Диссертация (1139590), страница 11
Текст из файла (страница 11)
1). В системе оценки 0 балловсоответствует отсутствию дискомфорта и клинически видимых признаков, 10баллов – крайне выраженному клиническому признаку, нарушающемунормальную жизнедеятельность и социальную активность пациента.Для оценки качественного состояния клинической симптоматики, атакже выраженности жалоб была разработана балльная система дляисследуемых групп пациентов. Балльная система была составлена в видеопросника, который заполнял пациент совместно с врачом, в начале и концеисследования. Каждый пункт опросника включал десятибалльную оценкувыраженности исследуемого признака.
Пациенты оценивали такие пунктыкак:1. Частота заболевания, где 0 баллов – впервые, 5 баллов – в среднем до1 раза в год, 10 баллов – несколько раз в год. Пункт отмечался только вначале заболевания.2. Средняя длительность заболевания (если был установленныйпредшествующий эпизод), где количество баллов соответствует количествудней активного проявления жалоб и клинической симптоматики заболевания,причем 10 баллов соответствует 10 и более дням заболевания.
Пунктотмечался только в начале заболевания.3. Степень дискомфорта, вызываемого заболеванием, где 0 балловсоответствует отсутствию дискомфорта и наличию только клиническивидимых признаков, 10 баллов – крайне выраженному дискомфорту,60нарушающему нормальную жизнедеятельность и социальную активностьпациента.Критерии включения больных в исследование:– клиническиилабораторноподтверждѐнныйдиагнозкератоконъюнктивита;– проживание в регионе не менее 2 лет;– возраст от 25 до 50 лет;– письменное информированное согласие пациентов на участие висследовании;– переносимость использованных в исследовании фармакологическихпрепаратов.Критерии исключения:– этиологическиепричиныкератоконъюнктивитов:травмы,химические и термические ожоги, инородные тела конъюнктивы и роговицы,послеоперационные конъюнктивиты, конъюнктивиты на фоне синдромасухого глаза;– кератоконъюнктивиты, ассоциированные с основным заболеванием,блефароконъюнктивиты и демодекозные конъюнктивиты;– кератоконъюнктивитысявновыраженнойдоминирующейаллергической этиологией;– вовлечение в заболевание сосудистого тракта глаза (увеиты);– беременность, кормление грудью;– аллергическая реакция на препараты;– отказ от участия в исследовании.Таким образом, были сформированы группы пациентов в г.
Курске иг. Железногорскепо80человеквкаждой,страдающихкератоконъюнктивитами.У всех обследуемых основных и контрольных групп для исследованияиммунологических параметров производился отбор крови и слѐзной61жидкости. Кровь забирали из локтевой вены в объѐме 5 мл утром натощак.Чистую слѐзную жидкость, представляющую собой в основном секретслѐзных желѐз, получали без микротравм с помощью микрокапилляра снаружной поверхности нижнего века.2.6. Способы введения и дозировки препаратов, использованных убольных с кератоконъюнктивитамиСцельюисследованиявлиянияПГЭНиПАдК+ПУрКнаиммунологические факторы крови и слѐзной жидкости данные препаратыприменялись у больных с начала заболевания.
Две группы сравнения вгородах Курск и Железногорск по 20 человек в каждой получали лечение пообщепринятой методике ведения пациентов с заболеваниями переднегоотрезка глаза. Пациенты исследовательских групп в городах Курск иЖелезногорск по 20 человек в каждой получали дополнительно курс ПГЭНвнутримышечно объѐме 0,5 мл раствора 0,2 мг/мл в течение 10 дней. В двухдругих исследовательских группах в городах Курск и Железногорск по 20человек в каждой больные получали дополнительно курс инстилляцийПАдК+ПУрК по 1 капле 6 раз в день в течение 10 дней или дополнительносочетание внутримышечного введения ПГЭН и инстилляций ПАдК+ПУрК напротяжении 10 дней.2.7.
