Диссертация (Клиническое значение эндотелиальной дисфункции в развитии акушерских и перинатальных осложнений), страница 15

У 24 женщин (26,7%) основной группы ванамнезе выявлен артифициальный аборт и у 52 женщин (57,7%) – в контрольнойгруппе (p≤0,001, t=4,43).85Контрол.группа,n=902932,226*7*24**12,2*11,12,26,7*7,8*26,7**Артифициальныеаборты10Преэклампсия ванамнезе11*ПривычноеневынашиваниеВыкидыш на срокеболее 12 недельВыкидыш на сроке8-12 недельОсновная абс.группа,n=90%Выкидыш на срокедо 8 недельПоказательПервобеременныеТаблица 10 – Акушерский анамнез в исследуемых группах.абс.-36--152%-3,36,7--1,1157,7Примечание: * p≤0,05 (достоверность различий установлена по отношению кпоказателям контрольной группы).** p≤0,001 (достоверность различий установлена по отношению к показателямконтрольной группы).При исследовании гинекологической патологии получены следующиерезультаты (таблица 11). Бесплодие в анамнезе выявлено у 2 пациенток (2,2%) восновной группе и ни у одной – в контрольной.

Гиперпластические процессыэндометрия диагностировались до настоящей беременности у 1 беременнойосновной группы (1,11%) и у 2 женщин группы контроля (2,2%). Миома маткивыявлялась у 4 берменных в основной группе (4,4%) и у 6 – в контрольной (6,7%).Эндометриоз до настоящей беременности выявлен у 7 женщин основной группы(7,8%), и у 10 женщин контрольной группы (11,1%). Аномалии развития маткивыявлены у 1 пациентки основной группы (1,1%) и у 1 – в контрольной группе(1,1%). Воспалительные заболевания половой системы выявлялись до настоящейбеременности у 8 женщин основной группы (8,9%) и у 13 беременных группыконтроля (14,4%).

ИППП обнаруживались в течение 6 месяцев до настоящейбеременности у 20 пациенток основной группы (21,1%), и у 14 – в контрольнойгруппе (15,6%). Дисфункциональные маточные кровотечения ювенильного илирепродуктивного периода до настоящей беременности диагностировались у 986пациенток основной группы (10%), и у 1 пациентки контрольной группы (1,11%)(p<0,05; t=2,66).

Эктопия шейки матки диагностировалась у 30 женщин основнойгруппы (33,3%), и у 39 человек группы контроля (43,3%).Эктопия ш/маткиДисфункциональныекровотечения214718209*30%2,21,14,47,81,18,921,110*33,3Контрол.группа,n=90абс.-261011314139%-2,26,611,11,114,415,61,143,3БесплодиеИПППЭндометриозабс.ГиперплазияэндометрияОсновнаягруппа,n=90ПоказательМиом маткиДвурогая маткаОстрый или хр.сальпингоофоритТаблица 11 – Гинекологическая патология в исследуемых группах.Примечание: * p≤0,05 (достоверность различий установлена по отношению кпоказателям контрольной группы).Таким образом, на I этапе исследования сравнение клинико-статистическихданных в исследуемых группах прдемонстрировало следующие результаты.

Повозрасту и антропометрическим показателям сравниваемые группы былистатистически сопоставимы. Следует отметить, что в основной группевстречались в 2 раза чаще беременные с ожирением II степени. При изученииобраза жизни обнаружено, что гиподинамия у женщин основной группывстречалась гораздо чаще, что явилось достоверным отличием в нашемисследовании(p≤0,001).Табакокурениевывлялосьдостоверночащевконтрольной группе (p≤0,001).

Статистически достоверных значимых различийпри исследовании заболеваемости у женщин исследуемых групп выявлено небыло. При изучении предыдущих беременностей обнаружены достоверно болеевысокие показатели невынашивания и акушерской патологии в основной группепосравнениюсданнымиконтрольнойгруппы.Приисследовании87гинекологической патологии следует выделить дисфунциональные маточныекровотечения, которые также достоверно чаще встречались у пациенток основнойгруппы.

