Диссертация (Клинико-иммунологические особенности воспалительных заболеваний придатков матки гонорейной этиологии), страница 10

НВD1 являетсяуниверсальным веществом бактерицидного действия, ведущая роль которого –участие в формировании резистентности организма к инфекции. Экспрессиядефензинов эпителиальными клетками слизистой объясняется необходимостью еезащиты от постоянного действия факторов окружающей среды, микрофлоры ипатогенных микроорганизмов. Дефензины способны модулировать продукциюцитокинов и, таким образом, воздействовать на интенсивность реакцийадаптивного иммунитета.В связи с вышеперечисленным важным является определение уровняэкспрессии генов противомикробного пептида HBD1 и Toll-подобного рецептора2 (TLR2) в слизистой цервикального канала и слизистой оболочки маточных трубу женщин с острым сальпингоофоритом и проведение сравнительного анализаполученных данных с уровнем экспрессии генов у женщин без патологии в маломтазу.3.2.1 Показатели врожденного иммунитета (ТLR2 и НВD1) слизистойцервикального канала и маточных труб у женщин без патологии в маломтазуНами было обследовано 30 женщин без патологии в малом тазу, которыепредставляли контрольную группу, но госпитализированы в гинекологическоеотделение в экстренном порядке с болевым синдромом.

Лапароскопия былапроведена с целью дифференциальной диагностики для исключения остройхирургической патологии. В ходе диагностической лапароскопии был установлендиагноз: болевая форма апоплексии яичников.В качестве материала для исследования использовано содержимоецервикального канала, а также содержимое неизменѐнных маточных труб,полученные в результате диагностической лапароскопии, проводимой по поводуболевой формы апоплексии яичников.ИзматериалавыделялимРНКипроводилиреакциюобратнойтранскрипции. Затем методом ПЦР в режиме реального времени определяли58количество копий кДНК по отношению к 103 копий гена актина.В результате обследования было показано, что в эпителиальных клеткахпредставлено относительное количество копий кДНК исследуемого генаотносительно 103 копий актина.Средний уровень экспрессии гена TLR2 в эпителиальных клеткахцервикального канала у женщин без патологии в малом тазу составил 50,0 ± 1,2 ×10³ копий кДНК относительно 103 копии гена актина.Экспрессия этого гена в слизистой маточных труб была выше, чем вслизистой цервикального канала и составляла 60,3 ± 1,7 × 10³ (р<0,05).

Данныеразличия, скорее всего, можно объяснить более высокими врожденнымизащитными свойствами эпителия маточных труб, являющегося последнимбарьером от проникновения патогенных и условно-патогенных микроорганизмовв брюшную полость.У обследуемых женщин в клетках слизистой цервикального канала и вэпителиальныхклеткахфаллопиевыхтрубэкспрессируетсятакжегенпротивомикробного пептида HBD1.Таблица 3.4Уровень экспрессии генов TLR2 и HBD1 в слизистой цервикального каналаи маточных труб у женщин без патологии в малом тазу (N=30)ОбъектисследованияИсследуемые геныTLR2HBD1Цервикальный канал50,0 ± 1,276,8 ± 4,60Маточные трубы60,3 ± 1,7*48,5 ± 14,8** Достоверные различия между уровнями экспрессии гена HBD1 в цервикальном канале иматочных трубах, а также TLR2 в цервикальном канале и маточных трубах, при р < 0,05В табл. 3.4 представлено относительное количество копий кДНК исследуемого генаотносительно 103 копий актина.Экспрессия гена противомикробного пептида HBD1 у пациенток, безвоспалительного процесса в малом тазу, составила, по нашим данным, в59цервикальном канале 76,8 ± 4,6×10³ копий кДНК (табл.

3.4), тогда как в маточныхтрубах данный показатель был достоверно ниже, и равен 48,5 ± 14,8×10³ копийкДНК (р<0,05).Более высокие уровни экспрессии гена HBD1 в слизистой цервикальногоканала по сравнению с данными, полученными при исследовании содержимогоматочных труб, можно объяснить возрастанием защитной роли иммунитета науровне слизистой оболочки цервикального канала, стимулированного большимколичеством обитающих здесь микроорганизмов [21].3.2.2 Экспрессия компонентов врожденного иммунитета (TLR2 и HBD1)слизистой цервикального канала и маточных труб у пациенток с острымсальпингоофоритомУровень экспрессии генов противомикробных пептидов HBD1 и TLR2определяли у 30 обследуемых женщин с острым сальпингоофоритом.

