Диссертация (1141076), страница 11
Текст из файла (страница 11)
Учитывая тот факт, что при данной патологии основныеизменения вне опухолевого узла морфологически сводятся к атрофииструктурно-функциональных элементов нефрона и склерозу интерстиция, тоспектроскопические характеристики этих участков не имели специфическихособенностей и были схожи со стромальным компонентом опухолевого узла.Неизмененные, условно говоря «здоровые» участки почечной ткани, приспектроскопическом исследовании были идентичны спектрам образцовгруппыконтроля,т.е.характеризовалисьналичиемдвухлокальныхмаксимумов флуоресценции при высоких значениях их интенсивности (выше36 тыс.
отн. ед.).В ходе нашего исследования были выявлены дополнительныевозможностидиагностическогоспектроскопии.Метод,методаобладаявысокойраман-флоуресцентнойчувствительностьюиспецифичностью в обнаружении рака почки, позволяет диагностировать нетолько его гистологический тип, нодифференцировки.оказалосьСвозможнымпомощьюего разновидности, и даже степеньраман-флуоресцентнойопределитькакспектроскопииспецифическиепризнакипаренхиматозного компонента опухоли, так и неспецифические особенностиприсущие строме опухолевого узла, а также вторичные изменения, что такжеповышает диагностическую ценность применяемого метода. Кроме того, сего помощью стало возможным определить биохимические изменения,происходящие при изучаемой патологии и оценить их роль и значение впатогенезе рака почки.
К несомненным преимуществам методатакжеотносится возможность получить результаты в режиме реального времени втечении нескольких минут, что оценивает перспективы для последующего егоприменения в интраоперационной диагностике рака почки, особенно с целью80исключения, так называемых «положительных» краев резекции образования.Учитывая, что гистологическая классификация опухолей почек в настоящеевремя включает более 50 вариантов, в том числе редкие наследственныеформы, спектральные характеристики большинства из которых еще ненакоплены, морфологическое исследование по-прежнему остается ключевымдля установления окончательного диагноза.При сравнении полученных нами данных с результатами работ вуронефрологии известных зарубежных авторов, было выявлено совпадениепо целому ряду позиций.
Так, в работе Mert S. et al (2015) представленодостаточно подробное описание полученных рамановских пиков присветлоклеточномвариантепочечно-клеточногоракавсравненииснеизмененной паренхимой почки [90]. Основные биохимические сдвигибыли выявлены в изменении концентрации и соотношения аминокислот,липидов и некоторых белков, при этом, как и в нашем исследовании, былоустановлено, что концентрация молекул фенилаланина выше в опухоляхвысоких степеней дифференцировки. Однако упоминаемоебыловыполненоиспользованиемспомощьюсеребряныхтолькорамановскогоподложек,исследованиеспектроскопаусиливающихсрамановскогорассеяние образца.
Кроме того, в работе отсутствовало подробнаяморфологическая характеристика образований.В работе JP Couapel et al. (2013), описаны результаты применения методарамановскойспектроскопиидлядиагностикисветлоклеточного,хромофобного и папиллярного вариантов почечно-клеточного рака. Авторыотмечают высокуюприводятвработеэффективность метода (96%), но, к сожалению, неописанияспектральныххарактеристиккаждойисследуемой опухоли [61].Использованиерамановскойспектроскопиипозволиловыявитьеевозможность идентифицировать с помощью регистрируемых спектровобласти реализации вторичных изменений и участки склероза в исследуемой81ткани, независимо от того является она измененной опухолью или нет. Врезультате построения аналитической модели с помощью метода проекций налатентные структуры с последующим дискриминантным анализом (PLS-DA)осуществлено разделение раман-флуоресцентных спектров образцов группконтроля и рака почки на категории «рак» и «норма». Точность разделениясоставила 92%, при этом чувствительность и специфичность методасоставили 87,5% и 100%, соответственно.
Наслоение некоторых спектровконтрольной группы на категорию опухолевых, по-видимому, связано собщностью конфигурации спектров, полученных в результате воздействиялазерного луча на участки интерстиция или сосудистых стенок, которые втом и другом случае имеют единые структурные компоненты.Высокоеразрешениефлуоресцентнойиспектроскопиичувствительностьпозволяютметодаосуществитьраманбыструюидентификацию и анализ состава опухолевых и неизмененных тканей почек.Включаявсебяпреимуществаифлуоресценции(распознаваниеестественных флуорофоров), и рамановского рассеяния (идентификацияспецифических молекул, веществ и их соединений), раман-флуоресцентнаяспектроскопия при отсутствии противопоказаний к применению, даетвозможность исследовать даже небольшие объемы материала в твердом,жидком и даже газообразном состоянии в сжатые сроки.
