Диссертация (1141026), страница 13
Текст из файла (страница 13)
Еще позже появятсяклинические симптомы органной недостаточности. При этом более ранниебиохимические и более поздние клинические признаки отражают ужеощутимую функциональную неполноценность органа, тогда как изменения состороныАТотражаютпатологическуюинтенсификациюпроцессовотмирания специализированных клеток органа или субклеточных структур,являющуюся самым первым этапом в формировании болезни, намногоопережающим появление любых признаков органной недостаточности.Нормализация показателей теста отмечается обычно при затухании острогопроцесса (например, через 2-4 недели после адекватного лечения).2.4.
Методы статистической обработки данныхДля количественных данных рассчитывались средние значения иошибка средней (М±m) и/или медиана и квартили - для порядковых данныхрассчитывалисьмедианаиквартили.Описательнаяхарактеристикапорядковых и количественных данных, распределения которых отличались отнормальных, приведена с использованием медиан, нижних и верхнихквартилей.Предварительный анализ вида распределения данных проводили спомощью построения гистограмм распределения признака и сравнения их скривой нормального распределения. Для подтверждения вида распределенияиспользовали критерии Лиллиефорса и Шапиро-Уилка.Частьисследуемыхпоказателейприусловииихнормальногораспределения сравнивали со значениями соответствующих показателей впопуляции.
При этом с помощью 95% доверительного интервала для среднегозначения и метода проверки гипотез с использованием t-критерия Стьюдента73определяли достоверность различий с показателями в популяции. Результатыпредставляли, как среднее и стандартное отклонение [54].При сравнении относительных частот признака в двух группах икоэффициентов корреляций производили проверку гипотез об их равенстве спомощью двустороннего критерия статистической значимости [54].Распределение пациентовв соответствиисозначениямидвухкачественных признаков оценивали с помощью таблиц сопряженности. Длясопоставления групп по качественному признаку использовали критерий хиквадрат (метод максимального правдоподобия) [54].Посколькунормальногочастьполученныхраспределения,данныхстатистическуюнеподчиняласьобработкузаконупроводилиспомощью непараметрических методов. Оценку межгрупповых различий вдвух независимых группах проводили с помощью критерия Манна-Уитни, атакже медианный критерий для независимых выборок.
При сравнениинескольких независимых групп применяли метод Краскела-Уоллиса. Длясравнения малых выборок применяли точный критерий Фишера. Силу инаправление корреляции между различными показателями определяли спомощью коэффициента ранговой корреляции Спирмена [54].Длительностьпериодаремиссиидонаступленияобостренияатопического дерматита оценивали по методу Каплана-Майера.
Оценкудостоверности различий между группами проводили с использованиемлогрангового критерия, критерия Бреслоу и критерия Тарона-Уэра [54].Определениесвязимеждупараметрамиосуществлялосьсиспользованием коэффициента корреляции Пирсона. Различие показателейсчиталось достоверно значимым при величине р<0,05.Вычисления проводили с использованием программно-аналитическогокомплекса SPSS.742.5. Методы леченияЛечение пациентов с АД проводилось в соответствии с «Федеральнымиклиническими рекомендациями по ведению пациентов с атопическимдерматитом» (2015) [44], предусматривающими ступенчатость терапии:каждая ступень соответствует тяжести протекания заболевания и являетсядополнением к следующей. Всем пациентам предписывалось соблюдениегипоаллергенной диеты и применение эмолиентов (в период обострения АД ивне него).
В период обострения кожного процесса пациентам с легкимтечением АД назначали топические глюкокортикостероиды и/или блокаторыкальциневрина: метилпреднизолона ацепонат, бетаметазона дипропионат,мометазона фуроат, гидрокортизона бутират, такролимус и пимекролимус –по утвержденным схемам. Пациентам со среднетяжелым течением АДдополнительно(клемастинаназначалипероральныегидрофумарат,дигидрохлорид,дезлоратадинантигистаминныехлоропирамина–вгидрохлорид,препаратыцетиризинасреднетерапевтическихдозах)иузкополосную средневолновую ультрафиолетовую терапию (УФ-терапиюполучали 11 человек со среднетяжелым течением АД в основной группе и 19человек в группе сравнения. Продолжительность курса лечения составляла 21день.Дополнительноразъяснялисьипациентампредписывалисьвосновнойгруппеисследованияактивныеперсонализированнныепрофилактические мероприятия по строгому ограничению контакта сэкзогенными ксенобиотиками, а также назначалось энтеросорбирующеесредство с детоксикационным и пребиотическим действием, содержащеелигнин гидролизный (полифан) и лактулозу [66] («Лактофильтрум»производства ПАО «АВВА РУС», г.
