990-х годов производители ЛП ИГВВ использовали разныеметоды определения АКА.
Так у различных ЛП ИГВВ, производимых в мире,существенноразличаютсяпоказателиАКАимодификацииметодаеёопределения [52, 134]. В силу разнообразия используемых реагентов и единицизмерения эти модификации трудно сравнимы при отсутствии СО.Впервые монография на ЛП ИГВВ утверждена в составе ЕФ в 1994 г.(Human Normal Immunoglobulin for Intravenous Administration (918), ЕФ второгоиздания, 18 специальный выпуск), утвердившая нормативные требования по АКАна уровне не более 50 %, что соответствует не более 1 СН50/мг белка.37Методика определения АКА с помощью модифицированного Kabat и Mayer[84] классического метода связывания комплемента была принята ЕФ в качествестандартного унифицированного метода для определения АКА в 1994 году.Обязательным условием фармакопейной методики определения АКА являетсяиспользование СО в качестве отрицательного и положительного контроля, чтообеспечивает воспроизводимые условия испытания и позволяет получатьнадежныерезультаты.межлабораторныхТакимобразом,исследованийпов1995 г.разработкепослеипроведенныхаттестацииСОиммуноглобулина человека BRP серия 1 фармакопейная методика определенияАКАобреласвойanticomplementaryокончательныйactivityofвид(монографияimmunoglobulin,ЕФV.2.1.13второгоTestforиздания,19специальный выпуск) [116].Сравнительныйанализсовременныхтребованийпопоказателю«Антикомплементарная активность» и наличия методик его определения взарубежных фармакопеях [17, 81, 88, 100] позволил сделать вывод о том, чтоописанная в ЕФ методика определения АКА является общепризнанной вбольшинстве зарубежных фармакопей.Отечественные производители ЛП ИГВВ (6 наименований) в настоящеевремя используют методики определения АКА, описанные в Методическихрекомендациях 1988 г.
(2 наименования) [28] и Методических указаниях 2001 г.(4 наименования) [52], которые не предусматривают использование СО. Методика[28], введенная в действие в 1988 г., не позволяет оценить соответствие ЛПиммуноглобулинов человека современным международным требованиям, т.к.предусматриваетопределениеАКАкак«сохранениеактивности2 гемолитических единиц в присутствии 10 мг белка иммуноглобулина».Методика [52] является первым шагом на пути к гармонизации отечественныхстандартов качества на ЛП ИГВВ с международными. В тоже время, в отличие отметодикизарубежныхфармакопей,даннаяметодика[52]предполагаетиспользование барбитала и его натриевой соли в составе буферного раствора,сухого (коммерческого) комплемента морских свинок (ТУ 9398-016-14237183-382007), рассчитана на больший объем реакционной смеси (общий объем последобавления сенсибилизированных эритроцитов составляет 7,5 мл – «макрометод», вместо 1,5 мл, используемых в методике зарубежных фармакопей [17, 88,100]), а также не предусматривает расчет АКА в процентах.
ПолучениедостоверныхзначенийстандартизованныхАКАусловиях.достигаетсяпроведениемИспользованиеисследованийпроизводителямивуказанныхметодик определения АКА [28, 52] значительно снижает конкурентныепреимущества отечественных ЛП ИГВВ относительно их зарубежных аналоговпо критерию оценки «эффективность/безопасность» [39].В производстве большинства зарубежных ЛП ИГВВ для стандартизацииметодов контроля готового ЛП применяются непосредственно международныеСО. Однако, ВОЗ обращает внимание на то, что ни один международный стандарти реагент не существует в количестве, достаточном для рутинного лабораторногоконтроля.ВОЗнастоятельнорекомендуетиспользоватьмеждународныестандартные образцы для установления значений аттестованных метрологическиххарактеристик СО для каждой конкретной страны (национальные СО) [142].Анализданныхнаучнойлитературысвидетельствуетотом,чтонормативная документация по производству и оценке качества всех зарубежныхЛП ИГВВ, зарегистрированных и разрешенных к медицинскому применению натерриторииРФ,предусматривает проведение испытанийпопоказателю«Антикомплементарная активность» с использованием СО иммуноглобулиначеловека BRP или СО фирмы [38, 53].
