А.Г. Глебович, А.А. Каменский - Фундаментальная и клиническая физиология (1128368), страница 94
Текст из файла (страница 94)
16.21 ил<иосгрнруст зффск< механического возлсйггпия из катиоисглсктивный МСК путом )ъииьи><иия ла>$3>синя н )ю1СЬ-$$иис>кс (Яи(>ОН) В конфигурац!ш ссП-а<(асЬс<1. Из рисунка слслуст. что у>клич('ниг отрицат<лы>ОГО даплсиия, В<д)!И(с к )'н<- личсиик> из> иба мсмбр!шы, 1>рп под>п к увслнчсни к> Вс роятиости открыт>ш МСК. н) рсгистрация актишикти олииочиыл кана:и>в в коифигурацни ССП-зпасйг(1 ра(( Ь иа фоне раздувания клстки иосрслсття)м п>потоничсск<иоггрсссз(зм(П>и((), ириклаль<взсмого к цслой клетке: г) рсгистрация акпи>ности олииочиых кзиачов в коифн!урзции ссП-зи(н Ь<ч1 ра<сЬ при рзстяж! нии целой клстки.
2. Изучснис токог>, гскуи<их '<срсз мсхзиосснситивиыс каиаль> н конфигурации и Ьо1г-гсП: а) ирямос м< хан ичсскос рзстяжсиив ктстки. т.с. увслич<иис 1(атяжгния сс мсмбрзиы: б) разлувшш< клетки иосрсл<пном подачи внутрь ра<СЬ-пино) ки положитсльного п!дро<'тзтичгского лавлсиия в конфигурации НЬо!С-сгй, в рсзульипс чсго >,лет ка увсличива< т объсм за счс! ввслсиио>о в нос ра(- твора из ра!гЬ инистки (шйайоп), или осмоп>чсскос разлунзии< клстки прн иримсисиии гши>то>шч<ск(но рзс пюра в псрфузиониой камере н рсзулш;и(' чего клетка тдеж(- увслн 3>и>аст Объсм (зм < П! Ня). 3. И>уясни( кчониропаниых кшшлов.
встросшизх в бнслой. зиник омы изш сисцифичггки создзши,и' мсмбрш>иы< выпячивания (Ь)сйч) ггруктуры. В которь>х разрушен цито(.к<"лет: а) изучш>и<' пстросниого о.шиосомы лкхзиоссиси)ивиого канала Ь!М1, ки>нирокаииоп> и> 1>м)нпсЬ!а со)3; б) иг>у и ниг ш"!рос>пиит> н >шоскии бислой ка>шла ЕХЗС >иппглиально>о Ха'-кшшла: в) изучсшц ш трогпиого и ( исцнфичгски <т>здаиньн химбра>шыс нь>иячшшния мсхзиоссиситишиио ка>ища Мчс)., клониров:винно из ! ьсй(п< Ь>з сой. Поглслопзчсльио рассмотрим розу.и таты зкпн"ри. м<'33тОВ, Вьи>Оли('н>1ых (' и)н1мсн(и>и'м м<тодон Науч(' ния ОЛИНО шых к ишл(и3 и то!Ии> коиф$>гурации ))'Ьо)('- < сП ири мсхзничгской ггимуляиии.
Изу и иис кг>о. ииропш(иых ка(ш.швосушсстштя<чся ио гсм ж( Ории цинам. 234' РАЗДЕЛ И. Общая фнзноиогня возбудимых тканен 16.5.2. Изучение одиночных каналов Р нтмнтрим, кзл В. Иин'г )шилсн)ил прил(3>к('ниос 'и' рсз рз<< Ь нине>ку х мембран ири рсги<праиш;щ>ПВ- ш>с ! и олниочиь>х кащ юн и конфигурации ссП-зцзгй<»1 ра(сй. Регистрация однночных МСК ирн помощи данленн)1, Приложенного че!н.'з рагсЬ-ини(тк)1 Актпщн)<'гь олшн>чш>го МСК, и иииясм>ло путем пр!ь>ож(ии)! к мембран чс!Нз рз! гй-ш!П(тку <нриизтслыпно л ал<' ННЯ (Янс!П>и),.нтко нлшпифш<!Пю>цп>ч иотомУ что возиика< г йьн"грый о!.В< !. !)Гиы н!о Пали ряхп лзялеиис В ниигткс, лота нно В кзжлом глучщ <.озласт разнос лзнлсшн кзк из мсмйр шу, !зх и из цитогкслст, и з»и Вгличины пг инке>иы. Даплсн!н н ниисгк( нс лат ииформаи!и о даю< нии из мсмйра>у, тал кзн имсиг место гаи( иис ланл< и>ш из зз ш ттпо Нкпо каин »ляриого лзнлгпия, Вьногы колонки жидкости н.и! Ногреншос>п> ишочника лзнл(иия.