Лабораторные методы исследованияИсследование крови проводилось по общепринятым в российскихклинических лабораториях методикам. При оценке гемограмм брались заоснову физиологические нормы согласно международной системе единиц(СИ) в экспериментально-клинических исследованиях.Фагоцитарная активность нейтрофилов оценивалась по активностифагоцитоза – фагоцитарному показателю (ФП) – проценту активныхфагоцитов из числа сосчитанных нейтрофилов, фагоцитарному числу (ФЧ) –62среднему числу частиц латекса, поглощѐнных одним фагоцитом из числасосчитанныхполиморфноядерныхлейкоцитов.Индексактивностифагоцитов (ИАФ) рассчитывался как число фагоцитированных частицлатекса, умноженное на процент фагоцитировавших клеток и разделѐнное начисло подсчитанных клеток [203].Функциональнаяактивностьнейтрофиловоцениваласьвтестевосстановления нитросинего тетразолия [153, 196]. Рассчитывался индексстимуляциинейтрофилов(ИСН),которыйпредставляетотношениедиформазан-позитивных клеток в стимулированной реакции к диформазанпозитивным клеткам в спонтанной реакции НСТ-теста.
К позитивнымклеткам относили нейтрофилы с чѐтко видимыми отложениями диформазана,нейтрофилыспылевиднымигрануламисчиталинеактивными.Подсчитывали 100 нейтрофилов, результат выражали в процентах. Ополноценности процесса фагоцитоза судили по его завершѐнности (ЗФ)[203]. Функциональный резерв нейтрофилов (ФРН) определялся как разницамежду диформазан-позитивными клетками в стимулированной реакции идиформазан-позитивными клетками в спонтанной реакции НСТ-теста.
Вработе использовали нитросиний тетразолий фирмы Lachema (Чехия).Уровень миелопероксидазы (МП) определялся цитохимически по методуГрехема-Кнолля с расчѐтом среднего цитохимического коэффициента (СЦК)[145,222].Состояниекислороднезависимыхбактерицидныхсистемоценивалось по среднему гистохимическому коэффициенту (СГК) припостановке лизосомально-катионного теста (ЛКТ) [163, 225].Количественная оценка уровней IgG, IgM, IgA, ФНО-α, ИЛ-1β, ИЛ-2,ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-10, ИНФ-α, ИНФ-γ проводилась с помощью наборареагентов ВЕКТОР-БЕСТ (ООО «ВЕКТОР-БЕСТ», г. Новосибирск) методомтвѐрдофазного иммуноферментного анализа.Оценкууровнялактатдегидрогеназы(ЛДГ)производилипоВ.В.
Меньшикову [136], каталазы – по методике М.А. Королюк и соавт.63[137], супероксиддисмутазы (СОД) – по H.P. Mirsa, Y. Fredovich [262],церулоплазмина – по методике, описанной В.С. Камышниковым [102],малонового диальдегида (МДА) – по В.Г. Гаврилову и соавт. [57],лактоферрина – методом твѐрдофазного иммуноферментного анализа.2.8. Методы статистической обработки результатовСтатистическая обработка данных проводилась с использованиеманалитического пакета приложения Excel Office 2010 с использованиембиблиотеки статистических функций, лицензией на право использованиякоторого обладает ФГБОУ ВО КГМУ Минздрава России.
Проверкураспределения данных на соответствие нормальному закону распределенияосуществляли с помощью критерия согласия распределения КолмогороваСмирнова. При соответствии эмпирического распределения нормальномутеоретическомураспределениюкритическийуровеньстатистическойзначимости принимали равным 0,05. Для оценки значимости различий двухгрупп независимых наблюдений использовали параметрический критерий –t-критерий Стьюдента после дополнительной проверки равенства дисперсийдвух сравниваемых групп посредством F-критерия Фишера-Снедекора, атакже критерий Вилкоксона-Манна и Уитни. Для сравнения среднихзначений нескольких выборок использовали непараметрический критерийКраскела-Уоллиса [69, 118].Определение достоверности разницы двух наблюдаемых частот свероятностью 95% производилось по формуле 42:t ( p1 p2 )гдеp1 n1n2,(1 p)(n1 n2 )MM1p2 2n1 иn2 – сравниваемые опытные частоты,64pаM1 M 2n1 n2– средняя частота появления признака по обеимгруппам.Степень иммунных расстройств (СИР) для иммунологическихпоказателей рассчитывали по формуле А.М.
