Диссертация (1139590), страница 10
Текст из файла (страница 10)
Разбросв группах по исходной массе не превышал 10%. Все исследованияпроводили в одно и то же время суток во второй половине дня ссоблюдением принципов, изложенных в Конвенции по защите позвоночныхживотных,используемыхдляэкспериментальныхидругихцелей(г. Страсбург, Франция, 1986).2.2. Модель экспериментального кератоконъюнктивитаЭкспериментальный кератоконъюнктивит вызывали у животных путѐминфицирования конъюнктивы и роговицы глаза взвесью суточной агаровойкультуры Staphylococcus aureus в концентрации 2х10 9 микробных тел/млпосле их травмирования с последующей оценкой показателей фагоцитарногозвенаантиинфекционнойзащиты,активностиоксидантныхантиоксидантных ферментных систем и обсеменѐнности слизистой.и542.3.
Физические факторы воздействия в экспериментеДля изучения влияния аномального магнитного поля использоваласьэкспериментальная установка, состоящая из высокостабилизированногоисточника постоянного тока и 2 колец Гельмгольца диаметром 1,5 м(расстояние между кольцами 1 м) [101]. Внутри колец создавалось поле синдукцией 3х10-4 Тл, дающее возможность создавать в центре пространство срадиусом 30 см, в котором неоднородность индукции магнитного поля непревышала 30%, что позволяет считать поле однородным [40].
Векторнапряжѐнности поля находился в суперпозиции с вектором вертикальнойсоставляющейГМПнатерриторииг. Курска(фоновоезначениевертикальной составляющей ГМП 4,5х10-5 Тл). Устройство аттестованометрологической службой. Таким образом, использованная установкапозволяла получить внутри колец Гельмгольца поле с напряжѐнностью,сопоставимой с напряжѐнностью вертикальной составляющей ГМП регионаКМА.Экспериментальныеживотныеиживотныегруппсравненияпомещались в искусственное магнитное поле за 2 недели до началаэксперимента с целью адаптации к условиям среды обитания. Морскиесвинки контрольной группы находились при фоновых значениях естественного ГМП на широте г.
Курска (напряжѐнность поля 0,45 эрстеда).Исследованиеклиническихпроявленийинфекционногопроцесса,показателей антиинфекционной защиты периферической крови, оксидантнойи антиоксидантной систем, обсеменѐнности слизистой глаза животныхпроводилось на 3, 7 и 14 день после инфицирования.У животных экспериментальных групп и групп сравнения дляопределения исследуемых показателей производился внутрисердечный заборкрови в объѐме 5 мл на 3, 7 и 14 сутки моделирования экспериментальногокератоконъюнктивита. У животных контрольной группы аналогичный заборкрови проводился однократно.552.4. Способы введения и дозировки препаратов, использованных уживотных с экспериментальным кератоконъюнктивитомПрименение лекарственных препаратов в эксперименте начиналось стретьего дня после инфицирования, когда у морских свинок формировалсяинфекционный процесс, и продолжалось в течение 10 дней.
В экспериментеиспользовали следующие препараты: азоксимера бромид (полиоксидоний),глюкозаминилмурамилдипептид(ликопид),полиадениловаякислота+полиуридиловая кислота (полудан) и пентагидроксиэтилнафтохинон(гистохром), обладающие иммуномодулирующим и/или антиоксидантнымдействием.Азоксимерабромидувеличиваетрезистентностьорганизмавотношении бактериальных, грибковых и вирусных инфекций. Основоймеханизма иммуномодулирующего действия азоксимера бромида являетсяпрямое воздействие на фагоцитирующие клетки и естественные киллеры, атакже стимуляция антителообразования.
Наряду с иммуномодулирующимдействием,онобладаеттакжевыраженнойдетоксицирующейиантиоксидантной активностью [207, 213].Иммуномодуляторглюкозаминилмурамилдипептидявляетсясинтетическим аналогом основного фрагмента клеточной стенки бактерий иоказывает воздействие на моноцитарно-макрофагальное звено иммуннойсистемы. Вследствие активации моноцитов и макрофагов увеличиваетсясинтез провоспалительных цитокинов, происходит модуляция экспрессииантигенов главного комплекса гистосовместимости, активация лимфоцитов иусилениебиосинтезамиелоидногонормализуютсяряда,лимфоцитарныхцитокинов,увеличиваетсяцитотоксичностьэффекторныефункцииактивациялимфоцитов,клетокмакрофагов,втомчислеантителообразование [189].Полиадениловая кислота+полиуридиловая кислота – биосинтетическийполирибонуклеотидный комплекс кислот является индуктором синтеза56эндогенного интерферона и других цитокинов.
Обладает противовирусным ииммуномодулирующим действием. Стимулирует образование α-интерферонаи в меньшей степени β- и γ-интерферона. Индуцирует синтез интерферона влейкоцитах периферической крови, в тканях и органах, содержащихлимфоидные элементы, а также повышает уровень интерферона в слѐзнойжидкости [194].Пентагидроксиэтилнафтохинонотноситсякантиоксидантнымпрепаратам, его действие связано со способностью стабилизироватьклеточные мембраны, взаимодействовать с активными формами кислорода,свободными радикалами, хелатированием металлов переменной валентности,снижением количества продуктов перекисного окисления липидов.
