Диссертация (1141249), страница 17
Текст из файла (страница 17)
Подобраны условия и разработаны методики качественного иколичественного определения сапонинов в траве звездчатки средней.Идентификация сапонинов проведена методом ТСХ на пластинках«Сорбфил» в системе растворителей: н-бутанол – уксусная кислоталедяная – вода (5:1:4). Зоны адсорбции выявляли 10 % раствором сернойкислоты в 40 % этаноле. Количественное определение основано нареакции сапонинов с кислотой серной концентрированной и измерении124оптической плотности с помощью спектрофотометра при длине волны 325+ 3 нм. Установлено количественное содержание сапонинов от 3,75 до6,08 %.ГЛАВА6.РАЗРАБОТКАТЕХНОЛОГИИСТАНДАРТИЗАЦИИИМЕТОДИКГОМЕОПАТИЧЕСКИХМАТРИЧНЫХ НАСТОЕК ИЗ ТРАВЫ ЗВЕЗДЧАТКИСРЕДНЕЙ6.1. Разработка технологии гомеопатических матричныхнастоек.Сырье и настойка гомеопатическая матричная из травы звездчаткисредней описаны в Фармакопее США.
Звездчатка средняя входит вперечень гомеопатических препаратов, разрешенных к применению вРоссии в соответствии с приказом Минмедпрома России от 29.11.1995 г.№ 335.В нашей стране отсутствует нормативная документация на сырьезвездчатки средней для гомеопатических препаратов. Сырьем дляполучения гомеопатических препаратов служит как свежая, так ивысушенная трава звездчатки средней.В связи с этим перед разработкой технологии приготовлениягомеопатической матричной настойки, нами была создана фармакопейнаястатья на свежее сырье – траву звездчатки средней.Настойку гомеопатическую матричную готовили из свежей травызвездчаткисредней,собраннойвовремяполногоцветениясоответствующей требованиям разработанной ФС на свежее сырье.6.1.1.
Настойка гомеопатическая матричная из свежего сырья.и125Настойку гомеопатическую готовили путем мацерации по методу 2аОФС 42-0027-05 «Настойки гомеопатические матричные с использованием86 % этанола (по массе), так как влажность сырья более 80 %, сырье несодержит эфирных масел, смол и слизи.В лекарственном растительном сырье определяют влажность. Сырьетщательно измельчают. Измельченную растительную массу взвешивают инемедленно заливают не менее, чем половинным от массы растительногосырья количеством 86 % (по массе) этиловым спиртом, перемешивают иоставляют в плотно закрытом сосуде при температуре не выше 200 С.По формуле рассчитывают необходимое для растительной массыколичество спирта этилового 86 % (по массе) в килограммах:Е2 = m x W100m – масса растительного сырья в кг;W – влажность сырья, %;.От рассчитанного количества спирта (Е2 ) вычитают ранееприбавленного спирта и остаток спирта смешивают с полученной массой.Массу оставляют не менее чем на 10 суток при температуре не выше 200 С,при периодическом встряхивании.
Затем массу отжимают и через суткифильтруют.Пример: Влажность сырья звездчатки средней 80,27 %. Берутнавеску свежего сырья 25 г; сырье тщательно измельчают; берут навеску20 г – 0,020 кг измельченного сырья; немедленно заливают 10 г 86 %спирта этилового; помещают в плотно закрывающийся сосуд притемпературе не выше 200 С.Е2 = 0,020 х 80,27 0,0161 кг х 1000 = 16,1 г10012616,1 г – 10 г = 6,1 г6,1 г отвешивают 86 % (по массе) спирта этилового и добавляют взаранее приготовленную массу сырья, перемешивают.
Массу оставляют на10 суток при температуре не выше 200 С при периодическом встряхивании.Через 10 суток массу отжимают и через сутки фильтруют.6.1.2. Настойка матричная гомеопатическая из высушенногосырья.Настойку гомеопатическую матричную готовили из высушенногосырья, соответствующего нормативной документации, разработаннойнами.Настойкугомеопатическуюматричнуюготовилиметодомперколяции по методу 4а ОФС 42-0027-05 с использованием спиртаэтилового 62 % (по массе) или 70 % спирта этилового (по объему) 1 : 10.Одну часть высушенного измельченного сырья заливают 5 частями62 % (по массе) спирта этилового и настаивают в течение 2 суток причастом взбалтывании.
Подготовленное сырье плотно укладывают вперколятор. Затем при открытом кране заливают такое количество спиртатой же концентрации, чтобы его слой над поверхностью сырья составлял1-3 см. Вытекающую из крана жидкость наливают обратно в перколятор.После этого перколят с определенной скоростью (30 – 35 капель/мин)выпускают из крана, непрерывно доливая в перколятор такое количествоспирта этилового, чтобы на 1 часть сырья приходилось 10 частей спирта. Анад сырьем был постоянный слой спирта этилового 1-3 см. Процессперколяции продолжают до получения 10 частей извлечения. Затемизвлечение отстаивают в течение 8 суток, фильтруют, взвешиваютфильтрат и определяют в нем содержание сухого остатка, плотность иколичественное содержание действующих веществ.127Пример. Приготовление гомеопатической матричной настойки извысушенного сырья.10 г высушенного измельченного сырья заливают 50 мл 62 % (помассе) спирта этилового и настаивают в течение 2 суток при частомвзбалтывании.
