Диссертация (1139719), страница 3
Текст из файла (страница 3)
и др.). Для конструирования подвижных фазметодом ТСХ наиболее широко используются схема, предложенная фирмой «Camag» и модель«ПРИЗМА». Предложенная и обоснованная в настоящей работе возможность теоретическогоподхода к выбору оптимальных условий хроматографического разделения липофильных и гид-10рофильных БАВ в тонком слое сорбента дает воспроизводимые результаты и позволяет с минимальными затратами решать поставленные задачи.Свежее ЛРС в настоящее время используется в основном для изготовления ЛРП в гомеопатической практике.
Традиционная медицина применяет высушенное ЛРС и полученныена его основе ФП, тогда как большая часть БАВ теряется при высушивании. Исследованиям повозможности широкого использования свежего и замороженного сырья и интенсификации процессов выделения БАВ посвящены работы Молчанова Г.И., Сорокиной А.А.
и Сергуновой Е.В.Учеными Сибири разработана концепция ресурсосберегающей технологии переработкибиомассы облепихи крушиновидной, позволяющая решить проблемы рационального использования шрота, как побочного продукта в производстве облепихового масла, с сохранением БАВ(Золотарева А.М.). Однако, отсутствует информация о влиянии высоких и отрицательных температур на качественный и количественный состав БАВ в плодах облепихи крушиновидной.Имеются данные об основных диагностических признаках плодов (Самылина И.А., АносоваО.Г. и др.) без сведений о влиянии способа консервации на их вариабельность.Исследованиям по стандартизации БАВ МЭ посвящены работы Шикова А.Н., Нестеровой О.В., Мининой С.А.
и др. Однако, ввиду появления на фармацевтическом рынке все большего количества новых видов РМ и МЭ на основе нетрадиционного растительного сырья, проблемы разработки подходов к оценке их качества продолжают являться актуальными.Цель исследования. Цель работы - разработка методологических подходов к стандартизации и комплексной оценке качества исходного ЛРС и МЭ на его основе для обеспеченияэффективности и безопасности применения.Задачи исследования:1.
Разработать методологический подход к комплексной оценке качества изучаемых объектовна основе принципов сквозной стандартизации от исходного ЛРС до МЭ на его основе, который может быть адаптирован для других аналогичных растительных объектов;2. Изучить влияние полярности элюента на хроматографическую подвижность основных действующих липофильных и гидрофильных БАВ растительных объектов и выявить закономерности их поведения в тонком слое сорбента. Теоретически обосновать выбор оптимальных условий идентификации и разделения БАВ в извлечениях из исследуемого ЛРС и МЭ с позиции эффективности хроматографического процесса;3. Разработать унифицированные методики количественной оценки содержания БАВ методомвысокоэффективной тонкослойной хроматографии (ВЭТСХ) и апробировать их на исследуемыхобъектах;4. Разработать и валидировать методики количественного определения содержания основныхгрупп БАВ в изучаемом ЛРС и полученных из него водных и масляных извлечениях;115. Установить качественный и количественный состав основных действующих БАВ исследуемого ЛРС (каротиноидов, токоферолов, хлорофиллов, флавоноидов и др.) с применением комплекса физико-химических методов;6.
Изучить качественный и количественный состав основных действующих БАВ МЭ (каротиноидов, токоферолов, хлорофиллов, полиненасыщенных жирных кислот (ПНЖК), флавоноидови др.) и обосновать необходимость расширения показателей качества МЭ, обеспечивающего ихэффективность и безопасность;7. Разработать методики оценки качества изучаемого ЛРС и МЭ по хроматографическому профилю БАВ (метод «отпечатков пальцев») с применением ТСХ;8. Изучить стабильность БАВ в плодах облепихи крушиновидной различных способов консервации и МЭ при хранении в режиме реального времени для обоснования оптимальных условийи сроков хранения;9.
Провести определение экотоксикантов, элементного состава и микробиологической чистотыизучаемых объектов и обосновать новые критерии для оценки безопасности их применения;10. Разработать проекты ФС на плоды облепихи крушиновидной различных способов консервации и получаемый на их основе МЭ – «облепиховое масло» для ГФ XIII изд., а также дополнить ОФС «Экстракты» и «Тяжелые металлы».Научная новизна. Предложены методологические подходы к комплексной оценке качества ЛРС и МЭ на его основе, включающие показатели оценки эффективности и безопасностиприменения ЛРП, на моделях ЛРС со значительным уровнем БАВ липофильной природы (плоды облепихи крушиновидной) и преобладанием гидрофильных групп БАВ (листья крапивыдвудомной).
Разработанные подходы могут быть использованы в качестве алгоритмов пристандартизации и оценке качества других объектов аналогичной природы.Теоретически и экспериментально обоснован выбор оптимальных условий идентификации и разделения БАВ в извлечениях из исследуемого ЛРС и МЭ методом ВЭТСХ с использованием параметров эффективности хроматографического процесса.
