Н.А. Юрина, А.И. Радостина - Гистология (1112199), страница 18
Текст из файла (страница 18)
Результат: ядра клеток красные, эластические волокна темно-синие. Окрашивание эластических волокон резорцин-фуксином можно сочетать с окрашиванием по методу Ван-Гизона (см. главу 21), для чего срезы сначала окрашивают резорцин-фуксином, ополаскивают в воде, дифферевцируют спиртовым раствором хлористоводородной кислоты и переносят в воду, а затем окрашивают по Ван-Гизону. Импрегиация ретикуляриых волокон серебром по способу Фута. Приготовление раствора аммиачного серебра. На 5 мл 10/» раствора нитрата серебра добавляют 4 — 5 капель 40'/» водного раствора ХаОН.
Образуется темно-бурый осадок гидрата окиси серебра. Осадок растворяют 25'/» раствором аммиака, приливая вначале 5 — 6 — 7 капель, а затем осторожна добавляя по капле, каждый раз хорошо взбалтывая и ожидая 20 — 24 с, пока осадок не растворится. Аммиачное серебро употребляют только в свежеприготовленном виде. Методика н м и реги аци и: 1) замороженныеилидепарафинированные срезы из дистиллированной воды переносят на 5 — 10 мин в 0,25'/» водный раствор перманганата калия; 2) ополаскивают в водопроводной воде; 3) помещают на 15 — 30 мин до побеления срезов в 5'/» раствор щавелевой кислоты; 4) промывают в нескольких порциях дистиллированной воды 20 — 30 мин; 5) помещают на 48 ч (в темноте) в 2% раствор нитрата серебра; 6) быстро (3 — 5 с) ополаскивают в дистиллированной воде; 7) переносят на 15 — 30 мин в свежепритотовленный раствор аммиачного серебра (если срезы наклеены на стекло, капают аммиачное серебро на срез).
Срезы прн этом приобретают коричневатый оттенок; 8) ополаскивают в дистиллированной воде 5 — 10 — 15 с (слишком быстрое ополаскивание приводит в дальнейшем к излишнему потемнению среза, слишком продолжительное — к очень бледной окраске, следовательно, время ополаскивания нужно установить опытным путем; 9) помещают в 5 /» раствор формалина на водопроводной или дистиллированной воде 78 на 15 — 30 мин; 10) основательно промывают в водопроводной воде; 11) переносят в 0,5 †1 раствор хлорного золота на 5 — 10 мин (можно пользоваться раствором из расчета 1 капля 1% распюра хлорного золота на 1 — 2 мл дистиллированной воды и обрабатывать в течение 1 ч и более, пока срезы не станут белыми; 12) промывают в водопроводной воде 10 — 15 мин; 13) обрабатывают 2 — 3 мин в 550 водном растворе пшосульфита натрия; 14) тщательно промывают в проточной воде (от нескольких часов до 1 сут).
В случае отсутствия хлорного золота можно увеличить продолжительность обработки темных срезов в растворе гипосульфита до 0,5 — 1 — 2 ч, контролируя под микроскопом через каждые 10 — 15 мин до желательной степени импрегнацни. Р е з у л ь т а т: ретикулярные волокна окрашиваются в черный цвет. Импрегнацию серебром по Футу можно комбинировать с окрашиванием гематоксилин-эозином (см. главу 21) по Ван-Гизону и другими методами. Выявление соединительной ткани азур-2-эозвиом (см.
главу 21). Выявление тучных клеток 0,1Уо раствором толуидииового синего в 30 А спирте 1 — 2 мян. Краситель хорошего качества при этом дает красивую красно-фиолетовую окраску тучных клеток. Можно растворять толуидиновый синий в воде или в буферных растворах при низких значениях рН (см. главу 21). Глава 8 ИММУННАЯ СИСТЕМА И КЛЕТОЧНЫЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ В ИММУННЫХ РЕАКЦИЯХ Иммунная система объединяет ткани и органы„в которых происходит образование, взаимодействие и рециркуляцня клеток — иимуноцитов, распознающих генетически чужеродные субстанции (антигены) и осуществляющих специфические защитные реакции. Главными клетками, осуществляющими иммунологический контроль и иммунологическую защиту в организме, являются Т-лиифоциты, В-лимфоциты, нлаэмоциты и макрофаги.
Главным источником стволовых клеток для всех иммуноцитов является красный костнвгй мозг. Дифференцировка и образование из стволовых клеток Т-лимфоцитов происходят в тимусе, а В-лимфоцитов — в красном костном мозге (у птиц — в фабрициевой сумке — Ьшза РаЬпсй). Эти органы являются центральным и органами иммунной системы.
К периферическимм органам иммунной системы относят селезенку, лимфатические узлы и другие лимфондные образования, где происходят размножение, специализация и взаимодействие иммуноцитов — Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов, макрофагов и формирование эффекторных клеток и антител. Образующиеся эффекторные клетки и антитела поступают в лимфу н кровь и разносятся по всему организму, обеспечивая его защиту (рис.
24). 79 Рвс. 24. Диффереицировка и взаимодействие иммуиоцитов (скема). А — днффереюигровка нммувоцвтов. Аà — антитез; ИИ вЂ” нвдуктор иммуногенеза; АГИ вЂ” аатигеннаа информации (по В. А. Шубинковой); Б — взаимодействие нммуиокомпетевтиьм клеток прв вммуююм ответе: 1, и, 1П, Пà — последсмательиосгь продесса взаимодейстмм;  — В-ламфоцнт, Т вЂ” антигенреактивный Т-лммфоцит; М вЂ” макуофаг; АОК вЂ” автитемюбразуюмва клепса; ИИ— аиду кпю нммуаогенеза; 1йТ вЂ” комплексы аппиевое н Рецепторов Т-лвмфоцатон; 1 — Рецепторы Т-лимфоцглов; 2 — антигены; 3 — Рецепторы В-лимфоцитов; 4 — рецепторы макрофагов: 5— антитела (по Р.
