Н.А. Юрина, А.И. Радостина - Гистология (1135282), страница 8
Текст из файла (страница 8)
П р и г о т о в л е н и е р а с т в о р а. В 100 мл горячего 70/о спирта растворяют 2 — 3 г судана 1П, охлаждают и фильтруют. Методика окраши ванна: 1) срезы из дистиллированной воды переносят в 50'/~ спирт; 2) помещают в раствор судана 111 на 20 — 30 мин в закрытом сосуде; 3) ополаскивают в 50'4 спирте; 4) ополаскивают в дистиллированной воде; 5) окрашивают ядра гематоксилином (без последующей дифференцировки); 6) промывают в водопроводной воде 10 — 20 мин; 7) заключают в глицеринжелатину (см.
главу 21). Р е з у л ь т а т: жир окрашивается в оранжевый цвет, ядра синие. Метод выявления дегидрогеназы янтарной кислоты (сукцинатдегидрогеиазы). Из свежевзятого материала приготовляют криостатные срезы нефиксированной ткани. Срезы либо прямо переносят в инкубационную среду, либо наклеивают на предметное стекло и реакцию проводят на стекле. Приготовление инкубационной среды: соединяют 0,1 мл 0,1 М раствора ХаН РО4, 0„4 мл 0,1 М раствора )ча НРО4, 2,5 мл 1,69'/о зз ХаС1, 0,1 мл 1,15% раствора КС1, 0,05 мл 1,22% раствора СаС~, 1 мл 1% раствора неотетразолия и 1,4 мл 0,1 М (1,б4%) раствора сукцината натрия (янтарнокислого натрия). К раствору сукцината натрия предварительно прибавляют ХаОН, доводя рН до 7,5 — 7,3. Методика проведения реакции: 1)замороженные срезы переносят в инкубационную среду и выдерживают в термостате при 37 ' С 20 — 120 мин; 2) ополаскивают дистиллированной водой; 3) фиксируют в 4'/~ нейтральном формалине в течение 30 мин; 4) ополаскивают дистиллированной водой; 5) заключают в глицерин-желатину, Р е з ул ь тат реакции: при высокой активности сукцинатдегидрогеназы продукт реакции окрашен в сине-фиолетовый цвет, при меньшей активности — в красновато-фиолетовый.
Выявление АТФазы ио методу Вахштейна — Мейзеля. Применяют замороженные срезы нефиксированной или фиксированной в холодном ацетоне ткани. Инкубационная среда. Растворить 25 мг двунатриевой соли АТФ в 20 мл дистиллированной воды, добавить 20 мл 0,2 М трис-буфера (РН 7,2), 1 — 3 мл 2% раствора нитрата свинца 1РЬ(ХО ) ], 5 мл 0,1 М раствора сульфата магния (МйбО ) и долить 2 мл дистиллированной воды. Если нужно, отфильтровать, довести рН до 7,2 (инкубационную среду готовить перед употреблением и добавлять ингредиенты в указанном порядке). Методика проведения реакции: 1) помещают приготовленные срезы в инкубационную среду на 10 — 60 мин при ЗT С; 2) тщательно промывают в нескольких порциях дистиллированной воды; 3) обрабатывают раствором желтого сульфида аммония в разведении 1:50 в течение 2 мин (появляется темно-коричневая окраска среза); 4) быстро ополаскивают в дистиллированной воде; 5) заключают в глицерин-желатину или после обезвоживания в бальзам.
Р е з у л ь т а т: места АТФазной активности окрашены в коричнево-черный цвет. !1. ОБЩАЯ ГИСТОЛОГИЯ Глава 4 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ТКАНЕЙ Ткани появляются в многоклеточных организмах и представляют собой следующий за клеткой более высокий уровень организации живой материи. Основными элементами тканей являются клетки и их производные — неклеточные структуры. Образование тканей — г и с т о г е н е з — происходит у человека и животных в эмбриональном периоде из зародышевых листков — эктодермы, энтодермы, мезодермы, а также мезенхимы.
Гистогенез — сложный процессе, включающий размножение клеток, их рост, дифференцировку, разрушение, миграцию и межклеточное взаимодействие (интеграция). Ведущими компонентами гистогенеза, определяющими специализацию тканей, являются дифференцировка и взаимодействие. Диффереицировка — основной закон индивидуального развития, согласно которому из гомогешюго и общего возникает гетерогенное и частное. Дифференцнровка определяет разделение функций между частями организма.
В основе дифференцировки лежит дифференциальная активность генов, при этом происходит блокирование отдельных компонентов генома клетки и ограничение потенций. Если исходная клетка — зигота и формируемые из нее бластомеры тотипотентны, т. е. из них может развиться целый организм, то клетки последующих стадий развития теряют эту способность, дифференцируются. В составе зародышевых листков— эктодермы, энтодермы, мезодермы образуются стволовые клетки (СК), которые могут дифференцироваться в различных направлениях и, таким образом, являются полипотентныии.
Оии могут давать начало более дифференцированным, так называемым полустволовым клеткам с более ограниченными возможностями развития и далее — уншютентным клеткам, развивающимся в одном направлении, специализирующимся в определенный тип клеток (мышечные, нервные и др.). Таким образом, процесс дифференцировки тканевых клеток, начиная от стволовых, проходит ряд последовательных стадий. Дифферон — последовательный ряд клеток, развивающихся из общего предшественника. В образовании конкретной ткани могут участвовать несколько различных дифферонов, которые взаимодействуют и объединяются для выполнения важнейших функций организма.
