Диссертация (Атипичный красный плоский лишай кожи и слизистой оболочки рта клиника, диагностика, дифференциальная диагностика, совершенствование методов лечения), страница 9

Зуд не вызывает чувства раздражения и беспокойства.Умеренная степень выраженности. Раздражение и беспокойство, вызванные зудом. Зудможет влиять на каждодневную деятельность.Выраженный зуд. Очень выраженные раздражение и беспокойство, вызванные зудом.Зуд сильно влияет на каждодневную деятельность.Очень выраженный зуд.

Нарушение каждодневной деятельности.Вопрос № 2. Оцените выраженность зуда в ночью (за последние 24 часа)Отсутствие зудаЛегкая степень выраженности. . Зуд не вызывает чувства раздражения и беспокойства,влияние на сон отсутствует.Умеренная степень выраженности.

Раздражение и беспокойство, вызванные зудом. Зудможет влиять на сонВыраженный зуд. Очень выраженные раздражение и беспокойство, вызванные зудом.Зуд сильно влияет на сонОчень сильный зуд. Вызывает нарушения сна.Анкета BRS использовалась нами дважды: для оценки выраженности зуда у больного до и после леченияОпределение дерматологического индекса качества жизни (Dermatology LifeQuality Index)Опросник, использующийся для определения Дерматологического Индекса Качества Жизни (ДИКЖ; The Dermatology Life Quality Index (DLQI), разработанныйA.Y. Finlay и G.K.

Khan [107] является одним из наиболее часто используемых вмировой дерматологической практике. Он предназначен для пациентов старше 16лет и позволяет оценить отрицательное влияние кожной болезни на каждодневную деятельность, социальную и сексуальную активность больных. Нами был использован русифицированный вариант данного опросника (табл.7).47На каждый вопрос пациент давал по одному ответу. Каждый ответ оценивался по шкале от 0 до 3 баллов, отражающих степень влияние на качество жизни(«очень сильно» - 3 балла, «сильно» - 2 балла, «незначительно» -1 балл, «нет воздействия» - 0 баллов). При ответе «нет» на вопрос №7 выставлялось 0 баллов, приответе «да» - 3 балла.Расчет индекса производился путем суммирования баллов.

Индекс можетварьировать от 0 до 30, при этом, чем выше значения индекса, тем больше степеньнегативного воздействия, оказываемая кожным заболеванием на жизнь пациента.При значениях ДИКЖ ≤5 диагностируется легкая степень заболевания, а значенияДИКЖ ≥11 свидетельствуют о тяжелом течении дерматоза (табл.7).Опросник ДИКЖ был использован нами дважды: до лечения, для того, чтобы оценить степень тяжести состояния пациента и после лечения- для оценки эффективности проводимого лечения48Таблица 7Опросник индекса дерматологического качества жизни (Dermatology Life QualityIndex)1.Испытывали ли Вы зуд, жжение или болезненность напрошлой неделе?2.Ипытывали ли Вы ощущение неловкости или смущенияв связи с состоянием Вашей кожи?3.Насколько сильно Ваши проблемы с кожей мешали Вамзаниматься уборкой дома или покупками?4.Как сильно влияло состояние Вашей кожи влияло навыбор Вашего гардероба на прошлой неделе?5.Как сильно влияло состояние Вашей кожи на Ваш досуги социальную активность на прошлой неделе?6.На прошлой недел состояние Вашей кожи мешало Вамзаниматься спортом?7.Пропускали ли Вы учебу/ отсуствовали ли на работе изза состояния Вашей кожи?Если Вы ответили «нет», то насколько сильно Вас беспокоилосостояние Вашей кожи, когда вы находились на работе илиучебе?8.Влияло ли состояние Вашей кожи на Ваши отношения сродственниками, партнерами, друзьями на прошлой неделе?9.Насколько сильно Ваши проблемы с кожей влияли наВашу сексуальную жизнь?10.Насколько сильно лечение заболевания кожи причинялоВам неудобства, отнимао время, создавало проблемы напрошлой неделе?Количество балловОчень сильноСильноНезначительноНет воздействияОчень сильноСильноНезначительноНет воздействияОчень сильноСильноНезначительноНет воздействияОчень сильноСильноНезначительноНет воздействияОчень сильноСильноНезначительноНет воздействияОчень сильноСильноНезначительноНет воздействияДаНетОчень сильноСильноНезначительноНет воздействияОчень сильноСильноНезначительноСовсем нетОчень сильноСильноНезначительноСовсем нетОчень сильноСильноНезначительноСовсем нетНе применимоНе применимоНе применимоНе применимоНе применимоНе применимоНе применимоНе применимоНе применимоРезультатОт 0 до 5Заболевание кожи не оказывает влияния на жизнь пациентаОт 6 до 10Заболевание кожи имеет умеренное сильное влияние на жизнь пациентаОт 11 до 20Заболевание кожи имеет очень сильное влияние на жизнь пациентаОт 21 до 30Заболевание кожи имеет чрезвычайно сильное влияние на жизнь пациента49Оценка боли по визуально-аналоговой шкале (Visual Analog Scale)Визуально-аналоговая Шкала (ВАШ, Visual Analog Scale, VAS) наиболеераспространенная «аналоговая шкала боли», которая подразумевает ассоциациювыраженности болезненных ощущений пациента с длиной отрезка между двумяточками, от «нет боли» до «сильная боль» [57].

