Отзыв на автореферат 1 (1091846)

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла

ОТЗЫВ на автореферат диссертационной работы Макарова Дмитрия Александровича «Разработка технологий полу гения рскомбинантного тимозина бета-4 человека и его аналогов» на соискание ученой степени кандидата химических наук по специальности 03.01.06 — биотехнология(втл!. бионанотехнология) Одних! из успехов фундаментальных исследований в области молекулярной биологии и биохимии во второй половине ХХ века является открьгзз)е биолоп)чески актнвных пептидов и их роль в жизни млекопитак)щих, Особое внимание этому направлению уделяется из-за возможности использования таких природных рег)ч)взоров метзоолизмз В мед1гцинских целях.

К сожалению, естественное содержание пептндОВ в Орга!еах и тканях кра!1не ограничено и д1!я медицинских исследоВаниЙ, тем Оолее для терапии, выделение целевых соединений из природных источников — задача чрезвычайно з)пратная и малоэффективная. Днссертационная работа Д.Л. Макарова «Разработка технологий получения рекомбинантного тимознна бета-4 человека и его аналогов» является прикладным технологическим исследованием, цель которого — создание эффективной тсхноло!.Ии пол) 1!ения Онологичсски активного пептида.

Природный ть!мозин Оста-4 1! 1)-4) — Оо:шлаез уннкальнымн свойствамн: принимает участие в стимулировании ангиогенеза в условиях ишемии сердечной мышцы„блокирует в кардном)юцнтах проапоптотические каскады. 1'егеперационный потенциал Т~-4 проявляется при лечении трофических язв, ожогов н ран. Востребованность в эффективной технологии получения этого пептида очень Высока. поэгом! Зктуа:!ьность представленной раооты не вьг)ывает ни малейшего сомн!.Ння. В диссертационной работе Д.А. Макарова представлена масштабируемая биотехнологня получения Тр-4 человека.

Собственно разработка биотехнологии кроме сделанного ранее в лаборатории биотехнологии конструирования штамма-продуцента !'И01Л!Диого Оелка и Оптимизации условий к)льтиВи1)овання, Вкчк)чала следующие этапы! а)шггнмпзацня условий разрушения биомассы, б) подбор условий выделения гибридно!.о белка и оптимизации ус)!Олий его протеолитического расщепления, в) подбор условиЙ хромзтографической Очистки пептида, г) подбор условий ацетнлирования пептида н окончательной очистки целевого продукта. Важно отметить, что разработанная :шоорагор)шя методика бьша успешно доработана н масштабированз до стадии пилотного производства. Как итог — наработка 2,5 г целевого пептида для доклнннческих исследований. что является фактическим признанием эффективности разработашюй ав«ором оиогехиологни.

1'азработанная биотехнология получения дезацетнлтимозина р-4 фактически является технологией получения ценного промежуточного продукта, после апетндирования которого получается природный Т~3-4. Однако, в работе пролсмонсгрировагш возможность других. пепрнродных модификаций: пре>шо>кено апелнрование ангидридом гексановой кислоты, конъюгирование с полисналовой кислотой и конъгирование с полиэтиленгликолем. Эта часть работы проведенная на высоком уровне, является скорее научно-исследовательской, чем технологической. Автором затрачены серьезные усилия по оптимизации реакции получения целевых продукте>в и сшс большие усилия по их очистке н анализу, В результате получены даннь«е о возросшей стабильности модифицированных пептидов в сыворотке крови, т,е.

такие пептиды обладшот улучшенными фармакологическими показателями. Тем нс менее. эти результаты могут быть важными для технологии только после биологических «кспернментов с модифицированными пептидами 1п «1«т>„в которых оудсг показана их эффск пнин«сть по сравнению природным Тр-4. Наиболее интересной частью работы является разработка метода получения 'Г11-4 из ~ нбридного белка, ацетилированного 1п ««1««о. Здесь автору пришлось не только заново сконструировать штамм-продуцент, способный продуцировать гибридный белок. 1Зажно, чтобы в штамме происходило ацетилнрование гибридного белка, которое возлагалось на >4-а«ипнлтрансферазу.

В работе представлены результаты экспериментов по выбору оптимального фермента (между аланнновой нли сернновой Х-ацетилтрансферазой1. а также обоснована необходимость модификации классической последовательности Шайно-Далы-арно для сии>кения уровня экспрессии гена Х-ацстнлтрансферазы. Восле оптимизации условий было установлено, что в процессе посттрансляционной модификации происходит полное удаление формилметпоннна с Х-конца целевого пептпда, а также уровень ацетилнрования 1п «ч«т> достигает 93;4. Выход пелевого пептнда после окончателыюй очистки достигает 20 мг Т~3-4 с 1 л культуральной среды.

Заключительная часть диссертационной работы Д.А. Макарова посвящена тестировани>о биологической активности Тр-4, полученного по разработанной яютехнологии. Фактически эга часть является наиболее строгим и однозначным показателем нет«явности полученного препарата и относится скорее к методам контроля к««пс«пш«ГО продукга, чем к технологии его получения. В целом диссертационная работа Д.Л.

Макарова является хорошо продуманной закопченной технологической работой, с ясно и четко сформулированной целью. Задачи исследования сформулированы четко и по~атно, правда исследование биологической акпивности полученного рекомбинантного Т))-4, скорее следует отнести к методам ко»»троях. Рапота вьшолнена на высоком методическом уровне, с использованием совремегпплх методов и средств, особенно в части очистки и анализа получаемых п)»одуктов, Спитак», что диссертапионпая работа Д.А.

Макарова «Разработка техно:.авгий »н»лу»е»»ия рекомби»ьзнтного тимозина бета-4 человека и его аналогов» полностью отвечает требованиям в п. 9 «Положения о порядке присуждения ученых степепейа, утвержденного Постановлением Правительства РФ от 24.09.2013 г., а ее автор. Макаров Дх»итри»3 Александрович, заслуживает присвоения ученой степени кандидата химических паук по сиена»»льности 03.01.06- Биотехнология 1в т.ч. бионанотехнологии).

3авелу»огип й лаоорато)»ией изотопных методов авали~а ИБХ РАН, д,х,н. Скоблов 1О.С, ечпа»1 пг'и 11»сЬлн Федеральное государственное б»оджетное учреждение науки Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук ( ИБХ РАН ) ул. Миклухо-Маклая, 16Л0, ГСП-7, Москва, 117997.

телефон: (495) 335-01-00 (канн.), 1»-»»»а)1: о11)се'~ЙЬсЬ.ги, »к»х»к.)1»сЬ,гп Ученый секретарь ИЬХ РАН. д. ~».-и.н. .

Характеристики

Тип файла PDF

PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.

Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.

Список файлов диссертации