Диссертация (1139719), страница 18
Текст из файла (страница 18)
На индивидуальные компоненты сложная смесь может быть разделена в случае, когдавеличины К для этих компонентов в выбранной системе различны. Чем больше К, тем дольшерастворенное вещество пребывает в сорбенте. Следовательно, разделение становится возможным благодаря тому, что при движении растворителя вещество с меньшим К находится вэлюенте в течение большего промежутка времени.
В итоге это вещество уносится с током растворителя дальше, чем вещество с большим К. Вычислить величину К можно по известнойформуле 11 [39]:К=1 Rf,Rf(11)где R - относительная скорость перемещения компонента в тонком слое сорбента.Rf = Х / L(12)где Х – расстояние, пройденное пятном, мм; L – расстояние, пройденное элюентом, мм.Селективность сорбции (формула 13) рассчитывается как отношение коэффициентовраспределения двух сосоедних зон веществ на хроматограммах (К1/К2) [39]:L=K1/K2(13)Более точной оценкой хроматографической подвижности, мало чувствительной к влиянию случайных фактороф в условиях проведения эксперимента, является величина Rs, являющаяся отношением величины R f одного вещества к величине Rf другого вещества, принятого застандарт [91].2.10. Подготовка образцов к проведению микроскопического анализаИзучение морфолого-анатомического строения плодов облепихи крушиновидной различных способов консервации проводили по методикам, изложенным в ОФС ГФ XI и XIII изд.«Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительногосырья и лекарственных растительных препаратов» (ОФС.1.5.3.0003.15) [93], с использованиеммикроскопа «БИОМЕД-6» (Россия) с объективами х10, х40, х100, х400.
Биометрические характеристики устанавливали с помощью окуляр-микрометра. Визуализацию диагностических признаков осуществляли с помощью цифровой видеокамеры «Levenchuk» C310 NG.2.11. Определение содержания жирного масла в ЛРСТ.н. измельченного сырья помещают в патрон из хлопчатобумажной ткани в аппаратСокслетта вместимостью 250 мл. Сырье заливают 200 мл н-гексана. Экстракцию осуществляютв течение 4 часов, проводя не менее 6 циклов.
Аликвоту гексанового извлечения объемом 25 млпомещают в предварительно взвешенную и доведенную до постоянной массы фарфоровую79чашку и выпаривают на кипящей водяной бане до сухого остатка. Сухой остаток высушивают всушильном шкафу при температуре 103±2 °С до постоянной массы. Массовую долю жирногомасла в пересчете на абсолютно сухое сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле 14:X ,%где(m m1 ) 200 100 100,a 25 (100 W )(14)m – масса фарфоровой чашки с сухим остатком, доведенная до постоянного значения, г;m1 - масса фарфоровой чашки, доведенная до постоянного значения, г; a – навеска сырья, г; W –влажность сырья, %.2.12. Оценка качества масляных экстрактов фармацевтического назначения2.12.1. Определение физико-химических показателей качества масляных экстрактовФизико-химические показатели качества исследуемых масляных экстрактов (МЭ) определялипо методикам, изложенным в ГФ XIII изд.
[93], ЕФ [400-403] и ГОСТах, регламентирующих качествопищевых РМ. В работе были использованы растворители марки х.ч. и реактивы марки ч.д.а. ЗАО «Вектон»(СПб, Россия).1. Определение перекисного числа (ПЧ) проводили по методикам ГОСТ Р 51487-99 [70], ГФ XIII изд. [93] иЕФ [400-403].2. Определение йодного числа (ЙЧ) проводили по методикам ГОСТ Р 5475-69 [49] и ГФ XIII изд. [93].3. Определение кислотного числа (КЧ) проводили по методикам ГОСТ Р 50457-92 [62] и ГФ XIII изд. [93].4.
Определение числа омыления (ЧО) проводили по методике ГФ XIII изд. [93] и ЕФ [400-403].5. Эфирное число (ЭЧ) определяют по разности между ЧО и КЧ.6. Определение показателя преломления (ПП) изучаемых МЭ проводили по методике ГОСТ Р 5482-90 [59] рефрактометрическим методом при температуре 20 °С.7. Определение цветного числа (ЦЧ) проводили по методике ГОСТ 5477-93 [63].8. Определение анизидинового числа (АЧ) изучаемых МЭ проводили по методике ГОСТ 31756-2012 [85].9. Определение тиобарбитурового числа (ТБЧ) изучаемых МЭ проводили по методике, изложенной в ГОСТ Р55810-2013 [89].2.12.2. Определение органолептических показателей качества МЭ1.
