Культивирование и рост микроорганизмов
ТЕМА: культивирование и рост микроорганизмов
1. Основные типы питательных сред для культивирования
микроорганизмов: - классификация питательных сред.
2. Закономерности роста чистых культур микроорганизмов.
1
Культивирование (
По составу питательные среды могут быть простыми и сложными. Простые среды (МПБ, МПА) имеют наибольшее распространение и используются для выращивания многих микробов, для первичного выделения их из разных субстратов. В состав сложных сред входят дополнительные компоненты: сыворотка крови, сахара и т.д. Сложные среды используются для дифференциальной диагностики. Гемолитическую способность определяют на кровяном агаре; сахаролитические свойства – на средах Гисса, Эндо, Плоскирева; протеолитические – на мясопептонном желатине и т.д.
По назначению питательные среды бывают обычные и элективные (избирательные) среды, специальные и дифференциально-диагностические. Элективные среды применяют для выращивания определённых видов микробов, они были введены в практику русским микробиологом С.Н.Виноградским при изучении процесса нитрификации. Такие среды не содержат органических соединений и были избирательными для нитрифицирующих бактерий. Элективной средой для молочнокислых бактерий служит молоко, для азотобактера – маннитный агар и т.д.
Температура культивирования зависит от вида микроба. Оптимальная температура для плесневых грибов 15-25*С, для большинства сапрофитов – 25-30*, а для патогенных – 35-37*. Температурный оптимум определяется условиями жизни микроба. В лабораториях необходимую температуру создают в термостатах.
Рекомендуемые материалы
У большинства микробов (кишечная палочка, сенная, картофельная, капустная бациллы) рост наблюдается в течение суток. У некоторых (трихофитоны) колонии грибов появляются через 5 – 10 суток. Через 15 – 20 дней бывает виден рост у возбудителя туберкулёза, а бруцеллы в первичных культурах иногда растут до месяца. Скорость роста культур микробов зависит также от аэрации (для аэробов), содержания в атмосфере углерода диоксида (до10% для возбудителя бруцеллёза) и других факторов. Анаэробов выращивают без доступа кислорода воздуха. Такие условия создаются физическими, химическими и биологическими методами. Анаэробов выращивают также на среде Китта – Тароцци - мясопептонном бульоне с кусочками печени, залитом сверху слоем индифферентного вазелинового масла. Для удаления остаточного воздуха из среды перед посевом её выдерживают в течение 15 – 20 мин в кипящей воде.
2
Характер роста микробов. На плотных питательных средах микробы растут в виде колоний (скопление клеток). Колонии разных микробов отличаются по форме, размерам, консистенции, цвету и другим признакам, что имеет большое диагностическое значение. Размеры колоний колеблются от одного до нескольких миллиметров. Колонии образуются также и в результате поступательного движения клеток. Так, клетки вульгарного протея способны передвигаться по наклонной поверхности питательной среды (проба по Шукевичу). Микробы с капсулой образуют слизистые, вязкие, полупрозрачные колонии. У бацилл колонии матово-серые и обычно непрозрачные. На жидких питательных средах микробы образуют муть, осадок, пленку, пристеночное кольцо. Иногда среда приобретает цвет пигмента, образуемого микробом. Для каждого микроба характерен определённый рост, что учитывается в диагностической практике.
Вопросы для самоконтроля: 1. Какие вы знаете питательные среды по происхожде-
"19 Гватемальская революция" - тут тоже много полезного для Вас.
нию, составу, консистенции?
2. От чего зависит температура культивирования
микробов?
3. Какой прибор применяют для выращивания микро-
бов в лабораторных условиях?
4. Как растут микробы на питательных средах?