Г. Кристиан - Аналитическая химия, том 2 (1108738), страница 58
Текст из файла (страница 58)
13. СЬ6вг!ап, «8ег!иепг!а1 1щесгюп Апа1уз!в Гог Е1есггосЬеппса1 Меавиге- щепгя апг1 Ргосевв Апа1ув!в», Ало!уяг, 119 !1994) 2309. К. 3. Вахгег апб б. 13. СЬ6вг!ап, «Еег!иепг!а! 1щес6оп Апа1уяв: А Чегяа61е ТесЬ- и!г!ие Гог Вюргосевя Моп!гопп8», Ассоилгв САет. Яея., 29 !1996) 515.
Т. ОПЬеП, б. 13. СЬпвбап, ап6 7. Пик!с1га, «Рипбащепга!в оГ 8!пиво!6а! Р!очч 8ег!иепг!а1 1щесгюп ЕресггорЬогощеггу», Ало!. СТ>ет., 63 !1991) 2407. Базы данных в Интернете 12. Наивен в Р1 В!Ыю8гарЬу, чччч>ч. Почч!щесГ!оп.сот! веагсЬ. Ьии! — более 8000 ссылок по проточно-инжекционному анализу. СЬаПг'в Р!очч Апа!ув!в !ЗагаЬаве, ччв м.Па.вибеке Га62аяво — более 11000 ссылок по проточным методам. 13 Производственный анализ б. 13. СЬпв6ап апб Е.
ТТ. Уа1час, «Ргосевв Апа!убса! СЬепив!гу», гп й, КеПпег, 1.-М. Меппог, М. Оно, апд Н. М. %!6пег, едв. Ало!у!!со! СТ>етаггу, %е!пЬе- ип:%г!еу-ЧСН, 1998. 1. В. СаПЫ). 1.. П!гпап, апб В. К. Кочча!з!г1, «Ргосевв Апа1у6са1 СЬепияггу», 14 16 Ало!. С)гет., 59 !1987) 624А. 1 8. М. Т. Е)еЬе апд Р. 1. Еивгасе, «Ргосевв Апа!у6са1 СЬещ!впу. Ап 1пбивгпа! Регвресг!че», Апа!. СЬет., 62 11990) 65А. 2. 3. 4. 7. 8. 9. 10. 11. ГЛАНА 23. АВТОМАТИЗАЦИЯ ХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА Глава 24 КЛИНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ В предыдущих главах были рассмотрены методический и инструментальный аппараты, общие для всех видов анализа.
В данной главе, а также в двух последующих главах нам предстоит разобраться с практическими аспектами анализа некоторых конкретных типов объектов. Знания, полученные из предыдущих глав, помогут в изучении специфических типов анализа и решении конкретных аналитических задач. В настоящей главе мы остановимся на практических аспектах клинического анализа.
Будут рассмотрены имеющие особое значение в клинической химии компоненты крови и мочи, в том числе важнейшие электролиты, белки и органические вещества„а также перечислены некоторые аналитические параметры, которые широко используются для проведения клинических анализов, в частности, нормальный диапазон концентраций компонентов физиологических жидкостей и условия, при которых их значения могут выпадать из этого диапазона.
Кроме того, мы ознакомимся с высокочувствительным методом иммуноанализа. Во многих клинических методах анализа широко используется спектрофотометрия. При определении физического состояния человека проводят анализ крови, который выявляет такие общие показатели, как содержание глюкозы, холестерина, липидов, а также азота мочевины. Сложные анализы обычно осуществляют с помощью автоматизированных приборов, действие которых основано на спектрофотометрической детекции. Для разных методов анализа применяют различные химические подходы, в частности, ферментативный или иммуиохимический.
Такие электролиты, как натрий нли калий, можно определять с помощью автоматизированных систем с ионселективными электродами (ИСЭ). Осуществление большинства более специфических анализов требует предварительного разделения компонентов, например, с помощью газовой или жидкостной хроматографии. Обнаружить наркотические средства в организме можно с помощью иммунологических методов, подкрепив их хроматографическими данными (например, с помощью ГХ-МС).
Следующие разделы данной главы посвящены отбору и подготовке проб и, кроме того, различным подходам к определению некоторых часто определяемых веществ. зоо ГВИ г4. КПИНИЧКСХЯЯ ХИМИЯ 241. Состав крови Цельную кровь можно разделить на отдельные компоненты: плазму, состоящую из сыворотки и фибриногена, а также клеточные элементы — эритроциты, лейкоциты и тромбоциты (см. гл.
1). Плазма представляет собой жидкую фракцию циркулирующей крови; центрифугированием цельной крови от плазмы отделяют клетки. При свертывании крови вместе с клетками удаляется фибриноген и остается сыворотка. Для большей части клинических анализов используют цельную кровь, плазму или сыворотку, причем чаще всего проводят именно анализ сыворотки. Кроме того, часто анализируют мочу. В табл. 24.1 приводится нормальный диапазон концентраций некоторых компонентов крови человека, имеющих важное значение в клинических исследований. Необходимо подчеркнуть, что представленный диапазон является усредненным. Содержание в крови основных электролитов (катионов и анионов) отражено в табл. 5.3.
