Н.А. Юрина, А.И. Радостина - Гистология (1112199), страница 13
Текст из файла (страница 13)
Окрашиваиие мазков крови и красного костного мозга по Романовскому — Гимзе. Продажную краску Романовского — Гимзы разводят из расчета 2 мл краски на 23 мл дистиллированной воды. Фиксированные мазки помещают на две стеклянные палочки, положенные параллельно друг другу, заливают краской и оставляют на 30 мин. Далее краску смывают с мазка водопроводной или дистиллированной водой.
От водопроводной воды мазок может слишком посинеть, а дистиллированная вода при длительном промывании смывает краску, поэтому лучше быстро смыть краску дистиллированной водой. Мазки высушивают на воздухе. Далее их можно исследовать с иммерсией, не заключая в бальзам.
В случае необходимости высушенные мазки можно заключить в бальзам. Р е з у л ь т а т: ядра красновато-фиолетовые, зернистость эозинофилов розовая, зернистость базофилов красно-фиолетовая, зернистость нейтрофилов бледно-розовая, цитоплазма лимфоцитов голубая, цитоплазма моноцитов серовато-голубоватая, кровяные пластинки фиолетовые. Прижизненное окрапшваиие геморетикулоцитов 'бриллиантовым крезиловым синим по Сейфарзу. 1'/~ раствор бриллиантового крезилового синего на абсолютном спирте размазывают тонким слоем по обезжиренному предметному стеклу и высушивают. Затем на подготовленном таким образом стекле делают мазок крови и, не давая ему высохнуть, быстро переносят в хорошо закрывающуюся чашку Петри, обложенную влажной фильтровальной бумагой.
Через 5 — 15 мин стекло извлекают и высушивают на воздухе. Результат о к р а ш и в а н и я: в геморетикулоцитах видны сине-фиолетовые нити и гранулы. После 24-часового высушиванил на воздухе мазок можно фиксировать метиловым спиртом и докрасить по Романовскому — Гимзе. Подсчет леикоцитариой формулы крови. Последовательно продвигая препарат сверху вниз и слева направо, подсчитывают в каждом поле зрения количество лейкоцитов. Каждый лейкоцит отмечается в соответствующей графе схемы палочкой, затем палочки подсчитывают.
Общее число подсчитанных клеток должно быть не менее 100. Полученные данные суммируются в каждой бб графе таблицы и производится подсчет процентного содержания каждого вида лейкоцитов, при этом за 100'/» принимают общее число подсчитанных лейкоцитов. Необходимо рассчитать процентное содержание каждого вида лейкоцитов, сравнить их с нормой и оценить обнаруженные отклонения.
Исследование свежих мазков. Покровным стеклом прикасаются к верхушке свежей капли крови, накладывают его на предметное стекло. При этом капля растекается. Для защиты от высыхания покровное стекло окантовывают кисточкой, обмакнутой в расплавленный парафин. Если мазок подсыхает, то дискоциты часто агглютинируются, образуя «монетные столбики». Вен зидиновыи метод выявя еияя перо ксидазы.
Этот метод может быть использован в качестве примера выявления активности ферментов в лейкоцитах на мазках крови. Для фиксации мазков крови можно использовать 10'/» спиртовой раствор формалина 1 — 2 мин (по Грэхему). Приготовление раствора бензидина. 0,5 г бензидина растворяют при встряхивании в 100 мл дистиллированной воды, фильтруют и добавляют 2 мл 1% перекиси водорода на каждые 100 мл фильтрата; 1/» перекись водорода приготовляют, разводя в 30 раз ее 30'/» раствор. Методика проведения реакции: 1)вбензидинперекисной смеси окрашивают мазки 5 — 10 мин; 2) промывают в воде; 3) быстро докрашивают 0,5'/» раствором метилового синего; 4) промывают в воде; 5) высушивают мазки и исследуют с иммерсией или заключают в бальзам.
Р е з у л ь т а т: в местах локализации пероксидазы — желтые или коричневые гранулы, ядра синие. Глава У СОЕДИНИТЕЛЬНЫЕ ТКАНИ К этой группе тканей относятся собственно соединительные, хрящевые и костные ткани. Все они развиваются из мезенхимы и состоят из клеток и хорошо развитого межклеточного вещества.
Именно наличие межклеточного вещества является характерным признаком этих тканей и отличает их от других тканей (эпителиальных, мышечных, нервных). Строение и физико-химические свойства межклеточного вещества, состоящего из аморфного основного вещества и волокон, и соотношение его с количеством клеток различаются в различных видах соединительных тканей и лежат в основе их классификации (схема 5). Рыхлая и плотная волокнистые соединительные ткани различаются степенью развития волокон (в плотной их больше), оформленная и неоформленная ткани имеют различия в характере распо- С и е м а а.
Классификации ссединительнъи тканей яв яявцявяьянмя свваятявмя 1) рвяи)верная азярвввя 3) пигиантнвя 4)сииясмя ложения волокон (упорядоченное в оформленной и неупорядоченное в неоформленной ткани). функциями соединительных тканей являются: 1) опорная или биомеханическая, 2) трофическая, 3) защитная, 4) пластическая (регенерация и замещение дефектов), 5) морфогенетическая — регулирующее влияние на морфогенез других тканей. Более подробно развитие, строение и функция различных видов соединительной ткани будут рассмотрены ниже. СОБСТВЕННО СОЕДИНИТЕЛЬНЫЕ ТКАНИ Волокнистые соединительные ткани Рыхлая волокнистая иеов))овмлеиная соединительная ткань. ' Очень распространена в организме: образует строму большинства органов, сопровождает сосуды и нервы, составляет основу слизистых оболочек, располагается под эпителием, вокруг мьгшечных элементов.
