Диссертация (1139719), страница 15
Текст из файла (страница 15)
Для стандартизации ЛП на основе ЛРС наиболее целесообразно использовать методы ВЭЖХи КЭ, поскольку в минимально короткое время возможно определить наиболее важные критерии качества (подлинность, чистоту, количественное содержание).3. Использование метода спектрофотометрии в ультрафиолетовой области, который рекомендован некоторыми НД, возможно только после предварительного разделения БАВ, т. к. многиеиз них имеют близкие максимумы поглощения.
Большинство из описанных способов, крометого позволяют определять только суммарное содержание БАВ, без достоверной информации оприсутствии отдельных компонентов.664. Хроматографические методы в настоящее время являются методами выбора в случае поставленных задач одновременного разделения, идентификации и количественного определенияБАВ при совместном присутствии (методы БХ, ТСХ, ГХ, ВЭЖХ, ионообменной хроматографии). Использование метода ТСХ в фармацевтическом анализе ЛРС ограничивается, в основном, только установлением качественного состава различных групп БАВ.5. Масс-спектрометрия – один из наиболее информативных и точных методов исследованияБАВ в составе многокомпонентных сложных объектов растительного происхождения, позволяющий решить почти все задачи в рамках одной аналитической процедуры. К сожалению, широкое распространение данного метода является все еще невозможным в виду высокой стоимости масс-спектрометров, вспомогательных материалов и реактивов, трудности эксплуатацииприборов, и, как следствие, значительной себестоимости одного анализа.
Все это не дает возможности рекомендовать его для включения в НД, методики которой должны удовлетворятьосновным требованиям рутинного анализа.6. Электро-химические методы широко применяются для разделения и количественного определения БАВ в сложных многокомпонентных объектах в нативном виде или в виде различныхпроизводных. Использование метода КЭ наиболее целесообразно для определения БАВ в объектах фармацевтического назначения. Применение метода КЭ пока не нашло в России широкого использования в фармацевтическом анализе из-за невозможности разделения и определениявсех БАВ за одну процедуру, а также ввиду отсутствия аттестованных методик.7. Наметилась тенденция к переходу стандартизации РМ по содержанию БАВ, обусловливающих фармакологическую активность, что отвечает современным веяниям в вопросах оценкикачества РМ, применяемых в фармации, на мировом уровне.
Значительно расширился в последних НД перечень показателей безопасности применения РМ. Стали более дифференцированы подходы к определению степени окисленности РМ. Все это в совокупности позволит сделать стандартизацию РМ и МЭ фармацевтического назначения более «прозрачной», отвечающей современному уровню развития фармацевтической науки.67Глава 2.
Материалы и методы исследования2.1.Характеристика объектов исследованияFructus Hippophaёs rhamnoidis recents – плоды облепихи крушиновидной свежиеСобранные в Воронежской области согласно правилам заготовки ЛРС различных морфологических групп свежие зрелые плоды кустарника облепихи крушиновидной (Hippophaёrhamnoides) из сем. лоховых (Elaeagnaceae).Консервацию свежих плодов осуществляли путем заморозки и последующего хранения вусловиях морозильной камеры при температуре – 18 °С без размораживания. Замороженноесырье хранили в соответствии с ГОСТ 29187-91 «Плоды и ягоды быстрозамороженные» [250].Изучение стабильности БАВ в замороженных плодах проводили в течение 9 месяцев.
В качестве контрольных точек были взяты исходные данные, а также интервалы в 3, 6 и 9 месяцев.Размораживание осуществляется в соответствии с требованиями ГОСТ Р 53956-2010 «Плодыбыстрозамороженные» [250] в холодильной установке при температуре 6 – 8 ºС в течение 2,5 ч.Анализ размороженных плодов проводился аналогично свежим плодам.Стандартизация.
В ГФ с X по XIII изд. ФС на плоды облепихи крушиновидной (свежиеили высушенные) не включены, а также пока отсутствует проект ФС для XIII изд.Упаковка. Хранение. Свежие плоды упаковывают в деревянные бочки емкостью 100 л ихранят в прохладном месте не более 3 дней, замороженные плоды – в тканевые мешки, вмещающие до 70 кг; хранят зимой в неотапливаемых помещениях или холодильниках не более 6 месяцев.Fructus Hippophaёs rhamnoidis sicci – плоды облепихи крушиновидной сухиеСобранные в период полного созревания и высушенные плоды кустарника облепихи крушиновидной (Hippophaё rhamnoides) из сем.