По остальным параметрам исследуемый контингент был статистическисопоставим.3.2.Морфоденситометриядесквамированныхэндотелиоцитовпериферической крови у беременныхЦелью I этапа исследования стала унификация показателей эндотелия спомощью морфоденситометрии циркулирующих ДЭК периферической крови.Данный этап был необходим для аккумуляции достаточного объема выборокклеточныхпрепаратовсцельюоценкифизиологическихвариантовколичественных и качественных особенностей ДЭК периферической крови уженщины во время беременности. Благодаря объему обработанной информацииопытнымпутемобъективизациииспользованиембыласозданапораженияноваяинформационнаяэндотелиальнойвитальнойсистемыкомпьютернойубиотехнологиябеременныхсморфоденситометриидесквамированных эндотелиоцитов периферической крови.Наосноветрадиционнойметодикиподсчетадесквамированныхэндотелиоцитов периферической крови, предложенной J.Hladovec и соавт.

(1978),мы использовали метод морфоденситометрической оценки циркулирующихдесквамированных эндотелиоцитов с целью получения большего объемаинформации о состоянии эндотелия человека в русле проводимого исследования.В работе был использован модифицированный метод подсчета десквамированныхэндотелиоцитов (Овсяник Д.М., Фомин А.В., 2014), который включаетединовременную окраску препарата 0,1% раствором метиленового синего(рисунки 4а-4г).88а)б)в)г)Рисунки 4а-4г – Десквамированные эндотелиоциты в камере Горяева.Окраска метиленовый синий. Увеличение 400×.При использованной нами окраске 0,1% раствором метиленового синегоцитоплазма десквамированных эндотелиоцитов окрашивалась в голубой цвет,многочисленные гранулы – результат фрагментации ядра – в синий цвет, чтопозволяло получить наилучший цветовой контраст между изображением ДЭК ифоном.

У каждого пациента проводился подсчет количества ДЭК в 10 пробахкамеры Горяева, и определялось среднее значение количества циркулирующихДЭК. Единовременно проводилась съемка препарата с тубуса микроскопафотокамерой, перенос и сохранение изображения с использованием программыдля конвертирования файлов. В автоматическом режиме осуществлялась тоновая89коррекция изображения для минимизации уровня ошибок, связанных с окраской иосвещением.

Изображение биообъектов выделялось (сегментировалось) подконтролем оператора и определялись средние морфометрические параметрыдесквамированных эндотелиоцитов.Приоценкеколичествадесквамированныхэндотелиоцитоввпериферической крови у исследуемых контрольной группы получены следующиерезультаты (таблица 12).Таблица 12 – Морфометрические показатели десквамированныхэндотелиоцитов у беременных контрольной группы (n=90).ПараметрКоличество,104кл/100млДиаметр,мкмПериметр,мкмПлощадь,мкм²ФакторформыПоляризацияКоличествоизмеренийСреднее,ММахMinСт.

отклонение,±m9005,51512,12900043,949,9353,999000139,6159,799,214,1090001546,82003,9775,9294,11900012,712,9812,540,1190000,080,130,040,021Среднее количество десквамированных эндотелиоцитов составило 5,5×104клеток/100мл. Диапазон колебаний среднего количества клеток определен впределах от 1 до 15×104 клеток/100мл.

Стандартное отклонение данногопоказателя составило ±2,12×104 клеток/100мл.Цитологияобнаруживаетциркулирующихразнородностьформыдесквамированныхиразмераэндотелиоцитовисследуемыхклеток.Десквамированный эндотелиоцит представляет дисковидную клетку округлойили неправильной формы с ровной или ломаной границей диаметром до 50 мкм.В работе использовались следующие морфометрические параметры: среднийэквивалентный диаметр, средний периметр, средняя площадь, фактор формы,поляризаця.90Эквивалентный диаметр – длина отрезка между максимально удаленнымипикселами изображения объекта на плоскости – составил в контрольной группе43,9 мкм. Диапазон колебаний средних значений диаметра ДЭК контрольнойгруппы варьировал от 35 мкм до 50 мкм.