Земскова и др. [86]:Если полученная величина лежит в интервале от 1 до 33%, то этосоответствует первой степени расстройств, от 34 до 66% – второй, более 66%– третьей.Рейтинговый алгоритм устанавливали по величине СИР, для чегоисследованные иммунологические показатели выстраивались в порядкеснижающейся значимости отличий от заданных значений [86].С помощью коэффициента диагностической ценности определялиформулу расстройств иммунной системы (ФРИС) путѐм выбора из всехизученных лабораторных параметров трѐх ведущих, наиболее отличающихсяот уровня нормы [87].Для оценки взаимосвязей исследуемых показателей использовалиметоды многомерной статистики: корреляционный (КА) и кластерный (КЛА)анализы.
Проверку наличия взаимосвязи между изучаемыми переменнымиосуществляли с использованием КА методом попарной корреляции Пирсона.Для разделения данных на группы однородности и оценки надѐжности иточности выводов, сделанных на основании ограниченного статистическогоматериала, в КЛА использовали иерархическую агломеративную процедуру собъединением данных в кластеры по правилу одиночной связи. В качествемеры сходства, использовали метрику – величину, обратную коэффициентукорреляции Пирсона.
При оценке результатов КЛА на дендрограммах65учитываются только статистически значимые взаимосвязи при р<0,05(обозначены дополнительной обводкой выделенной области).66СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯГЛАВА 3АНАЛИЗ РАСПРЕДЕЛЕНИЯ ОФТАЛЬМОЛОГИЧЕСКОЙПАТОЛОГИИ ПО НОЗОЛОГИЧЕСКИМ ГРУППАМ В РЕГИОНЕКУРСКОЙ МАГНИТНОЙ АНОМАЛИИ ЗА 2004-2014 ГГ.Одной из причин роста числа онкологических, сердечно-сосудистых,респираторных,эндокринныхзаболеванийи,втомчисле,офтальмопатологии в настоящее время является снижение резистентностинаселения планеты в результате глобального неблагоприятного воздействияна организм человека социальных, экологических и других факторов.
Всовокупности все эти причины оказывают отрицательное влияние наиммунную систему организма, приводя к развитию еѐ дисбаланса.Экологический фактор в патогенезе офтальмологических заболеванийявляется одной из ключевых причин. Физиологическое состояние органазрения находится под постоянным влиянием различных физических факторовокружающей среды, среди которых большую роль играют магнитные поля.Они, как показано в работах различных авторов [4, 15, 23 и др.], оказываютнегативное воздействие на многие системы организма, приводя к увеличениюраспространѐнности патологии нервной, эндокринной, сердечно-сосудистойсистем, а также вызывая ухудшение показателей физического развития.Установлено, что такой гелиогеофизический фактор среды обитания, какГМПаномальныххарактеристик(например,регионаКМА,гденапряжѐнность ГМП в 4-5 раз превышает фоновые значения другихрегионов), обладает биотропным эффектом: влияет как на здоровый организм,так и на патологически изменѐнный [17].В частности, магнитные поля аномальных характеристик значительноизменяют характер и силу ответной реакции защитных механизмовслизистой и придаточного аппарата глаза, а также организма в целом.67В связи с этим нами была проанализирована заболеваемостьразличнымивидамиофтальмологическойпатологииврегионахсразличными уровнями напряжѐнности естественного ГМП – городах Курскеи Железногорске.Сравнивая частоту встречаемости патологии век необходимо отметитьпик заболеваемости в г.