Ниже мы обратимся к анализу некоторых наиболее часто определяемых компонентов крови и обсудим физиологическую значимость этих показателей. 24.2. Отбор и хранение проб Образцы крови и мочи часто отбирают после того, как пациент воздерживался от приема пищи на протяжении определенного времени (например, в течение ночи); это особенно важно при определении уровня холестерина и глюкозы. В одном исследовании было показано, что обычный завтрак не влияет на содержание в крови СО, хлоридов, натрия, калия, кальция, азота мочевины, мочевой кислоты, креатинина, общего белка и альбумина.
Количество фосфора в сыворотке несколько снижается через 45 мин после приема пищи, а спустя 2 ч возвращается на обычный уровень. ВНИМАНИЕ: Отбор проб и манипуляции с кровью и другими биологическими образцами требуют особых мер предосторожности, так как через них можно заразиться такими опасными заболеваниями, как ВИЧ (СПИД). При работе необходимо использовать резиновые перчатки, а иногда и маски.
Для выполнения практических работ, предложенных вам в конце книги, вам не нужно будет брать кровь или использовать другие биологические образцы, полученные от других людей — вы будете работать с коммерческими или синтетическими препаратами, не представляющими опасности (например, с сухой сывороткой). Лишь в одном эксперименте, в котором проводится анализ мочи, вы можете использовать свою собственную мочу, но можете также исследовать мочу животного или синтетический препарат. Сыворотки крови животных, например, лошади или быка, являются коммерческими препаратами (и ичи.з)яша-а1бпсЬ. сош).
Если для анализа необходима сыворотка крови, то кровь отбирают в чистые сухие пробирки, чтобы предотвратить загрязнение и гемолиз. Гемолнз — это разрушение красных клеток крови (эритроцитов), сопровождающееся выходом гемоглобина и других компонентов клетки в плазму или сыворотку. При гемолизе 24.2. ОТБОР И ХРАНЕНИЕ ПРОБ Образец в Нормальный диапазон концентрации Компонент К К К С С К С С С С Азот аминокислот Азот мочевины (ВТЛ4) Азот небелковый (1)РН) Альбумин Амилаза Аммиак Белок общий сывороточный Билирубин,свободный общий Глобулины общие альфа-1 альфа-2 бета гамма С С С С С С С С С С С С К С С С С С С С С С ' Взято из [Ь Я. Апп[по, С(тата[ Сйвтипт, 3 ед.
Вовюп: Так!е, Вготп апб Сатрапу,!960). б С вЂ” сыворотка, К вЂ” кровь. ' Изменяется с возрастом. Таблица 24.1 Основной химический состав крови ' Железо сывороточное Жирные кислоты Иод бепковосвязанный (БСИ) Калий Кальций Клнренс креатинина Креатииин Липаза Липицы общие Магний Мочевая кислота Натрий Сахар (глюкоза) Трансаминаза (СГОТ) Углекислый газ (СО,) Фосфатаза кислая Фосфатаза щелочная Фосфолипиды (как фосфор) Фосфор неорганический Хлориды в сыворотке Холестерин общий Холестерина эфиры 4-6 мг!дл до 20 мг/дл 25 — 40 мг(дл 4 — 5 г!дл до 150 мг/дл 40 — 125 мкг/лл 6,5-8 г/дл до 0,4 мг!дл до 1,0 мг/дл 2,5-3,5 г/дл 0,1 — 0,4 г/дл 0,3 — 0,7 г!дл 0,4 — 0,9 г/лл 0,6 — 1,3 г/дл 50-180 мкг/дл 200-400 мг7дл 3,5 — 8 мкг/лл 3,8 — 5,6 моль экв./л 4,5 — 5,5 моль экв./л 100 — 180 мл/мин 0,7 — 1;1 мг/дп до 1,5 единиц 350-800 мг/дл 1,5-2,5 моль эквУл 3-6 мг!дл 138 — 146 моль эквУл 65-90 мг/дл до 40 единиц 25 — 32 моль эквУл до 4 единиц Гутмана до 4 единиц Боданского 100 — 250 мг/дл 4 — 10 мг!лл 3-4,5 мг/дл 100 †108 мо эквУл 140 — 250 мг/дл ' 50-6058 от общего холестерина глядя га, 101иничщая ыиия сыворотка приобретает красноватый цвет, в то время как в норме она имеет цвет соломы.
Концентрация некоторых веществ в клеточных элементах крови может быль гораздо выше, чем в сыворотке или плазме. Так как при определении концентрации веществ в сыворотке или плазме в результате гемолиза может быть получено завышенное значение (это касается таких компонентов, как калий, железо, магний, цинк, мочевина, белок (из-за гемоглобина) и т. д.), то для отделения сыворотки или плазмы от клеточных элементов необходимо проводить центрифугирование сразу после взятия крови.
Если для проведения анализа требуется плазма или цельная кровь, то кровь собирают в пробирки с антикоагулянтом. Часто для этой цели используют геиарин (натриевую соль). Однако действие гепарина ограничено во времени, а кроме того, он достаточно дорог. Поэтому чаще в качестве антикоагулянта применяют оксалат калия (около 1 мг на 1 мл крови). Это соединение связывает кальций, который способствует свертыванию крови; понятно, что полученную таким способом плазму нельзя анализировать на содержание калия и кальция. Оксалат связывает и многие другие металлы, поэтому их содержание определяют в сыворотке.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
