Главная » Просмотр файлов » Диссертация

Диссертация (1139568), страница 31

Файл №1139568 Диссертация (Методические основы оценки факторов риска развития аутоиммунных заболеваний кожи) 31 страницаДиссертация (1139568) страница 312019-05-31СтудИзба
Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 31)

Иммуногистохимическая реакцияс использованием моноклональных антител к Ki-67 (clone SP6). III опытнаягруппа. Увеличение ×600183При введении раствора ацетата свинца наблюдался противоположныйэффект. Так, в IV опытной группе, животные которой получали раствор данногосоединения, выявлено статистически значимое снижение ИП эпителиоцитовкожи, в 1,4 раза, по сравнению с показателем контрольной группы. Результатыотдельныхисследований,выполненныхнапримерекультурыклеток,обрабатываемых соединениями свинца [255, 377], также свидетельствовали обингибированииклеточнойпролиферации,что,возможно,обусловленонарушением белкового синтеза [377].Введение мышам II опытной группы раствора сульфата никеля и хелаторажелеза (дефероксамина) мышам V опытной группы значимого влияния напролиферативную активность кератиноцитов не оказало (рисунок 69). Этовозможно, как вследствие недостаточной кумулятивной дозы вводимых веществ,так и объективного отсутствияих влияниянапроцесспролиферациикератиноцитов.Рисунок 69 – Кожа спины мыши, получавшей раствор сульфат никеля.

Ki-67позитивные клетки в покровном эпителии и наружном корневом влагалищеволосяного фолликула. II опытная группа. Иммуногистохимическая реакцияс применением моноклональных антител к Ki-67 (clone SP6). Увеличение×600184В настоящем исследовании установлено, что воздействие солей тяжелыхметалловихелаторовэссенциальных металловприводяткизменениюапоптотической активности эпителиальных клеток кожи экспериментальныхживотных всех опытных групп за исключением I и V опытных групп, животныекоторых соответственно получали раствор сульфата цинка (рисунок 70) идефероксамин.

В коже мышей данных групп показатели ИА кератиноцитов неотличались от таковых в контрольной группе (таблица 29).Рисунок 70 – Кожа спины мыши, получавшей раствор сульфата цинка.Каспаза-3-позитивные клетки в матриксе волосяного фолликула. I опытнаягруппа. Иммуногистохимическая реакция с применением моноклональныхантител к каспазе-3. Увеличение ×600Показано, что результатом введения мышам III опытной группы бихроматанатрия явилось увеличение ИА кератиноцитов в 1,7 раза, что было статистическизначимым по сравнению с аналогичным показателем контрольной группы(рисунок 71).185Рисунок 71 – Кожа спины мыши, получавшей раствор бихромат натрия.Каспаза-3-позитивные клетки в матриксе волосяного фолликула.

IIIопытнаягруппа.Иммуногистохимическаяреакциясприменениеммоноклональных антител к каспазе-3. Увеличение ×600При интоксикации животных II опытной группы раствором сульфата никелябыло выявлено, что ИА кератиноцитов в этой группе статистически значимо, в1,65 раза, превышал аналогичный показатель в контрольной группе. Введениеживотным IV опытной группы ацетата свинца привело к значимому увеличениюпоказателя ИА кератиноцитов в 1,6 раза по сравнению с показателем контрольнойгруппой. Выявленное в настоящем исследовании увеличение ИА кератиноцитовпри введении сульфата никеля, бихромата натрия и ацетата свинца согласуется сданными работ ряда авторов, показавших сходные результаты на примереэпителиальных клеток других органов [291, 350, 417, 474]. Возможно, апоптозявляется способом устранения клеток с поврежденной соединениями токсичныхметаллов ДНК [111, 240].Введение экспериментальным животным VI опытной группы хелатора меди(ТТМ) привело к статистически значимому увеличению ИА в 1,4 раза посравнению с показателем в контрольной группе.

