Диссертация (Влияние АКТГ4-7-ПГП (семакса) на морфофункциональное состояние гепатоцитов при различных видах стресса), страница 3

Активированный радикалами кислородаданный фактор индуцирует транскрипцию ряда стресс-опосредующих генов,включая гены антиоксидантных ферментов [227, 265]. Ряд исследований говорито том, что функционирование антиоксидантных ферментов является результатомсовместной работы сигналов, поступающих с глюкокортикоидных рецепторов иNF-kB [153, 157, 205].14Под действием стресс-индуцированной секреции большого количества биологически активных веществ – медиаторов и гормонов в организме происходитмобилизация и перераспределение энергоресурсов в направлении систем, обеспечивающих адаптацию к стрессору, интенсифицируются катаболические процессы,изменяются белок-синтетические процессы и проницаемость клеточных мембран,увеличивается внутриклеточная концентрации кальция [122, 237].

Долгосрочноевоздействие стрессора приводит к дисбалансу между про- и антиоксидантнымисистемами, к активации процессов свободнорадикального окисления и перекисного окисления липидов и в конечном итоге функциональным и структурным изменениям тканей и органов.1.2. Стрессиндуцированные изменения в печени и их механизмыПечень является высокочувствительным органом к воздействию стрессорных факторов, и несмотря на наличие обширного материала о влиянии стресса навозникновение патологических изменений в печени, механизмы данных процессов до настоящего времени полностью не раскрыты, и в литературе имеются многообразные результаты как экспериментальных, так и клинических исследований[221].Как известно, печень играет важную роль в развитии стрессорных реакций,обеспечивая метаболизм высокоэнергетических соединений: липидов и углеводов, необходимых для реализации адаптационных возможностей организма, ибелков, участвующих в стрессорном ответе [74, 231, 236].

Адаптивный ответ печени индуцируется стрессорной активацией глюкокортикоидов, которые, помимодругих эффектов, стимулируют глюконеогенез в печени [25, 195, 205].Установлено, что стресс приводит к аггравации патологии печени, а именно: усиливает выраженность воспалительных и фиброзных изменений при алкогольном гепатите [186], утяжеляет течение вирусного гепатита В и С [155, 222].Также описано, что пациенты с неалкогольным жировым гепатозом, подверженные эмоциональному стрессу с признаками депрессии, в 3,6 раза чаще имеют гид-15ропическую дистрофию печени по сравнению с пациентами, не подверженнымистрессорному воздействию [136].Известно, что одним из ведущих механизмов повреждения печени пристрессе является нарушение ее кровоснабжения вследствие стрессорной индукциивазоспазма с последующим нарушением микроциркуляции [254] и развитием центролобулярной гипоксии и ишемии ткани печени [180, 192], что ведет к активации проксидантных систем.

Учитывая, что печень крыс характеризуется богатымсодержанием полиненасыщенных жирных кислот, составляющих около 40% липидов мембран гепатоцитов [115] и являющихся хорошим субстратом для перекисного окисления, предполагают, что липидная пероксидация и альтерация антиоксидантных систем являются важнейшими механизмами повреждения гепатоцитов [68, 185, 231, 234, 264].В нормальных условиях в печени постоянно продуцируется небольшое количество АФК. Клетки Купфера продуцируют АФК в ответ на антигенную стимуляцию, звездчатые клетки содержат нефагоцитарную форму НАДФ-оксидазы,также вызывающую базальное образование АФК.

Причем данная их функция активно вовлечена в развитие воспалительных повреждений печени [154]. Такжеследует отметить, что печень обладает одним из самых высоких ферментных антиоксидантных потенциалов вследствие ее уникальной роли в метаболическихпроцессах [210].

В печени синтезируются гуморальные белковые антиоксидантные факторы [55, 252]. На модели 30-суточной гипокинезии крыс выявлено взаимовлияние синтеза гуморальных антиоксидантных белков и антиоксидантныхферментов гепатоцитами [55]. Установлено, что увеличение общей антиоксидантной активности крови сопровождалось подавлением активности СОД и каталазы вткани печени на фоне повышения уровня вторичных продуктов ПОЛ как в крови,так и в ткани печени, что обусловлено лимитированием использования аминокислот в печени для синтеза антиоксидантных ферментов в пользу гуморальных антиоксидантных белков.

Кроме того, установлено, что данное воздействие характеризуется не только липидной пероксидацией, но и окислением белка печени[107], что подтверждается ростом содержания карбонилированного белка к 3-м16суткам эксперимента на фоне трехкратного прироста активности моноаминооксидазы Б, которая, как известно, способна утяжелять оксидативный стресс вследствие синтеза побочного продукта окислительного дезаминирования – перекисиводорода [28]. В дальнейшем, к 7-м суткам эксперимента, процессы ПОЛ характеризовались высокой интенсивностью, а в печени наблюдались дистрофическиепроцессы в виде снижения содержания общего белка.