Материаломдля исследования служили клетки слизистой цервикального канала и маточныхтруб, полученные при экстренной лапароскопии.У пациенток с острым сальпингоофоритом экспрессия гена TLR2 вслизистой цервикального канала была в 10 раз выше, чем этот показатель уженщин контрольной группы, и составляла 530,0 ± 5,3 × 103 копий гена. Разницастатистически достоверна (р < 0,05) (рис. 3.5, табл. 3.4).При этом в маточных трубах, наоборот, отмечено достоверное (р<0,05)значительное снижение экспрессии гена TRL2 (0,19 ± 0,12) по сравнению сконтрольной группой женщин (60,3 ± 1,7) (рис.

3.6).Экспрессия гена противомикробного пептида НBD1 в цервикальном каналеу женщин без патологии в малом тазу составила 76,8 ± 4,6 × 103 копий кДНК. В тоже время при остром сальпингоофорите этот показатель был в 3,2 раза ниже –24,2 ± 3,9 × 103' копий. Разница была статистически достоверной (р < 0,05).Достоверное снижение экспрессии гена HBD1 наблюдалось и в слизистойматочных труб – 28,3 ± 1,5х10 копий кДНК, что в 1,7 раза ниже по сравнению саналогичными показателями в группе женщин без патологии в малом тазу (48,5 ±14,8 × 103).60Рисунок 3.5. Экспрессия генов ТLR2 и HBD1 клетками слизистойцервикального канала у пациенток без патологии в малом тазу (контрольнаягруппа) и острым сальпингоофоритомПо оси ординат представлено относительное количество копий к ДНКисследуемого гена относительно 103 копий актина.Примечание: * - достоверные различия (р < 0,05) при сравнении междууровнями экспрессии генов TLR2 и HBD1 основной и контрольной групп.Рисунок 3.6.

Экспрессия генов ТLR2 и HBD1 клетками слизистой маточныхтруб у пациенток без патологии в малом тазу (контрольная группа) и острымсальпингоофоритомПо оси ординат представлено относительное количество копий к ДНКисследуемого гена относительно 103 копий актина.Примечание: * - достоверные различия (р < 0,05) при сравнении междууровнями экспрессии генов TLR2 и HBD1 основной и контрольной групп.61Таким образом, развитие воспалительного процесса в придатках маткисопровождается достоверным увеличением экспрессии гена ТLR2 в слизистойцервикального канала, что может быть реакцией на проникновение патогенов вслизистую оболочку [21, 22].

При этом уровень экспрессии гена HBD1 вслизистой цервикального канала достоверно снижается. Возможно, именноуменьшение экспрессии гена противомикробного пептида приводит к снижениюлокальной противоинфекционной защиты, что открывает пути для восходящегоинфицирования.В маточных трубах при остром сальпингоофорите наблюдается уменьшениеэкспрессии генов как распознающего рецептора ТLR2, так и эффекторноймолекулы HBD1 врожденного иммунитета, что способствует срыву иммуннойзащиты на уровне маточных труб и, следовательно, развитию остроговоспалительного процесса в маточных трубах.При индивидуальном анализе нам не удалось установить какой-либозависимости показателей врожденного иммунитета от характера возбудителейзаболевания.Возможно,чтовыявленныйдисбалансмеханизмовврожденногоиммунитета на уровне слизистой оболочки фаллопиевых труб является одним иззвеньев патогенеза сальпингоофорита.Данныеисследованияпозволяютвысказатьпредположениеоцелесообразности и важности определения экспрессии генов (TLR2 и HBD1) убольных с острыми гнойно-воспалительными заболеваниями придатков маткидля предотвращения осложнений и эффективности проводимого лечения.62ГЛАВА 4Комплексное лечение хронического сальпингоофорита с применениемиммунотропного препарата «Суперлимф»(собственные результаты)Хронический процесс (ХС) – это исход острого.

Причинами хронизациивоспаления могут быть снижение механизмов иммунологической защиты,несвоевременнаядиагностика,недостаточнаяэффективностьантибиотикотерапии, применяемой в острой стадии, резистентность возбудителей.Хронический сальпингоофорит характерен затяжным течением, с развитиемхронических тазовых болей, периодами ремиссии и обострения, а также высокойчастотойосложнений с формированием тубоовариальных воспалительныхобразований, значительной частотой внематочной беременности [101, 102].Известно, что ХС плохо поддается лечению.

И одним из тяжелых осложненийВЗОМТ является нарушение репродуктивного здоровья женщины, среди которыхнаиболее значимо бесплодие [87, 108]. Вследствие перенесенных обостренийвоспалительного процесса происходит образование спаек в области маточныхтруб и, как следствие, развитие бесплодия. Трубно-перитонеальный фактор вструктуре бесплодия составляет по разным данным от 35 – 74%. Степеньпоражения маточных труб находится в прямой коррелятивной связи сперенесѐнными острыми и хроническими заболеваниями придатков матки, атакже обусловлена частотой их рецидивов [30, 179].По мнению В.Н.