Таким (бр>к>ол!. р<зльпый фактор, Возле>н'тз) книий нз М('К, зто наяжги!и' м< мйрзиь<, кон>р(х яячяс>гя функцией дашсння В ишнткс и радиуса нскринлсння мсмйрзиы, з и( !Пх>сто Приложении>е х ией лзнлсннс. Спязь натяжения мемГ>раны кзк функции язвления В ра(сй пине>кс и рзлиуса искривления м(мйрзнь> сложно знал!ыирозаты В изгтоящсс Время нс сущ(- г>пуст никакого щннойз оирслслить искризлсни( мсмйрзиы Г>(;! Ншн>срслс)п)гииой Визуалпзашн н измерения пч>мггрии фрзгме!пз мембраны иол ра(сЬ- ИИИС! Кой 11ролсмоп<прирошшо, что приложенное лзюн ине щ личиной !О мм рт. ст.
молин ирозуцир(нить натах(- инг мембраны порядка 3,9, 2.9, 1,8 нлн 1,2 3!Нн,)сл> В запнси мое ! и от радиуса зоны нол ра! сЬ-шн >сткой, р !нного 3, 2. 1, 0,6) мкм гооп>стстщ'иио. Однако радиус кончика шшеткн — не лучший ш>- дикатор радиуса искшин ния, поскольку В конфш урации ссП-а! (зсЬей мембрана ззиечзтывает не только кончик рз(сй-иии(тки, но и от>н>сн»(льно глубоко В иес Входит.
Таким образом, зна штсльным доиушспнем является то, ч»ю форма мембраны на кончике РВИСЬ-иипгткн — идеальная полусфера. Сф(рнчсгкая область В ран.й-иипеткг исто Возникает очень далеко От (( кончика, так что Вся зона мембраны, запс итаншсй рагсЬ-Пни<и ку, имсгг Й-<К>!)ззиую форм) с длинной прямой частью мембраны, изхолящейгя в тесном и прямол! ко>пакте со стекла!шой стенкой рагсЬ-пипетки. Преимуп<сствснно зта прямая часть мембраны и есть сторонз П!Пз ьеа). Избл!олсння я световой мнкр(ккоп. также как и в электронный микроскоп, Выязнлн цитоплазмзтин скис н цнтосксл<.-гиые структуры Внутри рагсЬ-пи! <С31(Н.
Вьшокорззрсшакиизя микроскопия иоказынаст, что созлзнне о»рнцательиого давления В ра(сЬ-ииисткс иропориионально уя()лпчнВзсг В и(й зон)' мембраны. Таким образол<. гфсра В кончике ра(сйшшс» ки уз< лнчинзстся ири по пи Постоянной м(мб- раин>й толщшн. Соапктстисиио, у!нянчение В>и>- нгрхиогти .пой зоны В течение рзстяжгина ис обуглоалелио мсмйрзнныл! утоичсшим, з .шянсит от ир!пока лиш!Лон, ио(туиающих от степки ра(сЬ. шин"тки.
Реп(страцня активности одиночных каналон в конфигурации )уЬо)с-сеП от маленьких клеток. Исс. И.<о[юниз Вс»нчипы !ип>жсн>и! мсмй!щиы мзлсиь> их кзк' ток и конфигурации и Ьо!(-с( П В занигимош и ог созданного и ии!Нтке лзнлсння о< но(3!Ль»!лис! Нз ирслсинлсини, свящпиом с .>книнзл( ит!Икпю п!лр<н»(пи нтко>о ланлеш>я и пзтяжгния лнмйрзны.
У тонкое!Синых сфер 3 илростъп нч(гкос лазл< нис (Р) и нз! яжспис стенки (Т) связаны.щлоиом Лаилзгз, !Л< (!, диаметр сферы: Т=.— '. Р(7, (16.1) !1;>учсиис лаял( пия В >Н1Н( >кс >н) о!н(3>пени!о к иатялцишо мсмбрзнь> было ирощлсно и конфи!урашш ТСЬой -ссП иа сфсробластзх дрожа<( й рз.>(! и >и ых размероя. В то Время как крнззя Всчичи!ш! мслаиос(нгн» НВ>нно тока ио отионн ник) к ирнло>ксш!ому и ниистку давлению показы наст четку!о зависим(>г гь от днам("г ра сф( ройлаш а.
