Автореферат (Методы лазерного светорассеяния в контроле качества водных растворов фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ), страница 8

Константы скорости и КИЭ растворения лактозы моногидрата разныхсерий, гранулированной в псевдоожиженом слое, в воде с разным содержанием2тяжелого изотопа 1 H ( D) (n=3, P=0,95).СерияобразцаММ25711ММ25712( ± SD),сек-12Вода с содержанием 1 H ( D)2Вода с содержанием 1 H ( D)140ppm4ppm(1,01± 0,09) ∙10-2(1,23± 0,08) ∙10-2(0,91± 0,07) ∙10-2(1,68± 0,12) ∙10-2381,21,8ММ25713ММ25714ММ25715ММ25716(0,88± 0,08) ∙10-2(1,23± 0,06) ∙10-21,4(1,02± 0,09) ∙10-2(1,06± 0,07) ∙10-21,0(0,98± 0,07) ∙10-2(1,79± 0,17) ∙10-21,8(1,11± 0,08) ∙10-2(1,00± 0,06) ∙10-20,9Показано (см. табл.9, рис.

20), что наибольшие значения кинетическогоизотопногоэффекта:=1,8и1,4‒соответствуютрастворениюфармацевтических композиций, полученных в результате псевдоожижения грануллактозы с растворами БАВ: ИНФ-γ, NO-S(серии 25712 и 26713) и водой,характеризующиеся бóльшей чувствительностью к разнице нуклеарных массдейтерий/протий и частичному изотопному замещению в растворителе.Рисунок 20.Гистограмма распределения константскоростирастворенияфармацевтическихкомпозицийлактозы, различающихся условиямитехнологической грануляции, в воде сразнымсодержаниемтяжелого2 -1k+-SD,10 ,c2,0140ppm4ppm1,51,00,520,01234 ММ257155 ММ257166ММ25711ММ25712ММ25713ММ25714Серии лактозы моногидратаизотопа 1 H ( D) .Синий цвет – водаddw; черный – вода MiliQ.Результаты данного исследования можно использовать для контроля качестваЛС как на стадии разработки веществ‒кандидатов, так и в технологическомпроцессепроизводствалекарственныхпрепаратовдляулучшениясолюбилизационных характеристик лекарственных средств и, следовательно,фармакокинетических характеристик.6.Влияния механоактивации на дисперсные свойства и кинетикурастворения в воде ВВ в условиях реализации КИЭ по растворителюОдним из способов активации физико‒химических процессов при изучениисвойств порошков АФИ in vitro является механическая обработка.

Данный процесссопровождается диспергированием, увеличением площади удельной поверхности,морфологии и среднего размера частиц порошка, формированием центров сповышенной активностью на вновь образованных поверхностях и, как следствие,накоплением точечных дефектов, аморфных областей, дислокаций, дисклинаций и39т.д. Эти неравновесные состояния с высоко запасенной энергией деформацииоказывают существенное влияние на физические и механические свойстваматериалов.Методика.

Микроструктурирование лактозы моногидрата (ООО «Химмед»)проводили в течение 20 минут в импульсном режиме, т.е. с чередованиемпроцессов возникновения поля напряжения и его релаксацией с использованиеммеханической режущей ножевой мельнице по типу «свободного, прямого удара»(по Румпфу) (рис. 21).Рисунок 21.Способ передачи механическоговоздействия (по Румпфу).6.1.Микроскопическое исследование. С целью контроля размера и формы частицдо и после проведенной механической обработки нами был применен методоптической микроскопии (рис.

22).НативнаяМикроструктурированнаяФорма частицПластины, характерно агломерированиеЧастицы с отколотыми краями, неровнойповерхностью, характерно агломерированиеРисунок 22. Внешний вид и размеры кристаллов лактозы моногидрат (ООО«Химмед») по данным метода оптической микроскопии.После механообработки испытуемых субстанций возникают частицы сотколотыми краями, шероховатой и неровной поверхностью, с характернымагломерированиемчастиц.Уменьшениеразмера,увеличениеплощадиповерхности частиц и накопление в кристаллах дефектов дислокации влияет нарастворение.40Кинетика растворения после проведения механоактивации6.2.Намиполученырезультатыисследованиямеханохимическихпревращений в реакции «твердое тело ‒ жидкость» на примере увеличениясолюбилизационных характеристик лактозы моногидрат (ООО «Химмед»).В фармации данное направление получило свое развитие благодарязначительномуувеличениюмалорастворимыхсолюбилизационныхлекарственныхвеществи,какхарактеристикследствие,повышениюэффективности и безопасности АФИ.