Определение запаха, цвета и прозрачности проводили по методике ГОСТ Р 5472-50 [42] при температуре20°С.2.12.3. Определение степени чистоты МЭ1. Определениепарафина, воска, смоляных кислот проводили по методике ОФС ГФ ХIII изд. [93].2. Определение мыла проводили по методикам ГФ ХIII изд. [93] и ГОСТ 5480-59 [43] для масел, не предназначенныхдля приготовления инъекционных растворов.3. Определение содержания влаги и летучих веществ проводили согласно методике ГОСТ Р50456-92 [61] по методу В для РМ с КЧ менее 4.804. Определение воды и белков проводили по методике ОФС ГФ ХIIIизд. [93].5. Общую зольность для МЭ определяли по ГОСТ 5474-66 [47].2.12.4.
Определение окисленности МЭОпределение индекса окисленности (ИО) и удельных показателей накопления продуктов первичного и вторичного окисления липидов проводили по методикам, описанным в работах [3,187,245,280,304,365].Точную навеску испытуемого МЭ массой около 0,05 г помещали в термостойкий стакан объемом 100 мл с40 мл 95% этилового спирта и растворяли при перемешивании до полного растворения. Раствор полностью переносили в мерную колбу объемом 50 мл, промывая стакан 5 мл спирта и сливая в ту же мернуюколбу.
Объем раствора доводили до метки и тщательно перемешивали. Величину светопоглощенияполученного раствора измеряли на спектрофотометре в кварцевой кювете с толщиной слоя 10 мм в диапазонедлин волн 190-380 нм. Раствором сравнения являлся 95% этанол.2.12.5. Определение БАВ в МЭ1. Определение суммы каротиноидов в МЭ проводили по методике, описанной в ФС 42-3873-99[351]. Измерения проводили на спектрофотометре СФ-2000-01 (Россия) в кюветах с толщиной слоя 10мм.2. Определение массовой доли витаминов А и Е проводили хроматоспектрофотометрически по методике ГОСТ30417-96 [68].3.
Определение неомыляемых веществ проводили по методике ГОСТ 5479-64.4. Определение фосфорорганических соединений проводили по методике ГОСТ Р 52676.5. Определение состава жирных кислот (ЖК) изучаемых МЭ проводили по методикам ГОСТ 31663-2012 [86] и31665-2012 [87].6. Определение флавоноидов в экстракционных маслах проводили методом дифференциальнойспектрофотометрии, как описано в работе [192].2.12.6.
Выделение токоферолов из ЛРС и МЭВыделение токоферолов из МЭ осуществляли, как описано в работах [235,365] методом реперколяции. Около 200 мг (т.н.) МЭ делили на три неравные части: 100; 50 и 50 мг. Наибольшую порцию МЭ обрабатывали чистым экстрагентом – 96% этанолом в количестве 10 мл. Смесь тщательно перемешивали в течение пяти минут, добиваясь тонкого эмульгирования МЭ в этаноле, а затем оставляли на сутки в плотно укупоренном виде в прохладном, защищенном от света месте. Спиртовой экстракт токоферолов отделяли отМЭ с помощью делительной воронки. Каждую последующую навеску МЭ обрабатывали вытяжкой, полученной из предыдущей.Выделение токоферолов из ЛРС осуществляли аналогичным образом. Методика: около 200мг (т.н.) ЛРС измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 0,2 мм, делилина три неравные части: 100; 50 и 50 мг.
Наибольшую порцию ЛРС экстрагировали чистым экстрагентом –96% этанолом в количестве 10 мл. Этанол достаточно избирателен в отношении триглицеридов и токо-81феролов. Смесь тщательно встряхивали в течение пяти минут, добиваясь тонкого суспензирования частицЛРС в этаноле, а затем оставляли на сутки в плотно укупоренном виде в прохладном, защищенном от светаместе. Спиртовой экстракт токоферолов отделяли от ЛРС фильтрованием. Каждую последующую порциюсырья экстрагировали вытяжкой, полученной из предыдущей.2.12.7. Методика подготовки образцов для проведения ИК-спектроскопического анализаИК-спектры α-токоферола («Sigma», Германия, степень чистоты более 97 %) и изучаемых МЭ регистировали в диапазоне средних частот 400 - 4000 см-1, в виде «раздавленной капли» [365,368,369] на ИК - спектрометре с Фурье-преобразованием «Vertex 70» с последующейобработкой программой OMNIC или GRAMS 4/32.2.12.8. Идентификация МЭ методом ТСХОколо 0,3 г (т.н.) МЭ растворяли в 3 мл хлороформа марки х.ч.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