В. Пеграму). ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫЕ КЛЕТКИ Лимфоциты. Различают две основные разновидности лимфоцитов: Т-лимфоциты и й-лимфоциты. Т- л и м ф о ци ты развиваются из стволовых клеток костного мозга, которые с током крови поступают в тимус (вилочковую железу), где превращаются в Т-бласты. Из Т-бластов под влиянием гормонов тимуса (тимозин) дифференцируются Т-лимфоциты, обладающие специальными рецепторами, способными воспринимать информацию о чужеродных веществах — антигенах. Такие Т-лимфоциты, называемые антигенреактивными, заселяют специальные зонь1 (Т-зоны) в периферических 80 лимфоидных органах — селезенке, лимфатических узлах н др. В Т- зонах под влиянием антигенов эти лимфоциты размножаются и специализируются в различные эффекторные клетки — Т-киллеры (обеспечивают реакции клеточного иммунитета, например, при трансплантации органов), Т-хелперы и Т-супрессоры участвующие в регуляции гуморапьного иммунитета.
Кроме того, образуются Т- лим4оциты ламлгли (сохраняют информацию о дейспювавшем антигене). Таким образом Т-лвмфоцнты играют важную роль как в клеточном, так и в гуморальном иммунитете. В- л и м ф о ц и т ы. Их развитие из спюловых клеток происходит в красном коспюм мозге. В процессе дифференцировки В-лимфоцитов на нх поверхности формируются иммуноглобулиновые рецепторы, относящиеся соответственно к 5 классам иммуноглобулинов (1йО, 1йМ, 1йА, 1йЕ, 1йО). Эти лимфоцнты поступают в периферические лимфоидные органы и заселяют В-зоны, где под влиянием антигенов происходят их размножение и специализация с образованием эффекторных клеток — плазмоцитое н В-клеглок памяти. Таким образом, в результате процессов дифференцировки Т-лнмфоцитов и В-лимфоцитов образуются эффекторные клетки, участвующие в иммунных реакциях, и клетки паилпш, которые сохраняют информацию о дейопювавшем антигене.
Плазмоциты образуются из В-лимфоцитов при действии антигенов с участием Т-хелперов и макрофагов. Дифференцировка плазмоцитов включает несколько стадий: плазмобласт- юный плазмоцит — зрелый плазмоцит (актнвно секретирует антитела). В процессе дифференцировки плазмоцита в цитоплазме увеличивается количество рибосом, канальцев гранулярной эндоплазматической сети, расположенных концентрически и оттесняющих ядро на периферию клетки. В ядре нарастает объем гетерохроматина, который располагается по радиусам.
Зрелый плазмоцит характеризуется компактным, эксцентрично расположенным ядром, наличием большого количества расширенных цистерн гранулярной зндоплазматической сети, заполненных продуцируемьгми клеткой иммуноглобулинами (антителами). В световом микроскопе при окраске по Романовскому — Гимзе плазмоциты имеют интенсивно-базофильную цито- плазму, около ядра виден светлый участок (место расположения комплекса Гольджи).
Характерна структура ядра с радиальным расположением хроматина (вид спиц колеса). Макрофаги. Помимо участия в естественном иммунитете (фагоцитоз, синтез защитных веществ — лизоцвма, интерферона, комплемента и др.) они играют важную роль в реакциях приобретенного иммунитета„обеспечивая передачу антигенов Т-лимфоцитам и В-лимфоцитам. Макрофаги, таким образом, участвуют в кооперативном взаимодействии клеток (Т- и В-лимфоцаты) в нммунных реакциях организма. Эта функция преимущественно выражена в особой группе макрофагов — дендритиых клетках, располага- 81 ющихся в лимфоидных органах (селезенка, лимфатические узлы и др.), где происходит кооперативное взаимодействие иммуноцитов.
Кроме функции передачи лимфоцитам антигена, макрофаги вырабатывают особые вещества — м о н о к и н ы, воздействующие на иммунокомпетентные клетки: интерлейкин 1 активирует синтез ДНК в лимфоцитах и др.; фактор, активирующий выработку иммуноглобулинов В-лимфоцитами; фактор, стимулирующий дифференцировку Т- и В-лимфоцитов; факторы, вызывающие хемотаксис Т-лимфоцитов и активность Т-хелперов и др. КЛЕТОЧНЫЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ В ИММУННЫХ РЕАКЦИЯХ В зависимости от механизма уничтожения антигена различают гуморальный и клеточный иммунитет.
При формировании гумор аль но го иммунитета (чаще в ответ на действие антигенов бактерий) зффекторными клетками являются плазмоциты, которые синтезируют и выделяют в кровь антитела (иммуноглобулины), вступающие во взаимодействие с антигенами и обезвреживающие их. Рассмотрим схему кооперативного взаимодействия клеток при формировании гуморального иммунитета (см.
рис. 24). Поступивший антнген захватывается и перерабатывается макрофагом и далее передается В-лимфоциту. Одновременно антиген оказывает стимулирующее влияние на Т-лимфоциты, которые размножаются, и часть из них (Т-хелперы) начинают выделять особые вещества— лимфокины.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
