H. Becker, W. Berger, G. Domschke и др. - Органикум I (1125883), страница 21
Текст из файла (страница 21)
Для этого постепенно добавляют (начиная с 1 — 2%) к применяемому растворителюдругой, расположенной ниже в элюо' 'гропном ряду, и контролируют, элюируется ли из колонки следую' йцее вещество. Этот процесс (разбавление растворителя и элюироМние) продолжают до тех пор, пока из колонки не будут извле- етЕНЫ ВСЕ КОМПОНЕНТЫ, ВВЕДЕННЫЕ С ИСХОДНЫМ РаетВОРОМ.
Примером применения адсорбционной хроматографии является 44звлсчение кофеина из кофе (или из чая) и хроматографическая 4эчистка сырого кофеина на окиси алюминия (нейтральной)". 2.6,3. Тонкоспойная хроматография Тонкослойная хроматография (ТСХ) представляет собой раз44овидность адсорбционной хроматографии.
Разделение веществ происходят на «открытых» колонках, т. е. в тонком слое адсорбента, нанесенного на стеклянную пластинку. Преимуществом ТСХ йгак микрометода является быстрое хроматографическое разделение малых количеств веществ. По приемам работы этот метод бо,лее похож на бумажную хроматографию. В качестве носителя адсорбционного слоя используют плоские 'стеклянные пластины (50)Г200, 200)Г200 мм), в качестве адсорбента — кизельгур илн окись алюминия. Смесь адсорбентов с гип.
„Пом (связывающее вещество) замешивагот с водой и затем ланов См. Солног й. О. Л. С1>еш. Ебпс., 1965, 42, 497. 1О7 2. Способы роза хсн"и "ещ"сгв аторнрю техникр А. Введение в лабо 106 сят на пластины. С целью полученн и активируют при повышенной (1О ность адсорбента увеличивается с в нем Акти ированные ла тины экснкаторе. е '-их Смеси веществ по возможности ров (следует применять неполярныс" ' те У "ие Раствор'теч '). ппоявляюшихся на хооматоОбщее содержание соединений: 'п и помощи п едва нтельного опыта. Слишком высокое содержа Рис разделяемых веществ прнния н к появлению «хвостов» на водит к ухудшению их разделения хроматограмме. увеличение активн' о' ш ны слоя д об рсти и толщины слоя адсообента способствует хо ошему разделс' иию без об азования хвостов т ор ржании веществ в оазделяемон даже при достаточно большом содер смеси, зивы общие соображения, обДля подбора элюентов справсд стных веществ сначала используют 'ол ' р ф "' висимости от полученных результат ов пе еходят далее к поля ным или неполярным рзстворнтелям.
К як и в слччае бумажной хроматографии (табл. 7), тонкослойная тр '" ходящей, нисходящей и раднально1» определяют величины ми всех ДлЯ обРаботки хроматогРаммый 20)]. Восо онзвогтимость знаселяется прежде всею постоянтолщины слоЯ адсорбеита и темпе(о е тен1я степени с целью идентификации веществ, ш "ед леш степени ' оты соединения, об азуюшегося и резу р ' е родность), и для качественного н( " таким образом, практически идентр с бумажной хроматографией обладает не отоР . и с ' Гм~~енными преимуществами: ,и на хооматографнрованне; незначительная затрата времср тосительно малой высоте подъе- более точное разделение при от ма фронта растворителя; лесей, содержащих агрессивные иде тифика я соединений из саесе, содержащих агрессивные реагенты, или из смол; «с аодложкок ка алюмиикеиоя фильм Примеияют также готовые пластии~аптскаемыс а ЧССР фнрмоа Эюа и ги (иапример, силуфоловыс пластиаки, т Каиацет1.
работа с малыми количествами, так как в случае ТСХ концентционный предел лежит на порядок ниже; незначительные потери при разделении смеси веществ в препативных целях в микро- и полумикромасштабах. Прп разделении смеси веществ с помощью ТСХ, проводимой ))Ля препаративных целей, используют адсорбенты с точшиной )' ~доя 0,5 — 2 мм, ТСХ пригодна и для проведеиня предварительных опытов при кроматографическоги разделении на колонке.
Однако необходимо ): : учитывать, что на пластинках эффект хроматографичсского разде' 4ения проявляется более полно, чем в закрытых колонках, Лналогичный эффект разделения в случае колоночной хромато! ' графии достигается прн проведении хроматографированпя с сухим адсорбентом. Хроматографическое разделение смеси соединений 'нроводят на колонке, тщательно заполненной сухим адсорбеитом, Растворителя для хроматографирования подбирают, выполняя ' ' аредварительиыс опыты на пластинах. Растворитель всегда дол- 1 $Ркен покрывать сухой адсорбент на 1 — 2 см (чтобы «догонять» ',3 )движущийся фронт растворителя).
Соотношение между веществом ~ 1р ® адсорбентом должно составлять 1: 300. Разделенные по «зонам» '~ $ 1компоненты злюируются различными Растворителями. Примсикеиие тонкослойной хроматограФии для разделения. При- 1~, )хр )ротовление пластин, Для проведения анализа методом ТСХ удоб' сйо применять готовые пластины. Если таковые отсутствуют, то пх $(~можно изготовить (прежде всего это касается поисковых исследо- .