Взаимодействие клеток в формирующейся ткани может 37 быть контактным или дистантным (с помощью выделяемых клетками веществ). Ткань — это возникгиая в фило- и онтогенезе система клеток и их производньгх, обьединившихся и специализировавшихся для выполнения важнейиигх функций организма. В процессе жизнедеятельности тканей часть ее элементов отмирает и на смену им возникают новые элементы. Естественный процесс восстановления тканей и органов называется ф и з и о л о г иче с ко й ре генерацией.
При повреждении тканей имеет место р е п а р а т и в н а я р е г е н е р а ц и я. Источником развития новых клеток являются спюловые или полустволовые клетки или малодифференцнрованные предшественники. У различных тканей процессы регенерации имеют свои особенности, которые будут рассмотрены при изучении определенных видов тканей. Существуют различные классификации тканей. Согласно морфофункциональному принципу, где за основу взяты особенности строения и функции тканей, различают 5 групп тканей: 1) эпителиальные ткани; 2) кровь и лимфа; 3) соединительные ткани; 4) мышечные ткани; 5) нервная ткань.
Эпителиальные ткани обеспечивают барьерные и секреторные функции. Кровь, лимфа и соединительные ткани составляют группу опорно-трофических тканей или тканей внутренней среды, обеспечивающей поддержание гомеостаза организма. Мышечные ткани обеспечивают подвижность тела и его частей, нервные ткани— взаимодействие организма с внешней средой, регуляцию и интеграцию деятельности всех органов. Существует также генетическая классификация тканей, учитывающая их происхождение из общего эмбрионального зачатка— эктодермы, энтодермы, мезодермы, мезенхнмы. Глава 6 ЭПИТЕЛИАЛЬНЫЕ ТКАНИ Эпителиальные ткани покрывают поверхность тела (кожа) или внутренние поверхности органов (желудок, матка, мочевой пузырь и др.), поверхности серозных оболочек (брюшины, плевры, перикарда) и образуют железы (печень, поджелудочная железа, слюнные железы и др.).
Поэтому различают два основных вида эпнтелиальных тканей — покровные и железистые. Эпнтелиальные ткани развиваются из всех зародышевых листков — эктодермы (например, эпителий кожи), энтодермы (эпителий желудка, кишечника, печени, поджелудочной железы, легких), мезодермы (эпителий почек, половых желез, серозных оболочек). Строение различных видов эпителиальных тканей значительно варьирует, однако имеется ряд общих признаков, характерных для всех видов эпителия: 1) эпителиальные клетки объединяются и 38 образуют пласты, лежащие на границе с внешней средой с одной сгороиы и соединительной тканью — с другой; 2) эпителиальный пласт всегда лежит на базальной мембране, озтраничивающей его от подлежащей соединительной ткани; 3) между клетками отсутствует межклеточное вещество, хорошо развиты разнообразные межклеточные контакты; 4) выражена полярная дифференцнровка клеток, т.
е. различия в строении их апикальной н базальной частей (полюсов); 5) в эпителии отсутствуют кровеносные сосуды н его питание осуществляется путем диффузии веществ из сосудов, расположенных в подлежащей соединительной ткани; 6) эпителиальные ткани обладают высокой способностью к регенерации.
СТРОЕНИЕ И ГИСТОФИЗИОЛОГИЯ ПОКРОВНЫХ ЭПИТЕЛИЕВ По строению различают несколько видов эпителия в зависимости от числа слоев клеток, лежащих на базальной мембране (однослойные и многослойные) и от формы клеток (плоские, кубические, призматические) (рис. 12,А,Б). Классификацию покроввых эпителиев по этим признакам можно представить в виде следующей схемы (схема 3).
Однослойные э лите пни характеризуются тем, что все клетки своими основаниями (базальная часть) лежат на базальной мембране, а их апикальная часть (верхушка) образует свободную поверхность, обращенную во внешнюю среду (см. рис. 12,А). В однорядных эпителиях клетки, как правило, однородны, имеют одинаковую высоту. Однорядные эпителия бывают плоскими, кубическими, призматическими. В многорядных эпителмях клетки, хотя и лежат на базальной мембране, имеют различную высоту и форму, вследствие чего их ядра лежат на различных уровнях, образуя несколько рядов (отсюда термин «многорядный»). Большинство клеток в многорядных эпителиях имеет призматическую форму Однослойный плоский элителий характерен для серозных оболочек (плевра, брюшина, перикард) и называется мезотелием.
С х а м а Э. Морфолопссескал классификация лоароаных мналхаанвй, Чмаасичеома 1О Б Рнс. 12. Покровные впптелнн (алема). Однослойные (А) н мнопклойные (Б). а — однослойный одворядный плоский; б — одюслойвый одюрядный кубнческнй; в — однослойный одюрядньгй првзматнческийз г — односаояаый многорядный прнзматаческнй реснитчатый; д — многослойный плоский яеорогоаеааиапай; е — многослойный плоск»й оропзюааизввпз м — пеуекодвьй зпителийг 1 — базальюл мембрана; 2 — соеднивтсльяая ткань; 3 — реснитчатые кисею; 4 — асгаяочные клетки; 5 — бокалоаидные кютки; б — батальный слой; 7 — пппмютый слой; 8 — зервючый слой; 9 — блеспвднй слой; 10 — слой плескал клеток; 11 — роговой слой; 12— покроаные клетки.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
