Н.А. Юрина, А.И. Радостина - Гистология (1135282), страница 12
Текст из файла (страница 12)
Дайте характеристику крови как ткани и расскажите о содержании в ней основных форменных злементов. 2. Дайте морфофуикциональную характеристику зритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов. 3. Что такое гемограмма и лейкоцитарная формула? Каковы гемограмма и лейкоцитарная формула здорового человека? 4. Что означают повьппение содержания в крови геморетикулоцитов и сдвиг влево? 5. Из каких компонентов состоит лимфа7 б. Чем отличается змбриональный гемопозз от постзмбрионального? В каких органах они происходят? 7. Какую функцию выполняют Т- и В-лимфоцнты и где они образуются? 8.
Что такое стволовые клетки крови, их роль в гемоцитопоззе и в каком органе они находятся? МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ КРОВИ И КРОВЕТВОРЕНИЯ Взятие крови и приготовление мазка. Для взятия крови используют стерильные ланцетовидные иглы, которые быстрым движением вкалывают на глубину 2 — 3 мм в протертый спиртом кончик пальца. Первую каплю крови стирают, к следующей прикасаются концом обезжиренного предметного стекла.
Затем предметное стекло с каплей крови помещают на стол таким образом, чтобы конец стекла с каплей бьш справа. Шлифованное покровное стекло ставят слева от капли под углом 45' к предметному стеклу и слегка пошеве- 53 ливают, чтобы капля растеклась вдоль покровного стекла. Тогда легким равномерным движением покровного стекла справа налево по предметному стеклу размазывают каплю крови. Красный костный мозг у человека берут из грудины шприцем с толстой иглой. У мелких грызунов обнажают бедренную кость, вскрывают ее и добывают кусочек красного костного мозга.
Из костного мозга делают мазки, но в отличие от крови при приготовлении мазка костного мозга материал находится не позади покров- ного стекла, а впереди него„так как размазывание костного мозга требует большего усилия. Мазки высушивают на воздухе и фиксируют в метиловом спирте 3 — 5 мин. Стекла с мазками вынимают из спирта пинцетом и ставят вертикально на фильтровальную бумагу для высушивания.
Окрашиваиие мазков крови и красного костного мозга по Романовскому — Гимзе. Продажную краску Романовского — Гимзы разводят из расчета 2 мл краски на 23 мл дистиллированной воды. Фиксированные мазки помещают на две стеклянные палочки, положенные параллельно друг другу, заливают краской и оставляют на 30 мин. Далее краску смывают с мазка водопроводной или дистиллированной водой. От водопроводной воды мазок может слишком посинеть, а дистиллированная вода при длительном промывании смывает краску, поэтому лучше быстро смыть краску дистиллированной водой. Мазки высушивают на воздухе. Далее их можно исследовать с иммерсией, не заключая в бальзам. В случае необходимости высушенные мазки можно заключить в бальзам. Р е з у л ь т а т: ядра красновато-фиолетовые, зернистость эозинофилов розовая, зернистость базофилов красно-фиолетовая, зернистость нейтрофилов бледно-розовая, цитоплазма лимфоцитов голубая, цитоплазма моноцитов серовато-голубоватая, кровяные пластинки фиолетовые.
Прижизненное окрапшваиие геморетикулоцитов 'бриллиантовым крезиловым синим по Сейфарзу. 1'/~ раствор бриллиантового крезилового синего на абсолютном спирте размазывают тонким слоем по обезжиренному предметному стеклу и высушивают. Затем на подготовленном таким образом стекле делают мазок крови и, не давая ему высохнуть, быстро переносят в хорошо закрывающуюся чашку Петри, обложенную влажной фильтровальной бумагой. Через 5 — 15 мин стекло извлекают и высушивают на воздухе.
Результат о к р а ш и в а н и я: в геморетикулоцитах видны сине-фиолетовые нити и гранулы. После 24-часового высушиванил на воздухе мазок можно фиксировать метиловым спиртом и докрасить по Романовскому — Гимзе. Подсчет леикоцитариой формулы крови. Последовательно продвигая препарат сверху вниз и слева направо, подсчитывают в каждом поле зрения количество лейкоцитов. Каждый лейкоцит отмечается в соответствующей графе схемы палочкой, затем палочки подсчитывают. Общее число подсчитанных клеток должно быть не менее 100. Полученные данные суммируются в каждой бб графе таблицы и производится подсчет процентного содержания каждого вида лейкоцитов, при этом за 100'/» принимают общее число подсчитанных лейкоцитов. Необходимо рассчитать процентное содержание каждого вида лейкоцитов, сравнить их с нормой и оценить обнаруженные отклонения.
Исследование свежих мазков. Покровным стеклом прикасаются к верхушке свежей капли крови, накладывают его на предметное стекло. При этом капля растекается. Для защиты от высыхания покровное стекло окантовывают кисточкой, обмакнутой в расплавленный парафин. Если мазок подсыхает, то дискоциты часто агглютинируются, образуя «монетные столбики». Вен зидиновыи метод выявя еияя перо ксидазы. Этот метод может быть использован в качестве примера выявления активности ферментов в лейкоцитах на мазках крови.