~ )Ваний н препаративного разделения мнкроколичеств) двумя спосо) .)йамн. Согласно первому способу, адсорбент вместе со связывающим ~; Каешеством суспендируют в хлороформе, наливают суспензию на ' я)ластинку, равномерно распределяя по поверхности. После испа, Рения растворителя (в сушильном шкафу) пластинки готовы к ' потреблению. Согласно второму способу приготовления пластп- ок сухой адсорбент без связывающего вещества равномерно с помощью стеклянной палочки износится на пластинку.
На оба ' а й)онца стеклянной палочки приклеены полоски, толщина которых , коответствует толщине выбрашюго слоя адсорбента (намазывать, (й не раскатывать!). Перед нанесением адсорбент очищают от '„.жрупных частичск, которые при хроматографнческом разделении 1,: ' '. )могли бы давать неровности на поверхности адсорбента, Для этого иадсорбент просеивают в сосуд для хРанения через тонкое сито ~'(капроновый чулок). Преимушество второго метода состоит в от~Футствии экспериментальных трудностей и быстроте прнготовле- ~ ня пластинок, к недостаткам следует отнести малую воспроизво~димость значений )ке. Для нанесения адсорбента на пластинки первым «мокрым» (способом, который из вышеописаных методов является наиболее 109 8.
Определение фазнческик свойств А. Введение в лаборатарнцю тскннкц 108 часто применяемым, суспендируют, например, 25 г адсорбента в 50 мл дистиллированной воды, энергично встряхивают в течение 40 с. Полученную суспеизию наносят с помощью аппарата (ср. рис.
79) на 5 пластинок (200Х200 мм). После того как слой становится матовым (примерно через 15 мпн), пластинки помешают (горизонтально)) для активирования в сушильный шкаф. У Ряс. 79. Прибор для тонкослойной хроматографии. а — вяд сбоку: б — вкд сверлу. Нанесение веи(еетв. Раствор испытуемой смеси наносится на пластинку тонким капилляром иа расстоянии 1 — 2 см друг от друга.
Пятна веществ по возможности должны быть небольшими (диаметр от 2 до 3 мм) и находиться не ближе 1,5 — 2 см от краев пластинки. Аналогично наносится раствор испытуемой смеси веществ и при разделении на пластинках с незакрепленным слоем (адсорбент без связывающего материала, второй способ). На пластинке отмечают нужную высоту подъема фронта растворителя ( 10 см). Для контроля за условиями хроматографированвя ру для сравнения между собой различных пластинок сбоку наносят пятна смесей контрольных веществ.
Эти смеси должны состоять из различных окрашенных веществ, которые легко разделяются при хроматографировании и значения )7р которых расположены в благоприятной области (0,2 — 0,8). Наиболсс часто используют смесь, состоящую из красителей: желтого масляного, судана красного С и индофенола. Проявление. Проявление проводят в плотно закрытой камере, атмосфера которой насыщена парами элюепта. Для более полного насыщения стенки камеры и ее дно оклеивают полосами фильтровальной бумаги и оставляют стоять с элюентом в течение 30 мии. Пластинка погружается в жидкость на 5 — 7 мм. Длн пластннои с незакрепленным слоем применяют плоские камеры (малый угол нахлопа пластинки,поскольку слой не закреплен). Обработка хроматограмм.
Пластинки после хроматографирова. вня высушивают на воздухе. Положение пятен некоторых бесцнетых веществ можно установить при рассмотрении пластинок в 3(с(э-светая, В большинстве случаев удается сделать хроматографнческие пятна видимыми путем обработки их парами подах). Вещество проявляется в виде коричневого пятна или (реже) пр~г длительном действии паров иода в виде белого пятна на темиои фоне. Для проявления хроматограммы применяют, кроме того„ еубработку парами брома, опрыскивание соотаетсгвующими реагеигамиз' (кони серная кислота, хромовая кислота, раствор пермаиганата калия в серной кислоте и др.) или обугливаиие (нагрсвавие пластинки прн 300 — 400 оС).
Пластинки с незакрепленным слоем целесообразно опрыскивать влажными, так как при опрыскивании их н сухом состоянии незакрепленный слой адсорбеита может быть легко разрушен. ,й. Определение физических свойств органических соединений Характеристику органического соединения нельзя считать исчерпывающей, если для него даны лишь элементный состав и молекулярная масса, Для его идентификации необходимо испольовать и другие, прежде всего физические, свойства, важнейшими которых являются температуры плавления и кипения, плотйюсть, показатель преломления, а в определенных случаях также ращение плоскости поляризации света, спектры поглощения и асс-спектры.
Все этн свойства могут одновременно служить и для оценки нтерия чистоты вещества. Вещество можно признать чистым лько тогда, когда физические константы его не изменяются после овторной очистки — перегонки, перекристаллизации, возгонки, Хроматографирования и т. д. и Если примешать к адсорбеиту флюоресцирующий нндииатор, то нее вещества, адсорбнрующие а Уф.области, прн рассмотреиян их в этой области проявляются на флюоресцирующем поле в виде темных пятен (так кап эти йыцеетва гасят флюоресценцню, см.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