Киров, РФ) по 1 таб. 2 раза в день, втечение 3-х недель.Контроль эффективности лечения (скорость регресса жалоб иклинических проявлений) проводился 1 раз в неделю, на 7, 14 и 21 день от75начала лечения. Стабильность достигнутой ремиссии оценивалась по фактуотсутствияиликрайненезначительнойвыраженностиклиническихпроявления АД через 1, 3, 6, 9, 12 и 18 месяцев от начала лечения.Пациентам в основной группе при обнаружении полиморфныхвариантовгеновGSTM1,GSTT1,GSTP1рекомендовалисьстрогиеперсонализированные профилактические мероприятия по ограничениюконтакта с экзогенными ксенобиотиками. При выявлении у пациентов с АДполиморфизма GSTM0/0, который с большой вероятностью снижает ворганизме детоксикацию бензопирена и стирен-7,8-оксида, рекомендовалосьвыбирать место жительства в так называемых спальных районах; установитьв квартире систему принудительного приточноговентилирования сфильтрацией воздуха; максимально сократить время пребывания на городскихулицах и вблизи крупных автомобильных трасс; при экстремальномзагрязнении воздуха промышленным смогом или при аномальной жаре носить на открытом воздухе респираторы или прикрывать рот и нос влажнойтканевой маской; пользоваться только гипоаллергенной косметикой; неупотреблять в пищу жареные и копченые блюда, а также продукты снарушенной герметичностью упаковки; в повседневном меню отдаватьпредпочтение так называемым органическим продуктам, выращенным безприменения химических удобрений.
При выявлении у пациентов с АДполиморфизмаGSTT0/0,приводящегокдефектубиотрансформацииметилбромида, метиленхлорида и этиленоксида рекомендовалось избегатьконтакт с моющими средствами, инсектицидами, лакокрасочными изделиями,растворителями, а также исключить употребление растворимого кофе, каши,супов быстрого приготовления и др. сублимированных продуктов. Приобнаружении у пациентов с АД полиморфизма GSTРVal/Val, повышающегочувствительность к продукту метаболизма парацетамолаN-ацетил-p-бензохинону, а также к никотину и другим компонентам табачного дыма,настоятельно рекомендовалось отказаться от приема лекарственных средств,76содержащих парацетамол, а также исключение табакокурения, в том числе,пассивного.77ГЛАВА 3.РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ3.1. Результаты молекулярно-генетического исследованияИсследования генотипирования GSTM1, GSTT1 и GSTP1 проводились у52 пациентов основной группы с легким и среднетяжелым течением АД, ввозрасте от 15 до 44 лет, 28 женщин и 24 мужчин.
Исследование проводилосьоднократно, после распределения по группам, до начала лечения. Дляпроведения исследования в условиях процедурного кабинета осуществлялсязабор 2 мл венозной крови в стандартную стеклянную пробирку. В качествеантикоагулянта в пробирку добавлялся 200 мкл 2% раствора динатриевой солиэтилендиаминотетрауксусной кислоты (ЭДТА), затем кровь помещалась в пробиркитипа «эппендорф» и до транспортировки в лабораторию хранилась в морозильнойкамере при температуре -20оС.Молекулярно-генетическое тестирование генов GSTM1, GSTT1 и GSTP1проводили на базе лаборатории эпигенетики ФГБНУ «Медико-генетическийцентр» (зав. лабораторией - проф.
В.В. Стрельников) по протоколамлаборатории.По результатам генотипирования все обследованные пациенты былиразделены на подгруппы с учетом имеющихся полиморфизмов в генах GSTM1,GSTT1 и GSTP:1 подгруппа - «сочетание трех полиморфных вариантов» - включала 10пациентов (4 - легкое течение; 6 - среднетяжелое течение), имеющих дваполиморфизма GSTT0/0, GSTM0/0, а также GSTPVal/Val или GSTT0/0,GSTM0/0 и GSTPIle/Val - т.е., полиморфизмы, снижающие экспрессию во всехтрех генах GSTМ1, GSTТ1 и GSTP1;2 подгруппа - «один полиморфный вариант» - включала 24 пациента (11легкое течение; 13 - среднетяжелое течение) с наборами полиморфизмов:GSTT0/0 или GSTM0/0 или GSTPVal/Val - т.е., имеющих один нулевой генотиппо GSTT0/0 или GSTM0/0, или GSTPVal /Val в гомозиготном состоянии.78Каждый из генотипов в таком состоянии снижает экспрессию гена, но вменьшей степени, чем их сочетание;3 подгруппа - «полиморфная замена в гетерозиготном состоянии» - 12пациентов (7 - легкое течение; 5 - среднетяжелое течение) с полиморфизмомGSTPIle/Val, при GSTT1/1 и GSTM1/1 - без нулевых полиморфизмов GSTT1/1и GSTM1/1, замена в GSTP Ile/Val у них определялась только в гетерозиготномсостоянии; при таких полиморфных вариантах функция GSTМ1 и GSTТ1 неизменяется, а экспрессия GSTP снижается незначительно и частичносохраняется за счет второго аллеля без замены;4 подгруппа - «без полиморфных вариантов» - 6 пациентов (1 - легкоетечение; 5 - среднетяжелое течение) без полиморфных вариантов геновGSTT1/1, GSTM1/1, GSTPIle/Ile.Такое разделение по подгруппам обусловлено представлением о том,что сочетание нескольких полиморфных вариантов в генах GST приводят кболее значительному снижению их функции в детоксикации ксенобиотиков.Известно, что система глутатион-трансфераз также является важнойантиоксидантной системой, которая препятствует образованию и накоплениюворганизмеактивныхформкислорода.Глутатион-опосредованнаядетоксикация играет ключевую роль в обеспечении резистентности клеток кперекисному окислению липидов, свободным радикалам, алкилированиюбелков и в предотвращении повреждений ДНК.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
