Диссертация (1139568), страница 30
Текст из файла (страница 30)
Гиперкератоз, мелкиесальные железы. VI опытная группа, 9-е сутки после индукции анагена.Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение ×300173Структурных изменений в волосяных фолликулах животных VI опытной группыустановлено не было, – выявлялись узкие дермальные сосочки, гранул меланинавне зоны матрикса не определялось (рисунок 58).Рисунок 58 – Кожа спины мыши, получавшей ТТМ. Волосяной фолликул сузким дермальным сосочком.
VI опытная группа, 9-е сутки после индукциианагена. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение ×300Проведенный модельный эксперимент показал, что в коже животных VIIопытной группы, получавших хелатор цинка (ТПЭН), на 9-е сутки послеиндукции анагена наблюдалось неравномерное увеличение клеточных слоевпокровного эпителия, достигающего 4 – 5 рядов против 2 – 3-рядного эпителия вконтрольной группе, т.е. имел место гиперкератоз покровного эпителия иволосяных воронок. Отмечено, что сальные железы были многочисленными,крупными и многоклеточными (рисунок 59), определялись расширенные протокисальных желез (рисунок 60).174Рисунок 59 – Кожа спины мыши, получавшей ТПЭН.
Многочисленныегипертрофированные сальные железы. VII опытная группа, 9-е сутки послеиндукции анагена. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение ×300Рисунок 60 – Кожа спины мыши, получавшей ТПЭН. Многослойныйпокровныйэпителий.Гиперкератоз,гиперплазиясальныхжелез,расширение протоков сальных желез. VII опытная группа, 9-е сутки послеиндукции анагена. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение ×300Волосяные фолликулы, соответствующие позднему анагену, в коже животных VIIопытной группы имели признаки дистрофических изменений: их дермальные175сосочки были отечны, содержали эктопированные гранулы меланина (рисунок61).Рисунок 61 – Кожа спины мыши, получавшей ТПЭН. Отечный дермальныйсосочек, эктопия гранул меланина в дермальный сосочек. VII опытнаягруппа, 9-е сутки после индукции анагена.
Окраска гематоксилином иэозином. Увеличение ×600Проведенное исследование позволило выявить характерные для каждого изхелатирующих агентов изменения в коже животных на 19-е сутки последепиляции. Так, в коже мышей V опытной группы, получавших дефероксамин,обратили на себя внимание немногочисленность сальных желез и фибротическиеизменения в дерме.
При оценке соответствия светооптических признаков стадиицикла фолликула волоса были установлены признаки, свидетельствующие остадии позднего катагена, об этом свидетельствовали наличие капсулы зародышаволоса, тяжа эпителиальных клеток и компактного шаровидного дермальногососочка (рисунок 62).176Рисунок 62 – Кожа спины мыши, получавшей дефероксамин. Фибротическиеизменения в дерме. V опытная группа, 19-е сутки после индукции анагена.Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение ×150В коже мышей VI опытной группы, получавших хелатор меди (ТТМ),структура покровного эпителия не отличалась от таковой у мышей контрольнойгруппы.
В дерме наблюдались мелкие сальные железы, вместе с тем, обратило насебя внимание значительное снижение объема подкожной клетчатки, котораябыла представлена лишь небольшими скоплениями адипоцитов (рисунок 63).Возможным объяснением этому является то, что медь обладает адипогеннымэффектом [247, 562] и необходима для ангиогенеза [281]. Недостаток меди,обусловленный введением ТТМ, вероятно, приводит к нарушению структурнойорганизации жировой ткани кожи.177Рисунок 63 – Кожа спины мыши, получавшей ТТМ. Отсутствие подкожнойжировой клетчатки.
VI опытная группа, 19-е сутки после индукции анагена.Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение ×300Отмечено также, что в коже мышей, получавших хелатор меди, имели местоотдельные увеличенные волосяные фолликулы, а также волосяные фолликулы спродолжающимся меланогенезом, что, вероятно, объясняется задержкой развитиякатагена в некоторых из них (рисунок 64).Рисунок 64 – Кожа спины мыши, получавшей ТТМ. Гигантский волосянойфолликул. Гранулы меланина в матриксе волосяных фолликулов.
VIопытнаягруппа,19-есуткипослегематоксилином и эозином. Увеличение ×600индукциианагена.Окраска178На 19-е сутки после индукции анагена в коже животных VII опытнойгруппы, которым вводился хелатор цинка (ТПЭН), отмечено неравномерноеуменьшение слоев клеток покровного эпителия до 1 – 3-х рядного, сглаженнаяэпидермо-дермальная граница, уменьшение клеточного состава и количествасальных желез, фибротические изменения в дерме (рисунок 65).Рисунок 65 – Кожа спины мыши, получавшей ТПЭН. Сглаженная дермоэпидермальная граница, фиброз в дерме. VII опытная группа, 19-е суткипосле индукции анагена.
Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение×300Стадия развития волосяных фолликулов на 19-е сутки после депиляции уживотных, получавших ТПЭН, соответствовала позднему катагену (рисунок 66).179аbcРисунок 66 – Кожа спины мыши, получавшей ТПЭН.
