В.М. Глазер, А.И. Ким, Н.Н. Орлова, И.Г. Удина, Ю.П. Алтухов - Задачи по современной генетике (1117657), страница 29
Текст из файла (страница 29)
Мутация с не рекомбинирует с делециями 1 и 2, но рекомбинирует с остальными. Следовательно, она локализована в сегменте А2. 4.Мутация Ирекомбинируеттолькосделецией 7,следовательно она в сегменте Аб. 5. Мутация е не рекомбинирует только с делецией 1, следовательно, она в сегменте А1. 6. Мутациями'не рекомбинирует с 1-5 и рекомбинирует с 6 и 7, располагаем ее в сегменте А5. 7. Мутация я не рекомбинирует с 1-4 и рекомбинирует с 5 — 7.
Локализуем ее в сегменте А4. 'Таким образом, карта района И1 хромосомы фага Т4 выглядит следующим образом: е с а я Е 4 Ъ АЗ А4 А5 А6 В А1 А2 ЗадачаАГе461 Решение 1. Мутация а1 некомплементарна мутации а2, следовательно, обе мутации аллельны и принадлежат к одному гену (обозначим его как ген А1). Мутация а2 некомплементарна также и мутации аб, значит, аб также относится к гену А1. 2. Мутация а 7 некомцлементарна а4, а а4 некомплементарна аЗ, все три мутации находятся в одном гене А2. 3. Мутация а5 комплементарна и а4 (ген А2), и аб (ген А1), следовательно, она представляет третий ген — АЗ.
Вывод: исследованные мутации локализованы в трех генах следующим образом (скобки указывают, что порядок расположения заключенных в них мутаций на карте гена не установлен): ген А1 ген А2 ген АЗ а5 (а1, а2, аб) (аЗ, а4, а7) 171 ЗадачаМ464 а2 3. Мутации а2 и аЗ комплементируют, т. е. относятся к разным генам, то же можно сказать о паре мутаций а3 и а4. Это означает, что а3 не принадлежит ни к гену А 1, ни к гену А2 и, следовательно, может быть отнесена к третьему гену — АЗ. ген А1 ген А2 Ф / / ген АЗ (а1 а4 аб) а2 а3 4. Мутация а5 комплементарна а1 (ген А1) и аЗ (ген АЗ), следовательно, не локализуется ни в одном из этих генов. Остается отнести ее к гену А2. ген А1 ген А2 ген АЗ ('а1 а4 аб) (а2 а5) а3 5. Мутация а7 не находится ни в гене А1(так как она комплементарна аб), ни в гене А2 (комплементарна а5).
Следовательно, она локализуется в гене АЗ. Вывод: семь мутаций локализованы в трех генах следующим образом (скобки указывают, что порядок заключенных а них мутаций на карте гена не установлен): ген А1 ген А2 ген АЗ (а1а4аб) (а2а5) (аЗа7) ЗадачаМ 468 Решение При решении следует исходить из известного факта: если исследуемый мутант растет на минимальной синтетической среде Решение Обозначим три оговоренных в условии гена как А1, А2 и АЗ. По этим генам распределим мутации.
1. Мутации а1 и а4 относятся к одному гену (аллельны), так как они не комплементируют.То же относится и к паре мутаций а4 и аб. Следовательно, а 1, а4 и аб относятся к одному гену — А1. 2. Мутации а1 и а2 находятся в разных генах, так как они комплементарны. Можно полагать, что а2 расположена в другом гене, А2.
ген А1 ген А2 ген АЗ 172 только при условии внесения в нее определенного метаболита, то у него блокирован какой-то этап метаболической цепи перед биосинтезом этого метаболита, т. е. метаболит занимает в цепи биосинтеза место после мутационного блока. Другие, более ранние предшественники, находящиеся в метаболической цепи перед блоком, не могут обеспечить рост мутанта. С другой стороны, если мутант накапливает определенный метаболит, то у него блокирован этап цепи биосинтеза сразу после накапливаемого метаболита. 1.