Это противоречило результатамисследования Bustos R.I. et al. (2013), которые сообщили об отсутствии влияния186дефицита меди на запрограммированную клеточную гибель [217]. Однако умышей линии C57BL/6 анаген ассоциирован с меланогенезом, которыйсопровождаетсяклеточнымокислительнымстрессом[349],и,вероятно,увеличивает потребности меланоцитов в синтезе антиоксидантов, таких какCu/Zn-супероксиддисмутаза, где основным кофактором, обусловливающим ееантиоксидантную роль является медь [432].Воздействие ТПЭН на мышей VII опытной группы, привело к увеличениюпоказателя ИА (рисунок 72) в эпителиальных клетках их кожи в 1,46 раза посравнению с аналогичным показателем контрольной группы, что былостатистически значимым.Рисунок 72 – Кожа спины мыши, получавшей ТПЭН. Каспаза-3-позитивныеклеткивматриксеволосяногофолликула.VIIопытнаягруппа.Иммуногистохимическая реакция с применением моноклональных антителк каспазе-3. Увеличение ×600187Полученные данные согласуются с результатами исследования Chai F.

et al.(2000), выполненного на линии эпителиальных клеток человека [354], при этомактивация апоптоза, может явиться следствием снижения внутриклеточнойконцентрации цинка с последующим повреждением митохондрий, активациейкаспаз, в первую очередь, эффекторной каспазы-3 [354, 604], а также истощениемглутатиона и окислительно-восстановительным стрессом [227].Количественной мерой различий пролиферативной и апоптотическойактивности кератиноцитов мышей контрольной и опытных групп явилосьевклидово расстояние (ЕР), рассчитанное с учетом показателей ИП и ИА.

Нарисунке 73 расположение групп определялось нормализованными показателямиИП, отмеченными на оси ординат, и ИА, отмеченными на оси абсцисс.Рисунок 73 – Евклидово расстояние между контрольной и опытнымигруппами188Чем больше евклидово расстояние между группами, тем существеннейразличия между ними по исследуемым показателям. Так, наиболее удаленной отконтрольной группы была I опытная группа, животные которой получали растворсульфатацинка,ЕРмеждуданнымигруппамисоставило2,58.Этосвидетельствует о том, что наибольшее воздействие на анализируемые клеточныепроцессы оказывало введение сульфата цинка, в основном за счет выраженногоувеличения пролиферативной активности (ИП I опытной группы на 83,86% вышеаналогичного показателя контрольной группы). Обратило на себя вниманиенесоответствиевыявленногоуровняпролиферативнойактивностиморфологическим изменениям на светооптическом уровне.

Выше описано, чтопри интоксикации раствором сульфатом цинка, каких-либо структурныхизменений в коже мышей, получавших данный препарат, не было, в то же времяименно при воздействии раствора сульфата цинка был зарегистрированмаксимальный индекс пролиферации и установлены наибольшие отличия отконтрольной группы по данным расчета ЕР.Наиболее близко к контрольной группе была расположена V опытнаягруппа (ЕР=0,79), получавшая дефероксамин, поскольку введение хелаторажелезанеизменилопролиферативнойиапоптотическойактивностикератиноцитов у экспериментальных животных данной опытной группы.Отмечено, что на почти равном удалении от контрольной группы находились IIопытная группа, мыши которой получали раствор сульфата никеля, и IV опытнаягруппа, животным которой вводили ацетат свинца, ЕР составило 2,18 и 2,17соответственно.

Однако вводимые растворы сульфата никеля и ацетата свинцаоказывали одинаковое влияние лишь на апоптоз, что выражалось увеличениемИА соответственно на 65,6% и 62,5% по сравнению с аналогичным показателемконтрольной группы. При этом введение раствора ацетата свинца снижалопролиферативную активность кератиноцитов (ИП IV опытной группы на 29,3%был меньше, чем в контрольной группе), в то время как интоксикация растворомсульфата никеля не оказывала влияния на данный показатель.

Равноудаленнымиот контрольной группы также оказались VII опытная группа, животным которой189вводили ТПЭН и VI опытная группа, животные которой получали хелатор меди(ТТМ). Евклидовы расстояния между контрольной группой и VII опытнойгруппой составило 1,72, а между контрольной группой и VI опытной группой –1,70.