Выявлены закономерностихроматографического поведения основных действующих липофильных и гидрофильных БАВрастительных объектов (жирорастворимых витаминов, полифенольных соединений, аминокислот, органических кислот, простых сахаров) в тонком слое сорбента. Предложен алгоритм выбора подвижной фазы и приемов проведения хроматографического анализа, позволяющий достичь приемлемых критериев разделения БАВ ЛРС и МЭ.Впервые разработаны унифицированные экспресс-методики количественной оценкиБАВ на основе данных ВЭТСХ. Методики апробированы на исследуемых образцах ЛРС и МЭ.Новизна разработок подтверждена получением патентов на изобретения РФ (№ 2581727 от1210.10.2014; № 2581456 от 10.10.2014; № 2469316 от 06.05.2011; № 2530620 от 30.07.2013;№2597661 от 06.07.2016) и заявкой на получение патента № 2016110353 от 21.03.2016 г.Разработаны и валидированы методики количественного определения основных группБАВ (каротиноидов, флавоноидов, дубильных веществ, токоферолов, аминокислот, хлорофиллов, органических кислот, антоцианов, полисахаридов и простых сахаров, некоторых макроэлементов и витаминов) в листьях крапивы двудомной и в плодах облепихи крушиновидной.Новизна разработок подтверждена получением патента на изобретение РФ № 2531940 от15.04.2013 г и заявками на получение патентов (№ 2015102880 от 28.01.2015; № 2015127130 от06.07.2015).Впервые разработаны методики экспресс-оценки подтверждения подлинности и оценкикачества изучаемого ЛРС и МЭ методом «отпечатков пальцев» с применением ТСХ.Исследована, ранее не обсуждаемая в литературе, возможность перехода из ЛРС в МЭ,таких экотоксикантов, как радионуклиды и остаточные пестициды.
Предложено введение в НДновых нормативов на допустимое содержание микотоксинов в МЭ и ЛРС, богатом жирнымимаслами, а также транс-изомеров жирных кислот.Выявлены основные закономерности изменения содержания различных групп БАВ вплодах облепихи крушиновидной (органических кислот, флавоноидов, антоцианов, дубильныхвеществ, аминокислот и простых сахаров) в зависимости от способа консервации.
Исследованастабильность МЭ при хранении в режиме реального времени, обоснованы условия их храненияи сроки годности.Теоретическая значимость работы. В работе впервые сформулированы основныепринципы методологического подхода к комплексной оценке качества ЛРС и МЭ на его основе,который может быть использован для других аналогичных объектов.Выявлены и теоретически обоснованы закономерности хроматографического поведенияпредставителей основных групп БАВ ЛРС и МЭ в тонком слое сорбента, позволяющие прогнозировать возможность разделения сложных смесей БАВ различной химической природы присовместном присутствии.Показана значимость образования межмолекулярных структур БАВ в МЭ, придающихим уникальные фармакологические свойства.Практическая значимость результатов.
Разработанные унифицированные экспрессметодики количественной оценки результатов ВЭТСХ БАВ могут быть применены как дляоценки качества ЛРС, так и субстанций и различных ЛС, содержащих исследуемые группыБАВ, а также найти применение в других отраслях промышленности. Использование высокоэффективного варианта ТСХ позволяет значительно сократить время проведения анализа, сни-13зить на порядок предел обнаружения по определяемому веществу, а также увеличить эффективность разделения БАВ на хроматограммах, снизить стоимость анализов в 5-6 раз.Основные положения, выдвигаемые на защиту:1.
Системный подход на основе принципа сквозной стандартизации к оценке качества ЛРС иМЭ на его основе, предусматривающий, наряду с определением основных групп БАВ, контрольпо показателям эффективности и безопасности применения ЛРП (на примере плодов облепихикрушиновидной и листьев крапивы двудомной);2. Результаты исследования влияния полярности элюента на хроматографическую подвижность основных действующих липофильных и гидрофильных БАВ растительных объектов, выявленные закономерности их поведения в тонком слое сорбента, а также алгоритм выбора подвижной фазы и приемов проведения хроматографического анализа, позволяющий достичьприемлемых критериев разделения БАВ ЛРС и МЭ;3. Результаты определения содержания БАВ в исследуемых образцах ЛРС и МЭ на его основе сприменением разработанных унифицированных методик количественной оценки данныхВЭТСХ;4. Результаты оценки качества изучаемого ЛРС и МЭ по виду хроматографического профиляБАВ («отпечатки пальцев»), полученного с применением разработанных унифицированныхэкспресс-методик;5.
Результаты определения основных групп БАВ (каротиноидов, флавоноидов, дубильных веществ, аминокислот, хлорофиллов, органических кислот, антоцианов, сахаров, некоторых макроэлементов и витаминов) в изучаемом ЛРС с применением разработанных и валидированныхметодик;6. Результаты изучения состава основных действующих БАВ МЭ (каротиноидов, токоферолов,хлорофиллов, ПНЖК, флавоноидов и др.), установленного с применением комплекса физикохимических методов;7. Обоснование условий и сроков хранения плодов облепихи крушиновидной различных способов консервации и МЭ по результатам исследования стабильности в режиме реального времени;8.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