Мутант прЕ растет при добавлении в среду любого из приведенных в условии метаболитов и при этом накапливает хоризмовую кислоту, следовательно, у него блокирован ранний этап до биосинтеза этих метаболитов, но непосредственно после хоризмовой кислоты. 2. Мутант йрР способен использовать все метаболиты, кроме антраниловой кислоты, и накапливает в среде последнюю.
Это означает, что мутационный блок располагается сразу после синтеза антраниловой кислоты, а антраниловая кислота в цепи биосинтеза находится после хоризмовой, но перед КФАДРФ, индолом и триптофаном. 3. Мутант йрС не способен использовать для своего роста антраниловую кислоту и КФАДРФ и накапливает последний. Следовательно, мутация ггрС прерывает цепь биосинтеза сразу после КФАДРФ, а сам КФАДРФ находится в цепи после антраниловой кислоты, но перед индолом и триптофаном. 4. Мутант ггрА растет только на среде с триптофаном и накапливает индол-3-глицерофосфат. Можно заключить, что цепь биосинтеза у него блокирована на позднем этапе между индол- 3-глицерофосфатом и триптофаном. Очевидно также, что индол-3-глицерофосфат синтезируется после индола: мутант йрА не растет на среде с индолом, т.
е. блок находится где-гло после индола, но накапливает индол-З-глицерофосфат, т. е. блок идентифицируется непосредственно после индол-З-глицерофосфата. Таким образом, последовательность метаболитов в цепи биосинтеза триптофана следующая: хоризмовая кислота -> антраниловая кислота — > КФАДРФ вЂ” > индол — > индол-3-глицерофосфат -> триптофан. Порядок генов, контролирующих последовательные этапы биосинтеза триптофана (не путать его с генетической картой! ): стрŠ— ь йр0 — > ггрС вЂ” ~ ггрА.
№ 472". Рассчитайте среднее расстояние между сайтами рестриктаз ЕсоК1 (5'-СААТТС) и МЬо1 (5'-САТС) в геномной ДНК № 473. Рассчитайте среднее расстояние между сайтами реет риктазы НрИ (5'-ССТСА) в геномной ДНК. № 474. Рассчитайте среднее расстояние между сайтами рестриктазы Нае11 (5'-РпССССРУ) в геномной ДНК. Рп и Ру — любой пуриновый или пиримидиновый нуклеотид, соответственно.
№ 475. Рассчитайте среднее расстояние между сайтами рестриктазы Ниу! (5'-САХТС) в геномной ДНК. Х вЂ” любой нуклеотид, Есае № 476. Линейный фрагмент ДНК обра- ботали рестриктазой ЕсаК1, рестриктазой с м ЕиД и их смесью. Продукты реакций разделили в агарозном геле и окрасили бромистым этидием. Результаты электрофореза представ- '~ лены парис.8.1. Цифры справа указывают при- ~ близительные размеры фрыментов в п.
н. По— '-'~ стройте рестрикционную карту фрагмента. № 477. Плазмиду РПС !9 обработали рестриктазами Взел!, ВзрН1 и их смесью. Продукты реакций разделили в агарозном геле и окрасили бромистым этидием. Результаты ~ва электрофореза представлены на рис, 8.2. Циф- ры справа указывают приблизительные разРис.8.ткзадаче меры фрагментов в п. н. Постройтерестрик- Л$478 ционную карту плазмиды. № 478. Линейный фрагмент ДНК обработали рестриктазой Есенин', рестриктазой АЫе11 и их смесью. Продукты реакций ВВВВ1 эвви! Ввввв Ввви разделили в агарозном геле и окрасили бромистым этидием. Результаты электрофореза представлены на рис. 8В, Цифры справа указывают приблизительные размеры фрагментов в п.