Данные препараты индуцировали апоптоз кератиноцитов. Так, показателиИА эпителиальных клеток кожи мышей VII и VI опытных групп были выше посравнению с аналогичным показателем контрольной группы на 45,62% и 40,62%соответственно. Однако ТПЭН и ТТМ оказывали противоположное влияние напролиферативную активность кератиноцитов. Если введение ТТМ приводило кснижению пролиферативной активности в исследуемом материале (ИП на 39,5%меньше, чем показатель в контрольной группе), то воздействие ТПЭН, напротив,увеличивало пролиферацию эпителиальных клеток кожи (ИП выше, чемпоказатель в контрольной группе на 33,76%).

Следовательно, одинаковыйрезультирующийэффектвоздействиятяжелыхметалловихелаторовэссенциальных металлов, выражающийся одинаковым удалением опытных группот контрольной, является следствием разнонаправленного влияния действующихвеществ на процессы пролиферации и апоптоза кератиноцитов. Евклидоворасстояние между контрольной группой и III опытной группой, животныекоторой получали раствор бихромата натрия составило 2,42, что объяснялосьувеличением пролиферативной и апоптотической активности кератиноцитов кожимышей, которой получали данное соединение.Вцеляхклассификациивводимыхвеществпоихвлияниюнапролиферативную и апоптотическую активность кератиноцитов мышей былпроведен кластерный анализ, в основе которого лежали данные ИП и ИАкератиноцитов животных опытных и контрольной групп.

В разделение накластеры внесли вклад как показатель ИП (F=85,9; p<0,001), так и показатель ИА(F=8,7; p=0,005). Данные показатели в кластерах и контрольной группестатистическизначиморазличалисьмеждусобой:дляпризнака,характеризующего ИП, р<0,001, для признака, характеризующего ИА, p=0,0004.Анализ данных, приведенных в таблице 30, показал, что 1-й кластер,объединяющий три группы экспериментальных животных, получавших ацетат190свинца, дефероксамин и ТТМ, характеризовались низким по сравнению сконтрольной группой ИП, который в 1,37 раза был ниже, чем в контроле, приэтом различий по ИА установлено не было.Таблица 30 – Индексы пролиферации и апоптоза для кластеров иконтрольной группыКластеры/группа1-й кластерИндексы пролиферации, %Индексы апопотоза, %М±m95% ДИp-уровеньМ±m95% ДИp-уровень7,35±0,36,7 – 8,010,0004*4,0±0,323,32 – 4,70,170,00008*4,97±0,164,64 – 5,30,0001**–3,2±0,222,67 – 3,73–2-й кластер14,05±0,57 12,86 – 15,25Контрольная10,1±0,339,39 – 10,95группаПримечение.

* - различия с индексом пролиферации контрольной группы; ** - различия синдексом апоптоза контрольной группыВо 2-м кластере, объединившем четыре группы экспериментальныхживотных, получавших сульфат цинка, сульфат никеля, бихромат натрия и ТПЭН,индексы пролиферации и апоптоза превысили значения аналогичных показателейконтрольной группы, соответственно в 1,39 раза и в 1,55 раза. Возможно, чтоувеличениепролиферативнойактивностикератиноцитов,являетсякомпенсаторной реакцией в ответ на активацию апоптотической гибелиэпителиальных клеток кожи. Графически описанные различия отражены на6,0185,516Индекс пролиферации (%)Индекс апоптоза (%)рисунке 74.5,04,54,03,53,0141210862,52,0123СреднееСреднее±Ст.ош.Среднее±Ст.откл.4123СреднееСреднее±Ст.ош.Среднее±Ст.откл.Рисунок 74 – Диаграммы размаха показателей индекса пролиферации ииндекса апоптоза в кластерах (1, 2) и контрольной группе (3)191Глава 6.