Нами данная шкала была использована в отношении болезненности процесса при атипичных поражениях СОПР.Пациенту предлагалась шкала с градуировкой от 1 до 10, где цифра 1 обозначала «боль отсутствует», а цифра 10- «боль невыносимая» и пациент самостоятельноотмечал цифру, которая наиболее соответствовала выраженности болевых ощущений (рис.1).

Для оценки уровня боли использовались следующие степени тяжести: от 1 до 4 баллов- слабая боль; от 5 до 6 баллов- умеренная боль; от 7 до 10баллов- сильная боль.Измерение боли с помощью шкалы ВАШ проводилось нами трижды: до ипосле лечения, а затем через 24 недели после окончания терапии. Осуществлениеоценки боли в динамике позволяло оценить эффективность проводимой терапии.Рис.

1 Шкала ВАШ для оценки выраженности болевых ощущений в полости рта.2.2.3. Метод проведения иммуногистохимического исследования с определением локализации Ki 67 и экспрессии E-кадгерина.Для проведения инцизионной (punch) биопсии СОПР применялся одноразовый стерильный трубчатый нож (Sterylab, Италия) диаметром 3 мм. Для инфильтрационной анестезии применялся 2% раствор лидокаина. Биоптаты фиксировались в 10% растворе формалина.

Материал заливался в парафин по обычной методике. Серийные срезы депарафинировались по стандартной схеме, затем окра-50шивались гематоксилином и эозином. Гистологическое исследование биоптатапроводилось на микроскопе МИКМЕД-5 (ЛОМО, Россия).Иммуногистохимическое исследование проводилось в соответствии со стандартным протоколом.

Парафиновые срезы наносились на стекла с адгезивным покрытием, депарафинировались по стандартному протоколу. Срезы, погруженныев цитратный буфер при мощности 690 Вт 2 раза по 5 минут инкубировались вмикроволновой печи. Срезы охлаждались 20 минут при комнатной температуре,подсушивались и наносились первичные антитела. Для определения уровня пролиферации использовались моноклональные антитела к протеину Ki 67 (DAKO),разведение 1:200, также использовались антитела к Е-кадгерину (Клон 36B5, разведение 1:50, Novocastrа). Использовались соответствующие позитивные и негативные контроли – иммунные и не иммунные сыворотки.

Срезы промывались вбуфере, подсушивались, затем на них наносили EnVision (anti-mouse и anti-rabbit,фирмы DAKO, Дания) на 30-40 минут. Для визуализации реакции наносилиDAB+ (3, 3ґ–диаминобензидин), что позволяло получать специфическую коричневую окраску. Затем срезы докрашивались гематоксилином Майера.Определение уровня пролиферации оценивалось с помощью индекса, который вычислялся как среднее от числа меченных ядер на 100 учтенных ядер (приучете 500-1000 клеток очага поражения). Подсчет меченных ядер проводился врепрезентативных полях зрения с относительно равномерным распределениемклеток очага поражения, сверху вниз и слева направо.

Клетки на периферии срезов, где чаще всего наблюдается фоновое окрашивание, не учитывались.Для оценки характера экспрессии Е-кадгерина выделялись следующие ее типы: Мембранный – равномерное распределение маркера по всей клеточной мембране Мембранно-редуцированный – распределение маркера на отдельных участкахклеточной мембраны Цитоплазматический – распределение маркера в цитоплазме (мелкогранулярный в виде мелких гранул)51 Мембранно-цитоплазматический – сочетание мембранного и цитоплазматического) Отсутствие иммунореактивностиНа микроскопе МИКМЕД-5 (ЛОМО, Россия) определялась локализация клеток,ядра которых экспрессируют маркер Ki 67 и оценивалась экспрессия Е-кадгерина.2.2.4.

Метод выявления фиксированных антител в биоптате кожиДля проведения инцизионной(punch)биопсиивидимоздоровойко-жи применялся одноразовый стерильный трубчатый нож (Sterylab, Италия) диаметром 6 мм. Для инфильтрационной биопсии применялся 2% раствор лидокаина.Биоптаты фиксировались в 10% растворе формалина.Выявление антител проводилось при помощи реакции прямой иммунофлюоресценции (ПИФ) (НИИ ЭЭМ им Н.Г.Гамалеи) с применением моноспецифических люминесцирующих сывороток против IgG, IgA, IgM и С3 компонента комплемента. На предметное стекло помещались серийные криостатные срезы и в течение 30 минут подсушивались при комнатной температуре.