н. Постройте рестрикционную карту фрагмента. 1ив 1ИВ М 479. Плазмидную ДНК обработали рестСтарт риктазами Вс11, Нгн11 и их смесью. Продукты реакций разделили в агащ ровном геле и окрасили в бромистым этидием. Ре- '~ зультаты электрофореза "' представлены на рис. 8.4.
Цифры справа указывают приблизительные раз° меры фрагментов в п. н. ив Постройте рестрикционную карту плазмиды. Ввв Ввв Рис. 82 к задаче Л4 477 Ввв ЕВЕ1 цщ, Рис, 83 к задаче Лз 478 М 480. Линейный фрагмент ДНК обработали рестриктазой НтсП, стао рестриктазой Хвоей и их смесью.
Продукты реакций разделили в агарозном геле и окрасили бре'ш, мисгым этидием. Резульявв таты электрофореза пред 1111 1ВВВ эе Ви твв ВВВ Рис. 8.5 к задаче Лд 480 ставлены на рнс 8 5. Ци фивв ры справа указывают Рис 84кзада"е приблизительные размеры фрагментов в п. н. Постройте рестрикционную карту фрагмента. 1Ввв М 481*. Линейный фрагмент ДНК обработали рестриктазой ЕсоК1, рестриктазой ВатН1 и их смесью. Продукты реакций разде- 175 Рис.
8.8 к задаче № 481 Рис. 8.7 к задаче № 482 4тзс. 8.8 к задаче № 483 е 66 6 ае ч ЛИЛИВаГаРОЗНОМГЕЛЕИОКРаСИЛИбРОМИСтЫМ этидием. Результаты электрофореза представлены на рис. 8,6. Цифры справа указывают приблизительные размеры фрагментов в п, н. Постройте рестрикционную карту фрагмента. 666 ечз ктч ктч М 482*. Вирион- ~ ную(линейную)ДНК ~ отче' бактериофага Х об- 1 Ч 466 1 работали рестрик- 1 1 тазой Рии1, рестрик- ч-666 тазой №о1, а также 16666 — а-1и смесьюобеих рестриктаэ. Продукты реакций разделили '®' в агарозном геле и окрасили бромис- 1466 тым этидием.
Результаты электрофореза представлены на рис. 8.7. Цифры справа указывают приблизительные размеры фрагментов в п. н. Определите коорди- 6 к 61 наты сайтов Рэи1 и №о1 вДНК фага Х. ии зак Старт М 483. Плазмидную ДНК обработали рестриктазами ЕсоК'47, Ншс1П1 и их смесью. Продукты реакций разделили в агарозном 1ие геле и окрасили бромистым этидием. Резуль1166 1ит таты электрофореза представлены на рис. 8.8. Цифры справа указывают приблизительные 166 размеры фрагментов в п.
н. Постройте рест- 466 рикционную карту плазмиды, — М 484. ЛинейныйфрагментДНК обработали рестриктазой М1и1, рестриктззой №1е1 и их смесью. Продукты реакций разделили в агарозном геле и окрасили бромистым этидием. Результаты электрофореза представлены на 176 рис. 8.9. Цифры справа указывают приблизи- Ф тельные размеры фрагментов в п.
н, Постройте рестрикционную карту фрагмента. № 485. Линейный фрагмент ДИК обработали рестриктазой ВзрТ1, рестриктазой Крп1 и их смесью. Продукты реакций разделили в агарозном геле и окрасили бромистым этидием. Результаты электрофореза представлены на рис. 8.10. Цифры справа указывают приблизительные размеры фрагменте еее ке тов в п. Н. еч ч а) Постройте рестрикционную карту фрагмента. 'б) Как выглядел бы гель, Рис.
8.9 к задаче если бы этот же фрагментбыл ' ~' 4, 4 кольцевым7 Изобразите кариюв ии1 тину электрофореза. № 486. Плазмиду рСЕМ-Т обработали рестриктазами Вап1, Еаг1 и их смесью. Продукты реакций разделили в агарозном геле и окрасили бромистым этидием. Результаты злектрофореза представлены на рис. 8.11.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