Вместе с кровью образует внутреннюю среду организма, в которой совершается обмен веществ между паренхиматозными клетками органов и кровью. Состоит вз разнообразных клеток и желеобразного межклеточного вещества (рис. 16). Основные функции этой ткани — трофическая, защитная, пластическая, менее выражена опорная функция (образует строму органов). Клетки. Основными клетками являются фнбробласты, макрофаги и тучные клетки. Кроме того, встречаются жировые клетки (адипоциты), пигментные, плазмоциты, лейкоциты, перипдты и эндотелиоцнты.
Ф и б р о б л а с т ы — наиболее многочисленные клетки, образуются из стволовых клеток костного мозга. Основная их функция — синтез и секрецня специальных белков и углеводов, из которых образуется межклеточное вещеспю, в том числе волокна (лат. 58 Рис.
16. Строение'рыхлой огединнтельной ткани (схема). 1 — фнбробластс 2 — макрофаг; 3 — наанощит; 4 — тучная клетка; 5 — ламфоцнт; б — нейтрофлльнмй гранулоцлт; 7 — алваоцвт; 8 — ацтотелвоцвт; 9 — нернцнт: 10 — аавентацлвлана» клетка; 11— коллагеноаое волокно; 12 — влаогнческое волокно. ВЬ|а — волокно). Для структуры функционально активных фибробластов характерна отростчатая форма, наличие овальных ядер с дисперсным хроматином и хорошо выраженными ядрышками, в цитоплазме хорошо развит синтетический и секреторный аппарат— гранулярная эндоплазматическая сеть и комплекс Гольджи (рис. 17,А,Б).
Фибробласты продуцируют белки — тропоколлаген (из него формируется основная часть коллагеновых волокон), эласлуин (формирует эластические волокна), фиброиектин, а также углеводы — гликозаминоглнканы (ГАГ), которые выделяются из клетки, и вне клетки происходит формирование межклеточного вещества с волокнами.
В соединительной ткани всегда присутствует некоторое количеспю более молодых форм фибробластов (мало- дифференцированные, юные), а также стареющие формы (фиброциты). Кроме того, имеются фиброкласты, участвующие в разрушении волокон (благодаря наличию специальных ферментов в лизосомах), и миофибробласты, обладающие сократнтельной функцией, содержащие миофиламенты (играют роль в уменьшении площади ран). М а к р о ф а г и — часть макрофагической системы организма, обеспечивают фагоцитоз и участвуют в реакциях специфического иммунитета. Образуются из моноцнтов крови, которые через стенку сосуда мигрируют в окружающую их соединительную ткань 99 гс»8 уЯУд%Л .Ф~~Ф 4 'ыч ч - "г'- л л в троснис и функции фибробласта. аст.
Окраска нелетным ыматокснлину. 1 — ядро; 2 — цитоллазма. Б— ласта и фнбрнллогенеза: 1 — фибролипептиапые цепочки; 3 — молекулы на; 4 — глнкозамнногликаны, 5— я молекул тропоколлагсна; б — про- 7 — каллаыиояа» фибра» гпучок и); 8 — молекула аласгина; 9 — алабрипла (по Р. В. Кристину с иаменени- ем, 1985). А Рис.
1К Макрофаги в светооптическом 1А) и электроииом (Б) микроскопах. у — ядро, 2 — цитоплазма„з — асраичяые лиза~омал 4 — аторичпыс лизосомы; 5 — пипоцитозиые везякулап Š— филоподии 1микрояасросзы цитоплазмы) и превращаются в макрофаги. Для строения зрелых макрофагов характерны более плотное ядро, большое количество лнзосом и множество выростов цитоплазмы (рис. 18,А,Б). Встречаются более молодые (моноцитоидные и переходные) и стареющие формы.
Т у ч н ы е к л е т к и обычно расположены вдоль кровеносных сосудов поодиночке или группами, характеризуются наличием в цитоплазме обильной крупной специфической зернистости, окрашивающейся метахроматически, что придает им сходство с базофилами крови. Однако тучные клетки, хотя развиваются из стволовых клеток костного мозга, имеют самостоятельный путь развития, отличающийся от базофилов крови. В цитоплазме располагаются органеллы синтеза (зндоплазматическая сеть) и секреции (комплекс Гольджи) и многочисленные крупные (размером 0,3 — 0,7 мкм) специфические гранулы, содержащие биологически активные вещества (рис. 19,А,Б). В тучных клетках синтезируются, накапливаются и секретируются биогенные амины (гштамин, серотонии, дофамим), синтезируются ферменты, углеводы, несульфатированные и сульфатированные гликозаминогликаны„важнейшим из которых является геларим, и др. Выделение биологически активных веществ осуществляется преимущественно в процессе дегрануляции, которая происходит под влиянием разнообразных факторов— физических (облучение, охлаждение, перегревание, травма), химических (в том числе лекарственных препаратов), биологических (введение чужеродного белка, чужеродных клеток и др.).
Известна роль тучных клеток при аллергических и анафилактических реакциях, когда происходят интенсивная дегрануляция их и выход гиспуа- 61 Рис. 19. Тучные клетки в световом (А) и нлектрониом ба) микросканак. 1 — ядро; 2 — метакроматическне гранулы в Лнтоолавме; 3 — комплекс Голадаги; 4 — секреторные гранулы. мина и других веществ, вызывающих расширение сосудов, отек тканей.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