Стандартное отклонение данногопоказателя составило ±3,99 мкм (рисунок 5).Рисунок 5 – Десквамированный эндотелиоцит периферической крови,контрольная группа. Морфометрическое исследование в программе LeikaApplication Suite LAZ EZ Version 2.1.0. (2012). Окраска метиленовый синий.Увеличение 600×.Десквамированные эндотелиоциты имеют полигональную форму, иопределение периметра и площади клетки позволяет расширить цитометрическуюхарактеристикуисследуемогообъекта.Периметр–суммапикселов,выполняющих линию границы клетки. Средний периметр десквамированныхэндотелиоцитов у здоровых беременных составил 139,6 мкм. Диапазон колебанийданного показателя определен от 99,2 мкм до 159,7 мкм.

Стандартное отклонениесоставило ±14,10 мкм.Площадь объекта – сумма пикселов изображения, которые принимаются заисследуемую клетку. Средняя площадь ДЭК в контрольной группе составила1546,8 мкм². Диапазон колебаний площади десквамированного эндотелиоцита вконтрольной группе составил от 775,9 до 2003,9 мкм². Стандартное отклонениеэтого показателя составило ±294,11 мкм².Фактор формы –параметр изрезанности периметра цитообъекта –безразмерная величина, являющаяся комбинацией характеристик формы иразмера клетки.Фактор формы круга равен 12,56.

Данный параметр91морфометрического исследования демонстрирует приближение формы объекта кформе круга. Фактор формы ДЭК в контрольной группе составил 12,7. Диапазонколебаний данной величины – от 12,54 до 12,98. Стандартная ошибка ±0,11.Поляризацияявляетсяхарактеристикойэллиптичностиоптическогообъекта, и варьирует от 0 до 2. Деструкция эндотелиоцита при десквамациисопровождается потерей округлой формы клетки. Данный параметр можетиспользоватьсякакдополнительнаядеквамированной эндотелиальной клетки.морфометрическаяхарактеристикаПоляризация ДЭК в контрольнойгруппе составила 0,08. Вариация показателей составила от 0,04 до 0,13.Стандартное отклонение ±0,024.Витальная компьютерная морфометрия десквамированного эндотелия убеременных основной группы продемонстрировала следующие результаты(таблица 13).

При подсчете количества циркулирующих ДЭК в основной группесредний результат составил 12,6×104 клеток/100мл. Разброс среднего количестваДЭК составил от 1×104 до 29×104 клеток/100мл. Стандартное отклонение данногопараметра от среднего значения составило ±5,89 клеток/100 мл.Таблица 13 - Морфометрические показатели десквамированныхэндотелиоцитов у беременных основной группы (n=90).ПараметрКоличество,104кл/100млСр. диаметр,мкмПериметр,мкмПлощадь,мкм²ФакторформыПоляризацияКоличествоизмеренийСреднее,ММахMinСт. отклонение,±m90012,62915,89900029,549119,40900093,81563629,909000842,02122,6113484,44900011,214,59,390,7790000,140,340,060,05392Средний эквивалентный диаметр десквамированного эндотелиоцита убеременных основной группы составил 29,5 мкм. Диапазон колебаний составил11-49 мкм.

Стандартное отклонение данного параметра ±9,40 мкм (рисунок 6).Средний периметр десквамированного эндотелиоцита в основной группесоставил 93,8 мкм, при этом минмиальное значение параметра составило 36 мкм,максимальное 156 мкм. Стандартное отклонение от среднего значения составило±29,90 мкм.Рисунок 6 – Десквамированный эндотелиоцит периферической крови,основная группа.

Морфометрическое исследование в программе LeikaApplication Suite LAZ EZ Version 2.1.0. (2012). Окраска метиленовый синий.Увеличение 600×.Средняя площадь десквамированных эндотелиоцитов в основной группесоставила 842,0 мкм².Диапазон отклонения параметра от среднего значенияопределен в пределах от 113 до 2122,6 мкм². Стандартная ошибка значениясоставила ±484,44 мкм². Исследование фактора формы в основной группе далоследующие результаты.