Характеристики

Список файлов диссертации

Методические основы оценки факторов риска развития аутоиммунных заболеваний кожи
Свежие статьи
Популярно сейчас
Почему делать на заказ в разы дороже, чем купить готовую учебную работу на СтудИзбе? Наши учебные работы продаются каждый год, тогда как большинство заказов выполняются с нуля. Найдите подходящий учебный материал на СтудИзбе!
Ответы на популярные вопросы
Да! Наши авторы собирают и выкладывают те работы, которые сдаются в Вашем учебном заведении ежегодно и уже проверены преподавателями.
Да! У нас любой человек может выложить любую учебную работу и зарабатывать на её продажах! Но каждый учебный материал публикуется только после тщательной проверки администрацией.
Вернём деньги! А если быть более точными, то автору даётся немного времени на исправление, а если не исправит или выйдет время, то вернём деньги в полном объёме!
Да! На равне с готовыми студенческими работами у нас продаются услуги. Цены на услуги видны сразу, то есть Вам нужно только указать параметры и сразу можно оплачивать.
Отзывы студентов
Ставлю 10/10
Все нравится, очень удобный сайт, помогает в учебе. Кроме этого, можно заработать самому, выставляя готовые учебные материалы на продажу здесь. Рейтинги и отзывы на преподавателей очень помогают сориентироваться в начале нового семестра. Спасибо за такую функцию. Ставлю максимальную оценку.
Лучшая платформа для успешной сдачи сессии
Познакомился со СтудИзбой благодаря своему другу, очень нравится интерфейс, количество доступных файлов, цена, в общем, все прекрасно. Даже сам продаю какие-то свои работы.
Студизба ван лав ❤
Очень офигенный сайт для студентов. Много полезных учебных материалов. Пользуюсь студизбой с октября 2021 года. Серьёзных нареканий нет. Хотелось бы, что бы ввели подписочную модель и сделали материалы дешевле 300 рублей в рамках подписки бесплатными.
Отличный сайт
Лично меня всё устраивает - и покупка, и продажа; и цены, и возможность предпросмотра куска файла, и обилие бесплатных файлов (в подборках по авторам, читай, ВУЗам и факультетам). Есть определённые баги, но всё решаемо, да и администраторы реагируют в течение суток.
Маленький отзыв о большом помощнике!
Студизба спасает в те моменты, когда сроки горят, а работ накопилось достаточно. Довольно удобный сайт с простой навигацией и огромным количеством материалов.
Студ. Изба как крупнейший сборник работ для студентов
Тут дофига бывает всего полезного. Печально, что бывают предметы по которым даже одного бесплатного решения нет, но это скорее вопрос к студентам. В остальном всё здорово.
Спасательный островок
Если уже не успеваешь разобраться или застрял на каком-то задание поможет тебе быстро и недорого решить твою проблему.
Всё и так отлично
Всё очень удобно. Особенно круто, что есть система бонусов и можно выводить остатки денег. Очень много качественных бесплатных файлов.
Отзыв о системе "Студизба"
Отличная платформа для распространения работ, востребованных студентами. Хорошо налаженная и качественная работа сайта, огромная база заданий и аудитория.
Отличный помощник
Отличный сайт с кучей полезных файлов, позволяющий найти много методичек / учебников / отзывов о вузах и преподователях.
Отлично помогает студентам в любой момент для решения трудных и незамедлительных задач
Хотелось бы больше конкретной информации о преподавателях. А так в принципе хороший сайт, всегда им пользуюсь и ни разу не было желания прекратить. Хороший сайт для помощи студентам, удобный и приятный интерфейс. Из недостатков можно выделить только отсутствия небольшого количества файлов.
Спасибо за шикарный сайт
Великолепный сайт на котором студент за не большие деньги может найти помощь с дз, проектами курсовыми, лабораторными, а также узнать отзывы на преподавателей и бесплатно скачать пособия.
Популярные преподаватели
Добавляйте материалы
и зарабатывайте!
Продажи идут автоматически
6418
Авторов
на СтудИзбе
307
Средний доход
с одного платного файла
Обучение Подробнее