В то время как в нормативных документахотечественных производителей ЛП ИГВВ такие требования отсутствуют.Опыт использования СО в методике определения АКА по ЕФ насчитываетболее 20 лет, а именно:– СО иммуноглобулина человека BRP серия 1, утвержден в 1994 г. ипредназначен для определения молекулярных параметров, АКА и Fc-функциииммуноглобулина. Аттестованные значения для отрицательного контроля: 535 %, для положительного контроля: 50-100 % [120].39– СО иммуноглобулина человека BRP серия 2, утвержден в 2001 г. ипредназначен для определения АКА, молекулярных параметров и Fc-функциииммуноглобулина.
Аттестованные значения для отрицательного контроля: 1030 %, для положительного контроля: 50-100 % [121].– СО иммуноглобулина человека BRP серия 3, утвержден в 2005 г. ипредназначендляАттестованныеопределениязначениядляFc-функциииммуноглобулинаотрицательногоконтроля:иАКА.10-40 %,дляположительного контроля: 60-100 % [122].– СО иммуноглобулина человека (АКА и молекулярные параметры) BRPсерия 1, утвержден в 2011 г. и актуален в настоящее время, используется приопределении АКА и молекулярных параметров.
Аттестованные значения дляотрицательного контроля: 10-40 %, для положительного контроля: 60-100 % [123].ПередиспользованиемСОиммуноглобулиначеловека(АКАимолекулярные параметры) BRP серия 1 его растворяют в заданном объеме(105,4 мл) воды очищенной. В результате получают раствор с содержаниемиммуноглобулина примерно 50 мг/мл, при этом возникает необходимостьподтверждения содержания белка в полученном растворе.
Отрицательный иположительный контроли формируются путем изменения количества исходногораствора СО иммуноглобулина человека: 0,2 и 0,6 мл для отрицательного иположительногоконтролей,соответственно.СОхарактеризуетсянестабильностью аттестованных характеристик, подтверждаемой значительнымкоэффициентомвариации:дляотрицательногоконтроля–33 %,дляположительного контроля – 15 % [123].
Его использование не может бытьрациональным, т. к. при растворении лиофилизированной массы получают более105 мл раствора с ограниченным сроком хранения (не более 14 суток), а егорасход на одно исследование не превышает 0,8 мл.40ВЫВОДЫ ИЗ ОБЗОРА ЛИТЕРАТУРЫ1. Проведенный анализ свидетельствует о том, что ЛП ИГВВ занимаютодну из ключевых позиций среди всего перечня ИЛП, и являются драйвером нафармацевтическом рынке в переработке плазмы для фракционирования. Данноеобстоятельство вызвано увеличением показаний к применению, а такжевозрастающим спросом на ЛП ИГВВ в развивающихся странах.2. Иммуноглобулинотерапия сопряжена с рядом нежелательных реакций,одной из которых является спонтанная неспецифическая активация системыкомплемента.
Имеются весьма противоречивые данные относительно механизмовразвития указанной нежелательной реакции. Показателем качества, позволяющимпрогнозировать результат клинического применения ЛП ИГВВ, является«Антикомплементарная активность». Определение АКА ЛП иммуноглобулиновостается одним из обязательных параметров в фармацевтическом контролекачества ЛП ИГВВ.3. Методика определения АКА сопряжена с рядом критических параметров,связанных с использованием биологических реагентов, таких как, комплементморских свинок, эритроциты барана и гемолитическая сыворотка, вариабельностькоторых обуславливает необходимость использования СО, положительный иотрицательный контроли которого подтверждают достоверность получаемыхрезультатов в различных диапазонах значений АКА.4. Проведенный анализ современного состояния проблемы стандартизацииЛП иммуноглобулинов человека по АКА выявил необходимость оптимизации истандартизации отечественной методики определения АКА, что позволитполучатьдостоверныеинадежныезначенияАКА,необходимыедляпрогнозирования безопасности их клинического применения.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