лоховых (Elaeagnaceae).Свежесобранные плоды сначала подвяливали на воздухе, а затем сушили при температурене более 60 °С до остаточной влажности не более 14 %.Хранение. Срок годности 1 год.Использование. Сухие плоды облепихи применяют для получения облепихового масла.Качество облепихового масла регламентируется ФС 42-1730-86.Крапива двудомная - Urtica dioica L.Сырьем служили измельченные высушенные листья крапивы двудомной, отечественного производителя, приобретенное в аптеке г. Воронежа, соответствующее требованиям НД.Стандартизация. Для ГФ XIII изд. утверждена новая ФС на листья крапивы двудомной,в которой, согласно современным требованиям, вновь включены такие показатели доброкаче-68ственности и чистоты ЛРС (цельного, измельченного и порошкованного), как содержание ТМ,ОП, РН, микробиологическая чистота и БАВ (ГКК).Oleum Hippophaёs - Масло облепиховоеИсследованиям подвергалось «облепиховое масло» - официнальный препарат, представляющий собой МЭ плодов облепихи крушиновидной, одного и того же отечественного производителя, соответствующее требованиям НД, приобретенное в аптеке г.
Воронежа.Стандартизация облепихового масла в соответствии с фармакопейными требованиямипроводится по сумме каротиноидов (не менее 180 мг%) [351,354]. Облепиховое масло в промышленных условиях получают путем экстракции мякоти плодов или отдельно семян органическими растворителями и рафинированными растительными маслами, чаще всего подсолнечным, а также методами холодного или горячего прессования [157].Хранение. Срок годности 18 мес.МЭ листьев крапивы – укрепляет волосяные луковицы, устраняет перхоть, стимулируетрост волос, предупреждает раннюю седину [157,376].Исследованиям подвергались образцы МЭ одного и того же отечественного производителя, приобретенные в аптеке г.
Воронежа. Испытания стабильности проводили в режиме реального времени при хранении в условиях, указанных производителем на упаковке.Хранение. Срок годности 2 года.2.2. Определение БАВ в ЛРС2.2.1. Получение водных извлечений из изучаемого ЛРСПриготовление настоя из листьев крапивы двудомной. Настой готовили по методикеОФС ГФ XIII [93].Приготовление отвара из плодов облепихи крушиновидной различных способов консервации. Отвар готовили по методике ОФС ГФ XIII [93].2.2.2.
Определение экстрактивных веществПроводили по ОФС ГФ ХIII изд. [93] по методике 1. Определение экстрактивных веществ (ЭВ) в ЛРС, фасованном в фильтр-пакеты для приготовления водных извлечений в домашних условиях, проводили, как описано в работе [291].2.2.3. Определение содержания суммы свободных органических кислот методомалкалиметрииПриготовление извлечения из листьев крапивы двудомной: Около 1,0 г (т.н.) измельченного ЛРС с размером частиц 1,0 - 0,5 мм экстрагируют в конической колбе объемом 500 мл с250 мл воды очищенной на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 2 ч.Быстро охлаждают, процеживают через несколько слоев марли, отжимая ЛРС, в мерную колбу69объемом 250 мл. Объём извлечения, при необходимости, доводят водой очищенной до метки иперемешивают [285].Приготовление извлечения из свежих и высушенных плодов облепихи крушиновидной:Около 5,0 г (т.н.) измельченного ЛРС (в пересчете на абсолютно сухое сырье) экстрагируют вконической колбе объемом 100 мл с 50 мл воды очищенной на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 2 ч, быстро охлаждают, процеживают через несколько слоевмарли, отжимая ЛРС, в мерную колбу объемом 50 мл.
Объём извлечения, если требуется, доводят водой очищенной до метки и перемешивают [185].К 10 мл извлечения приливают 100 мл свежепрокипяченой воды очищенной, 6 капель1% спиртового раствора фенолфталеина, 12 капель 0,1% спиртового раствора метиленового синего и титруют в колбе объемом 200 мл при перемешивании 0,01 моль/л раствором натрия гидроксида до перехода окраски от зеленовато-голубой до лиловой. Параллельно проводят контрольный опыт. Содержание суммы свободных органических кислот (ОК) в пересчёте на яблочную кислоту в абсолютно сухом сырье в процентах (Х) рассчитывают для листьев крапивыдвудомной и плодов облепихи крушиновидной по формулам (1) и (2) соответственно:Х ,%Х ,%(Vo Vk ) K 0,00067 250 100 10010 а (100 W )(1)(Vo Vk ) K 0,00067 50 100 10010 а (100 W )(2)где 0,00067 – количество яблочной кислоты в граммах, соответствующее 1 мл 0,01 моль/л раствора натрия гидроксида; Vо и Vк – объём 0,01 моль/л раствора натрия гидроксида в миллилитрах, пошедшего на титрование в основном и контрольном опытах соответственно; а – массаЛРС, г; W – влажность ЛРС, % [185].2.2.4.
Исследования состава свободных органических кислот в изучаемом ЛРС методомкапиллярного электрофорезаДля исследования состава свободных ОК в кислотной и солевой формах, водные вытяжки из изучаемых объектов исследовали методом КЭ на приборе «Капель-105/105М» («Люмэкс»,СПб, Россия) в стандартных рекомендованныхусловиях анализа [139,309,322].2.2.5.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