Для фиксации мазков крови можно использовать 10'/» спиртовой раствор формалина 1 — 2 мин (по Грэхему). Приготовление раствора бензидина. 0,5 г бензидина растворяют при встряхивании в 100 мл дистиллированной воды, фильтруют и добавляют 2 мл 1% перекиси водорода на каждые 100 мл фильтрата; 1/» перекись водорода приготовляют, разводя в 30 раз ее 30'/» раствор. Методика проведения реакции: 1)вбензидинперекисной смеси окрашивают мазки 5 — 10 мин; 2) промывают в воде; 3) быстро докрашивают 0,5'/» раствором метилового синего; 4) промывают в воде; 5) высушивают мазки и исследуют с иммерсией или заключают в бальзам.
Р е з у л ь т а т: в местах локализации пероксидазы — желтые или коричневые гранулы, ядра синие. Глава У СОЕДИНИТЕЛЬНЫЕ ТКАНИ К этой группе тканей относятся собственно соединительные, хрящевые и костные ткани. Все они развиваются из мезенхимы и состоят из клеток и хорошо развитого межклеточного вещества. Именно наличие межклеточного вещества является характерным признаком этих тканей и отличает их от других тканей (эпителиальных, мышечных, нервных).
Строение и физико-химические свойства межклеточного вещества, состоящего из аморфного основного вещества и волокон, и соотношение его с количеством клеток различаются в различных видах соединительных тканей и лежат в основе их классификации (схема 5). Рыхлая и плотная волокнистые соединительные ткани различаются степенью развития волокон (в плотной их больше), оформленная и неоформленная ткани имеют различия в характере распо- С и е м а а. Классификации ссединительнъи тканей яв яявцявяьянмя свваятявмя 1) рвяи)верная азярвввя 3) пигиантнвя 4)сииясмя ложения волокон (упорядоченное в оформленной и неупорядоченное в неоформленной ткани).
функциями соединительных тканей являются: 1) опорная или биомеханическая, 2) трофическая, 3) защитная, 4) пластическая (регенерация и замещение дефектов), 5) морфогенетическая — регулирующее влияние на морфогенез других тканей. Более подробно развитие, строение и функция различных видов соединительной ткани будут рассмотрены ниже. СОБСТВЕННО СОЕДИНИТЕЛЬНЫЕ ТКАНИ Волокнистые соединительные ткани Рыхлая волокнистая иеов))овмлеиная соединительная ткань. ' Очень распространена в организме: образует строму большинства органов, сопровождает сосуды и нервы, составляет основу слизистых оболочек, располагается под эпителием, вокруг мьгшечных элементов. Вместе с кровью образует внутреннюю среду организма, в которой совершается обмен веществ между паренхиматозными клетками органов и кровью.
Состоит вз разнообразных клеток и желеобразного межклеточного вещества (рис. 16). Основные функции этой ткани — трофическая, защитная, пластическая, менее выражена опорная функция (образует строму органов). Клетки. Основными клетками являются фнбробласты, макрофаги и тучные клетки. Кроме того, встречаются жировые клетки (адипоциты), пигментные, плазмоциты, лейкоциты, перипдты и эндотелиоцнты. Ф и б р о б л а с т ы — наиболее многочисленные клетки, образуются из стволовых клеток костного мозга.
Основная их функция — синтез и секрецня специальных белков и углеводов, из которых образуется межклеточное вещеспю, в том числе волокна (лат. 58 Рис. 16. Строение'рыхлой огединнтельной ткани (схема). 1 — фнбробластс 2 — макрофаг; 3 — наанощит; 4 — тучная клетка; 5 — ламфоцнт; б — нейтрофлльнмй гранулоцлт; 7 — алваоцвт; 8 — ацтотелвоцвт; 9 — нернцнт: 10 — аавентацлвлана» клетка; 11— коллагеноаое волокно; 12 — влаогнческое волокно.
ВЬ|а — волокно). Для структуры функционально активных фибробластов характерна отростчатая форма, наличие овальных ядер с дисперсным хроматином и хорошо выраженными ядрышками, в цитоплазме хорошо развит синтетический и секреторный аппарат— гранулярная эндоплазматическая сеть и комплекс Гольджи (рис. 17,А,Б).
Фибробласты продуцируют белки — тропоколлаген (из него формируется основная часть коллагеновых волокон), эласлуин (формирует эластические волокна), фиброиектин, а также углеводы — гликозаминоглнканы (ГАГ), которые выделяются из клетки, и вне клетки происходит формирование межклеточного вещества с волокнами. В соединительной ткани всегда присутствует некоторое количеспю более молодых форм фибробластов (мало- дифференцированные, юные), а также стареющие формы (фиброциты).