крш)ыс »окз но оп аннин к) к натяжения> (рзссчитзниые ио закону Лзилзса) были (и записимы <и. !<Пал>('!Пз. Регистрация одн>ючнь)х МСК на фоне раадування клетки иосредствол! гниотоннческого стресса. Если МСК идниот р(ип н регуляции объема клетки, тОГДЗ РСЗОИИО СПРОСИ Г>ь 6УДУт ЛИ ФИЗИО. ЮГНЧССКНС ИЗ- мснсшш В ойьсм< кле! кн нролуиироязть лошъпочнос натяжение мембраны. ч!ойь! зклпви!инзть ЫСК. Хотя м!Ин»н тины клеток мсияп>г )итяж< н!и м< мбрзны ирн гииотоничсском с»рсссе, Возможно применить закон Лапласа (см. уравнение ! 6.! ) и гч!пать, чж> мембрана ирслстанляет собой илгальиу>о:)ласти илгкук> снстсл!у.
В зтом случае лопозиптсльнос нляжеиис мел!йра. иы ири ссП-3!((з<ЬС(! рз(сй (()7). которое агсоиннругп ся < о! носи»сльным уаелич< !Ин м птн рх>пх тиой зонь! рагсЬ 7)Л,>Л, может йьп ь опнса<о нз оснонзипн ириме— НШИ<Я ЗЗКОНЗ ГУКЗ: ЬТ= К,(АЛ,'("!), (! 6.2) (лс К„. злас! 1!чсгкий ю) х)х)>ици< и !. 1!олойиыл> образом кл(тки, которыг ) Вслнчизакн спою пощ рхиос гь При гииотоннчегком с»рсс(ю, могут )'Всли )и!3>п1 !итяжши1<' мсмйр)!Пы Рзсч(гп 3 пОказали.
'!то нз!Ял(сн3и' лнморд31ь> юиткн н 0,009 лин,'гм, которос нозннкаст ирн увели ниии объема клс» кн на 1 ".ь, лиикст йь!ть Лостз'п>чным Лля зктннации МОК. Регистрация активности одиночных МСК ирн растяжении целой клетки. К сожзлсшио, пока не,юреги("(риронапз актнни<х»ь елшшчиыл каиана В коифшурашн! Сей-з!(ас)и<!. Вызванная р;и-гяжснисм ц(лой клетки.
1!ри,щиечагынапии м< л>Прап>й с!склянной пи- ГЛАВА 16. Ионные каналы н токи через ннх 335 и< | ки. вилял|о. невозможно,т и .кни | рз1«П и гоиряхи ||- ил|и г и й |н>.|мгл|брзнииги шпигк«лша фили иски Рзг|яиугься ньитгс илзльиой чатио кл<|ки ири сохранилии ссП-а|ас)к<1. 1зю|к| обр;иом, иокз иш визмол<иоши прямо ирш<.идьиитыитяжени< к к.и'|кзм (пии растягинаиш .|з их концы) ири одионр< и< иной рсгнстраиш,ю>п>азана| и МС'К в р< як||хи г< П-з1!зс)те<1 Ра!г)|. О |нико иио|л | во мни| >н> иабл|оип, лся |<ль иогть единичных каналов (с ии.иим !лир«испи«л|) ири регистрации |икин ит м|исньких целых клси>к или вг.
зик< |. 16.5.3.Изучение токов в конфигурации в<г))о!е-се!! О, -0,50 -1,00 1,50 Рнс. 16.22. Кривые, лолученные методом ра|сьчхавр е конфигурации е>ьс!е-се!1 нэ карднсмнсцнте желудочке до (снняя кривая) н после его Растяжеиня (краснея кривая). Растяжение харднсмнацнта приводит к смещению е отрицательную область тока на фоне лсдаержнеа: Емсгс лстенЦнала (лскезэнс стРелкой). Показаны 1.-|нл Са'-тсха (|с„.,) н лсзДнни ток (1,), пРичем ксмлонент еыхсДЯЩегс КЧ|сха е ' лсзднем токе лсдаелен ионами сз'. ыачтск лодавлен лслдержнеаемым не уровне -45 мв потенциалом мембранный лстенцнал смещался ст поддерживаемого лс|енцнала дс О мн (ло каглк|л А, кее1еча 1, !зелье<0 с. 51ге|сь-ас1ыа1ед ссггел<з |и <>ел<лев|а< вуосу|ез евр!ниве але еггьу>ьвсвел>с е!(ес<з |лсгеазе жяь ьурелгсрьу, се><)!с»езси>аг йез 2000, 48, 409 — 420) Прямое механическое растяжение клеток.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