Имеетширокий спектр офтальмологических показаний и применяется в лечениидиабетической ретинопатии сетчатки, дисциркуляторных нарушениях всосудах сетчатки, кровоизлияниях в стекловидное тело, сетчатку и переднююкамеру, в составе комплексной терапии травм, ожогов глаза, кератитов,контузий, первичной открытоугольной глаукомы [71].Азоксимерабромидвводилсявнутримышечно,аглюкозаминилмурамилдипептид – внутрижелудочно через зонд 1 раз в день впервой половине дня в дозах, рассчитанных согласно инструкциям поприменению препаратов в пересчѐте на массу тела животных.Пентагидроксиэтилнафтохинонвводилипутѐмвнутримышечныхинъекций препарата концентрацией 0,02% в дозировке 0,007 мл/кг.Полиадениловую кислоту+полиуридиловую кислоту инстиллировалиежедневным15-минутнымфорсажемсконцентрацией1ЕДвинфицированный глаз.2.5.
Характеристика клинических наблюденийВ клиническом исследовании, на основании информированногосогласия приняло участие 160 человек, страдающих заболеваниями57переднего отрезка глаза, в возрасте 25-50 лет, из них 80 человек – жителиг. Курска (регион с фоновым значением напряжѐнности ГМП – 0,45 эрстеда),проживающие в регионе не менее 2 лет, и 80 – жители центра КМА –г. Железногорска (напряжѐнность ГМП 3 эрстеда) [105].Группа контроля состояла из 20 здоровых добровольцев в г.
Курске ииз 20 человек в г. Железногорске. Исследования проводились на базахгородской поликлиники г. Железногорска и областной офтальмологическойполиклиники г. Курска. Здоровые добровольцы определялись на основанииопроса и отсутствия характерных жалоб, указывающих на наличие острых ихронических кератоконъюнктивитов на момент опроса и в анамнезе.Добровольцы, не имеющие данных жалоб в течение последних 10 лет, атакжепрошедшиеинструментальнуюдиагностикунапредметкератоконъюнктивитов с отрицательным результатом, были включены вконтрольные группы. В основные группы входили жители г.
Курска иг. Железногорска, обратившиеся в Курскую и Железногорскую поликлиникис характерными жалобами.Диагнозкератоконъюнктивитустанавливалсянаоснованиихарактерных жалоб пациентов, данных инструментального исследования. Вгруппу характерных жалоб у пациентов с кератоконъюнктивитами относилижалобы на: светобоязнь, боль, отделяемое гнойного или слизисто-гнойногохарактера, отѐчность глаза (конъюнктивы и/или век), ощущение дискомфорта(инородного тела, зуда, болезненных ощущений). При инструментальнойдиагностике были отмечены рыхлость и отѐчность конъюнктивы, еѐгиперемию как бульбарной части, так и конъюнктивы век, гнойное илислизисто-гнойное отделяемое.Дляоценкироговойоболочки,помимооценкисостоянияконъюнктивы, использовались следующие методы: осмотр при боковомосвещении с использованием двух ламп, биомикроскопия с помощьющелевой лампы, окрашивание передней поверхности роговицы 1% раствором58флюоресцеина для выявления дефектов эпителия.Комплексноеофтальмологическоеобследованиевключалоопределение остроты зрения по таблицам С.С.
Головина, Д.А. Сивцева напроекторе знаков, биомикроскопия с помощью щелевой лампы.Для установления этиологии заболевания применяли следующиелабораторные исследования: бактериоскопическое исследование мазков сконъюнктивы; посев отделяемого конъюнктивы на питательные среды,выделение чистой культуры возбудителя и еѐ идентификация согласнообщепринятыммикробиологическимподходам;цитологическоеисследование соскобов с конъюнктивы.
Выявление и идентификациявозбудителя вирусного кератоконъюнктивита проводилась при помощи ПЦРмазка с конъюнктивы и роговицы.Таблица 1Балльная система оценки воспалительного процесса переднегоотрезка глазаКачественнаяхарактеристикаОщущение дискомфорта(зуд, светобоязнь,ощущение инородноготела, боль)Состояние переходныхскладок век/бульбарнойконъюнктивыХарактер отделяемого изконъюнктивальной полостиВоспалительныйинфильтрат, отѐк, дефектроговицыБаллы и их характеристика (баллы от 0 до 10соответствуют выраженностивоспалительного процесса, субъективныхжалоб пациента)отсутствует/незначительно/ярко выраженобез особенностей/отѐк, гиперемия, сглаженность/выраженный отѐк и гиперемияскудное слизисто-гнойное/незначительное слизисто-гнойное/обильное гнойноеотсутствует/точечные субэпителиальные инфильтраты/субэпителиальные инфильтраты/дефекты размером более 1 мм59Дляунификацииданныхвоценкетяжестивоспалительногозаболевания была разработана бальная система оценки, где учитывалисьхарактерныеклиническиесимптомы:ощущениедискомфорта(зуд,светобоязнь, боль), состояние переходных складок век, степень гиперемиибульбарной конъюнктивы, отделяемое из конъюнктивальной полости,характер отделяемого, вид инъекции, воспалительный инфильтрат, отѐкроговицы, помутнение роговицы (табл.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