Подготовленное сырье плотно укладывают в перколятор,затем при открытом кране добавляют такое количество 62 % ( по массе)спирта этилового, чтобы слой его над поверхностью сырья составлял 1-3см. Вытекшую из крана жидкость выливают обратно в перколятор. Послеэтого перколят со скоростью 30-35 кап/мин выпускают из крана,непрерывно доливая в перколятор такое количество спирта 62 % (помассе), чтобы над сырьем был его постоянный слой и чтобы получить100 г настойки. Извлечение (настойку) оставляют на 8 суток, фильтруют,взвешивают фильтрат и проводят стандартизацию гомеопатическойматричной настойки.6.2. Стандартизация гомеопатических матричных настоек изсвежей и высушенной травы звездчатки средней.Анализ проводили по нормативной документации, разработаннойнами.Определяли следующие показатели: «описание», «подлинность»,«сухой остаток», «плотность», «тяжелые металлы», «микробиологическаячистота», «количественное определение», «хранение», «срок годности».Определение подлинности настойки гомеопатической матричнойпроводили методом тонкослойной хроматографии.
В качестве подвижнойфазы использовали смесь: н-бутанол – кислота ледяная уксусная – вода(50:10:40); в качестве неподвижной фазы – готовые хроматографическиепластинки со слоем силикагеля типа «Сорбфил». В качестве сравнения –128раствор эсцина. Обнаружение зон на хроматограмме осуществляли 10 %раствором кислоты серной в 40 % этаноле.Определениесодержаниятяжелыхметалловпроводиливсоответствии с требованиями ГФ ХII, ч. 1, с.
121, ОФС 42-0059-07.Сухой остаток определяли в соответствии с требованиями ГФ ХI,ч. 2, с. 149. Определение плотности осуществляли в соответствии стребованиями ГФ ХII, ч. 1, с. 38, ОФС 42-0037-07.Определениемикробиологическойчистотыпроводиливсоответствии с требованиями ГФ ХII, ч. 1, с. 160, ОФС 42-0067-07.Для количественного определения сапонинов использовали методспектрофотоколориметрии. Метод основан на свойстве сапонинов - даватьокрашивание с кислотой серной концентрированной.В качестве стандарта был выбран эсцин, спектр поглощениякоторого с кислотой серной концентрированной совпадает со спектромпоглощения настойки в указанных условиях и находится при длине волны325 + 3 нмСпектры поглощения эсцина и настойки с кислотой сернойконцентрированной.12921Рис.
26. 1 – 0,015 % раствор эсцина2 – спектр поглощения настойкигомеопатической матричнойДляустановленияточностиивоспроизводимостиметодикиопределения сапонинов в настойке гомеопатической из травы звездчаткисредней была проанализирована настойка и проведена статистическаяобработка результатов. Результаты представлены в табл. 16.Таблица 16.Метрологические характеристики методики количественногоопределения сапонинов в настойке гомеопатической матричной из свежейтравы звездчатки средней.fХ¯, гS х¯Р, %Т (p,f)∆x¯А±%90,2410,0043952,260,0096± 3,95Из табл. 16 следует, что ошибка единичного определения придоверительной вероятности 0,95 не превышает + 4,0 %.130Отсутствие систематической ошибки доказано методом добавокэсцина в табл. 17Таблица 17Определение содержания сапонинов в настойке гомеопатическойматричной из свежей травы звездчатки с использованием метода добавокэсцина.Добавленоэсцина1Найденосапониновг/100млнастойки0,32823Nп/пНайден всуммефлавоноидовирутина0,417Относительнаяошибка0,082Должно быть всумме эсцина исапонинов,г/100млнастойки0,4100,2810,1410,4220,415- 1,660,2410,1810,4220,430+ 1,89Послевалидациибылапроведенастандартизация+ 1,71настоекгомеопатических матричных.Плотность и сухой остаток настоек гомеопатических матричных изсвежей травы звездчатки проводили по методикам ГФ ХI издания.Результаты представлены в табл.
18.Таблица 18.Результаты анализа гомеопатических матричных настоек из свежегосырья.№Показатели качестваобразца ПлотностьСухой остатокСодержаниесапонинов,%10,94892,170,32820,94881,430,35230,94631,280,281Раздел «Хранение» представлен в соответствии с требованиямисовременной нормативной документации. Срок годности настойки131гомеопатическойматричнойпредложеннаоснованиирезультатовизучения стабильности при хранении.Таблица 19Результаты анализа настойки гомеопатической матричной из свежейтравы звездчатки средней№образца123123123Наименование Исходныепоказателей иданныенорма попроекту ФССодержание0,328сапонинов не0,352менее 0,25 %0,281Сухой остаток2,17не менее 1,2 %1,431,28Плотность от0,94890,9463 до0,94880,94890,9463Срок хранения в годах11,522,50,3250,3530,2802,151,451,250,94850,94860,94630,3270,3510,2802,151,441,250,94850,94850,94620,3260,3500,2822,171,411,260,94860,94860,94640,3250,3500,2812,161,401,200,94870,94870,9463Примечание: 1).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