Соответствие стадииволосяного фолликула: кератинизированный волос (а), капсула зародышаволоса (b), тяж эпителиальных клеток (с). VII опытная группа, 19-е суткипосле индукции анагена. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение×3005.4. Особенности пролиферативной активности и апоптоза кератиноцитов вкоже мышей линии C57BL/6 при воздействии солей тяжелых металлов ихелаторов эссенциальных микроэлементовОпределениеособенностейклеточнойпролиферациииапоптозаэпителиальных клеток кожи и ее производных проведено на основаниирезультатов иммуногистохимического анализа образцов кожи мышей линииC56BL/6, получавших соли тяжелых металлов и хелаторы эссенциальныхмикроэлементов.Оценкупролиферативнойиапоптотическойактивностикератиноцитов выполняли путем расчета индекса пролиферации (ИП) и индексаапоптоза (ИА).Анализ данных, приведенных в таблице 29, показал, что введениеэкспериментальным животным I опытной группы сульфата цинка привело к180увеличению ИП эпителиальных клеток кожи в 1,8 раза по сравнению споказателем контрольной группы (рисунок 67).Таблица 29 – Показатели пролиферативной и апоптотической активностикератиноцитов мышей контрольной и опытных группИндексы пролиферации (%)ГруппыИндексы апопотоза (%)М±m95% ДИp-уровеньМ±m95% ДИp-уровеньКонтрольная10,1±0,339,39 – 10,95–3,2±0,222,67 – 3,73–I опытная18,57±0,3417,68 – 19,40,002*4,4±0,323,56 – 5,240,03II опытная11,48±0,2510,82 – 12,10,025,3±0,214,79 – 5,870,002*III опытная12,65±0,2911,89 – 13,40,002*5,5±0,224,92 – 6,070,002*IV опытная7,14±0,216,55 – 7,720,004*5,2±0,374,16 – 6,230,006*V опытная8,7±0,298,02 – 9,540,032,5±0,221,92 – 3,070,04VI опытная6,11±0,145,74 – 6,480,002*4,5±0,223,92 – 5,070,008*VII опытная13,51±0,1513,23 – 13,70,002*4,66±0,33,8 – 5,520,008*Примечение.
* – p<0,01.Рисунок 67 – Фрагмент кожи спины мыши, получавшей раствор сульфатцинка. Экспрессия ядерного белка Ki-67. Иммуногистохимическая реакция сиспользованием моноклональных антител к Ki-67 (clone SP6). I опытнаягруппа. Увеличение ×600181Полученные результаты, свидетельствующие об увеличении пролиферативнойактивности кератиноцитов у экспериментальных животных, получавших сульфатцинка, согласуются с результатами, полученными Kang X.
et al.(2008) напримере гепатоцитов мышей [606]. Они объясняются тем, что цинк являетсяструктурным и функциональным компонентом факторов транскрипции ивнутриклеточного сигнального пути, связанного с регулированием клеточнойпролиферации [605]. При этом оптимальный рост и функции клеток возможны впределах узкого диапазона концентраций внутриклеточного свободного цинка[607].Аналогичный результат получен у экспериментальных животных VIIопытнойгруппы,получавшиххелаторцинкаТПЭН.ПоказательИПкератиноцитов у мышей данной группы был статистически значимо, в 1,3 разавыше, чем показатель контрольной группы.
Полученный результат противоречитимеющимся в литературе сведениям, показывающим, что обработка клеточныхкультур ТПЭН ингибирует клеточную пролиферативную активность [485, 516].Выявленные различия по данным, полученным в модельном эксперименте наживотных и на примере культуры клеток, вероятно, объясняются возникающимив организме адаптивными реакциями в ответ на изменение внутриклеточнойконцентрациицинка,которыеневозможнывклеточныхкультурах.Предполагается, что цинк и медь при дефицитных состояниях могут статьфункциональной заменой друг друга [227]. Возможным механизмом стимуляциипролиферации эпителиальных клеток кожи при введении мышам ТПЭН являетсякомпенсаторноепоступлениемедивэпителиоцитыкоживответнавнутриклеточный дефицит цинка, формирующийся при введении хелатора этогометалла. При этом, вероятно, медь стимулирует пролиферацию клеток, активируямедь-зависимые транскрипционные факторы [188], в частности, Atox-1 [414, 425].Введение экспериментальным животным VI опытной группы ТТМ привелок значимому снижению ИП, который был в 1,6 раза ниже, по сравнению споказателем контрольной группы.
Возможным объяснением является то, чтонизкие внутриклеточные концентрации меди приводят к удлинению периода182пролиферации клеток, и в ряде случаев несовместимы с пролиферативнымпроцессом [188].Значимое влияние на пролиферативную активность кератиноцитов оказалвводимый мышам III опытной группы бихромат натрия. У экспериментальныхживотных данной группы было отмечено увеличение ИП эпителиальных клеток висследуемом материале в 1,26 раза по сравнению с показателем контрольнойгруппы, что было статистически значимо (рисунок 68).
Это согласуется симеющимися в литературе сведениями об увеличении пролиферативного ответаэпителиальных клеток, выстилающих дыхательные пути мышей, подвергшихсявоздействиюрастворахроматацинка[390].Возможно,чтоактивацияпролиферации носит компенсаторный характер в ответ на повреждениеклеточных структур, ДНК и нарушение клеточного цикла, к которым приводитпоступление в организм солей хрома [390, 544].Рисунок 68 – Фрагмент кожи спины мыши, получавшей раствор бихроматнатрия. Экспрессия ядерного белка Ki-67.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