Адаптивный ответ организма реализовался на данном этапе в виде снижения окислительной модификациибелков и протеолитических процессов в печени. К 10-м суткам наблюдалось истощение адаптивного резерва печени, и уровень карбонилирования белка сновавозрастал на фоне продолжающегося падения содержания белка в печени и нормализации активности моноаминооксидазы Б.Стресс-индуцированная активность антиоксидантных систем печени вомногом зависит от типа стрессора, продолжительности и интенсивности стрессорного воздействия [194, 208]. Так, острое воздействие в форме 30-минутнойиммобилизации, хроническое – в виде 21-дневной изоляции крыс, а также ихкомбинация приводили к значительному увеличению активности СОД в гепатоцитах, тогда как при остром и комбинированном воздействии отмечалась активация и СОД, и каталазы [1, 150].Однократное 60-минутное электроболевое воздействие на самцов крыс, егоежедневное повторение на протяжении 15 дней, а также психоэмоциональноевоздействие с такой же продолжительностью приводили к активации СОД, тогдакак увеличение продолжительности эксперимента до 30 дней нивелировало данный эффект.

Следует отметить, что психоэмоциональное воздействие вызывалоболее значительные отклонения данного показателя [228]. Вариации активностикаталазы носили иной характер. В случае психоэмоционального воздействия отмечалось снижение активности каталазы на 29,74% при однократном воздействиии на 24,41% – на 15-й день эксперимента. К 30-му дню активность каталазы восстанавливалась.

При этом электроболевое воздействие не вызывало статистическизначимых отклонений в активности каталазы на всем протяжении исследования.Уменьшение активности каталазы на фоне повышения активности СОД наблю-17далось и при однократной 30-минутной и двукратной 5-часовой иммобилизацииживотных [1].Наряду с колебанием активности энзимов-антиоксидантов наблюдались изменения и в содержании продуктов ПОЛ в гомогенате тканей печени.

Так, достоверное увеличение уровня МДА зафиксировано при психоэмоциональном стрессировании в 1-й и 30-й день эксперимента [228], в условиях хронического гипокинетического стресса (по 2 часа на протяжении 60 дней) [162], при 22-часовойвертикальной фиксации крыс за шейную складку [74].Стрессорное воздействие вызывает изменение относительной массы печени.Животные, подвергаемые 30-минутной гипокинезии на протяжении 2 недель, значительно медленнее набирали в весе и имели меньший индекс массы печени посравнению с контрольными [133], тогда как двухчасовая гипокинезия на протяжении 60 дней приводила к увеличению относительной массы печени [162].Экспериментальными моделями установлено, что стресс является триггеромразвития повреждения печени крыс, что проявляется цитолизом гепатоцитов иповышением активности аминотрансфераз в сыворотке крови (АлАТ) [46, 162,168, 185] и одновременно снижением их активности в печени [46].

При этом величина цитолитических эффектов зависит от используемой модели стресса.Гипокинезия оказывала более мягкое воздействие по сравнению с иммобилизацией животных на спине и вызывала небольшое увеличение активности трансаминаз, причем реакция АсАТ на стрессорный стимул была интенсивнее. В случае сочетания гипокинезии с холодовым воздействием отмечалось резкое увеличение активность АсАТ на фоне небольшого подъема АлАТ.

Также активностьАсАТ достоверно возрастала уже через 20 минут от начала иммобилизации, а после 3 часов воздействия отмечалось 7-кратное превышение данного показателя,тогда как в активности АлАТ наблюдались менее выраженные изменения. К 3 часам стрессирования зафиксировано трехкратное увеличение активности АлАТ, апосле 20 минут иммобилизации активность АлАТ была без существенных изменений [199]. Показатель де Ритиса – отношение АсАТ/АлАТ, используемый в18клинической практике для оценки поражения печени [140], возрастал в течениевоздействия.При конфронтационном стрессе вторжения цитолитический синдромнаблюдался только после 3-часового воздействия, а активность аминотрансферазувеличивалась параллельно друг другу, что подтверждалось постоянством коэффициента де Ритиса [199].Работы других авторов свидетельствуют об отсутствии достоверных различий в концентрации сывороточных трансаминаз при иммобилизационном стрессе[164], отмечая при этом увеличение экспрессии мРНК TNFα, MCP-1 (Monocytechemoattractant protein-1) and HMOX (hemoxygenase-1) в печени под действиемхронического психоэмоционального стресса [163].Различными изменениями характеризуется и динамика запасов гликогена впечени.