Все это предполагаетперспективу использования данного метода не только в лабораторныхусловиях, но и на до-и интраоперационном этапах диагностики.82ВЫВОДЫ1.Раман-флуоресцентнаяметодомдиагностикиспектроскопияявляетсяэффективнымрака,позволяющимпочечноклеточногоидентифицировать как опухоль, таки неизмененную ткань почки сточностьюприразделениядо95,3%,этомчувствительностьиспецифичность метода составляют 89,2% и 100%, соответственно, открываяперспективу его использования не только в лабораторных условиях, но и надо- и интраоперационном этапах диагностики.2.Наоснованиифлуоресцентнойсравнительногоспектроскопиисанализарезультатамиданныхраман-патоморфологическогоисследования были выделены специфические «оптические маркеры» ипоказатели для самых частых вариантов почечноклеточного рака: начальная(инициальная) флуоресценция, локальные максимумы флуоресценции, пикирамановского рассеяния и значения остаточной флуоресценции.3.При светлоклеточном варианте рака почки специфические«оптические маркеры» выявляли в виде набора пиков рамановскогорассеяния в точках 1003см-1 (фенилаланин), 1157см-1 (метионин), 1517см-1 и2965 см-1 (различные модификации бета-каротина), что свидетельствует оповышении концентраций данных веществ по сравнению с группой контроляи специфических изменениях клеточного метаболизма в опухоли.4.Папиллярный вариант почечноклеточного рака в зависимости отморфологического варианта характеризуется различной конфигурациейспектров.
Для папиллярного рака 1 типа характерно максимальное значениеинтенсивности флуоресценции в точке 1510+17,34 см-1 ирамановскихпиков.Папиллярныйрак2-готипаотсутствиеобладаетпикамирамановского рассеяния в точках 582 см-1 (гидроксильный радикал) , 1100 см1(жирные кислоты) , 2873 см-1 (СН-связь липидов и белков), а также83одиночным локальным максимумом в точке 2200+25,21 см-1.5.Хромофобный вариант почечно-клеточного рака (классический тип)характеризуется множеством локальных максимумов в точках 1200+11,32 см1,2130+17,24см-1,3125+49,74см-1,иневысокойинтенсивностьюфлуоресценции (7-10 тыс.
отн.ед.). Эозинофильный его тип отличетсязначениями локальных максимумов флуоресценции (1920+21,52см-1 и3460+31,87 см-1) и значительной интенсивностью его флуоресценции (10-15тыс. отн.ед.).6.Спектральные характеристики могут изменяться в зависимостиот степени дифференцировки опухоли и точки измерения.Опухоли снеоднородным строением и наличием в них вторичных изменений,характеризуются несколькими видами спектров, отражающими как ихспецифический (паренхиматозный) и мезенхимальный компоненты, таквторичные изменения (некроз, кровоизлияния). Высота пиков рамановскогорассеяния находится в прямой пропорциональной зависимости от степенидифференцировки опухоли.7.Учитывая неоднородность строения опухолевого узла, имея ввиду сочетание паренхиматозной и стромальной составляющих, а такжечастых вторичных изменений, с целью исключения ложноположительных иложноотрицательныхзаключенийнеобходимымусловиемадекватнойдиагностики рака почки является анализ спектральных характеристик,полученных из разных участков опухолевого узла.ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИПациентам с подозрением на почечноклеточный рак, рекомендуетсяпроводить диагностический поиск во время проведения биопсии илиоперационного вмешательства с использованием портативного раманфлуоресцентного спектроскопа, сопряженного с портативным компьютером сцелью ориентировочногоопределения морфологической разновидностиопухоли, а также максимально точно определить края резекции.84.СПИСОК СОКРАЩЕНИЙПКР – почечно-клеточный ракУЗИ – ультразвуковое исследованиеКТ – компьютерная томограммаМРТ – магнитно-резонансная томографияОтн.ед.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