Результаты демонстрируют достоверноеувеличение (~ в 1,5 раза) скорости растворения образцов лактозы моногидрата в воде,обедненной по дейтерию, в сравнении с водой MiliQ после МА. В тяжелой воде (D2O)скорость растворения замедляется в 2,6 раза (рис. 23).Рисунок 23.ГистограммаскоростимоногидратаМА в воде432распределения константрастворениялактозыдо и после проведенияс разным содержанием2изотопа 1 H ( D) . Синий цвет – образцырастворовнативнойсубстанции;голубой – образцы растворов МАсубстанции.1041401000000D/H,ppm7.Аррениусовская кинетика лиганд-индуцированной гибели S. ambiguumв водных растворах нативных и механоактивированных субстанцийОписаниемеханизмовлиганд-рецепторноговзаимодействияприисследовании биологической активности субстанций позволяет количественнооценить биологический ответ эфферентной системы (клетки) на эндогенное /экзогенное воздействие токсиканта.

Допускается, что взаимодействие лиганда срецептором (Склетки+nL), а также распад лиганд-рецепторных комплексовпроисходит случайным образом через изменения концентрации рецептора за счетконформационныхизменений,деградации,синтезаобразование промежуточного состояния CLn. (рис. 24).41новыхрецепторовиПромежуточноесостояниеCLnKpС (клетка)+nLfmDC (мертвая клетка)Рисунок 24. Кинетическая схема лиганд‒рецепторного взаимодействия S.ambiguum.Наиболее информативными показателями биологической активностихимических соединений являются аррениусовские характеристики кинетикигибели простейших: = · −⁄13Логарифмическая форма уравнения Аррениуса аналогична уравнению прямой: = −·,‒ постоянная величина для данной реакции14Поэтому в полулогарифмических координатах y= ln k, x= 1/Т по тангенсу угланаклона прямой к оси абсцисс (tg β) можно определить энергию активации гибеликлеточной культуры при воздействии токсиканта: Еа= - R· tgβ15Аппарат химической кинетики позволит объяснить механизм произведенныхмеханических воздействий на порошки испытуемых субстанций.

Избыточнаяэнергия и релаксация поля напряжения, связанные с МА порошка субстанции,уменьшают эффективную энергию активации химической реакции.Изучение температурной зависимости лиганд‒индуцированной гибели тест‒объектов проводилось нами в температурном диапазоне 26÷32ºС с шагом 2°С вводных растворах лактозы моногидрата, бендазола г/хл и NaC (Глава 3.8.4. ТомаДиссертации). На рис. 25 представлены результаты по исследованию в 0,025%растворах бендазола гидрохлорида. Получены статистически значимые различиязначений энергии активации лиганд‒индуцированной гибели тест‒объектов (табл.10). Эффект механоактивации составил 2,3 раза.нативныйактивированный бендазол3,51,23,01,0tж, минtж, мин2,52,00,81,50,61,020,410,50,20,0298300302304298306300302304306T,KT,KРисунок 25.

Зависимость времени жизни клеточного биосенсора S. ambiguum оттемпературы в 0,025% водных растворах бендазола гидрохлорида (Р111202) в прямых и42в аррениусовских координатах (на вставках): 1‒ до МА, 2 ‒ после МА. (n=5, р=0,90).Таблица 10. Оценка повторяемости методики (n=5, f=4). ̿ , кДж/мольSDP, %tp,f∆, %( ± ∆)Бендазола гидрохлорид до механической активации21540902,133918215±39Бендазола гидрохлорид после механической активации9418902,13171894±17Анализ полученных температурных зависимостей времени жизни клеточногобиосенсора в растворах механоактивированных субстанций-порошков АФИ и ВВуказываютнавзаимодействия«структурный»факторS.Измельчениеambiguum.сниженияЕаobsпорошкалиганд‒рецепторногосубстанцийпотипу«свободного, прямого удара» уменьшает масштаб гетерогенности, определяющийхарактерное время массопереноса реагентов (лигандов и клеточного рецептора) другк другу.

Это способствует увеличению скорости реакции и уменьшению энергииактивации. После измельчения свободная поверхность не является равновесной истатически устойчивой − в приповерхностном слое начинаются процессыперестройки по направлению к равновесному состоянию. Упорядочение структуры(переход«порядок—беспорядок—новыйпорядок»)значительнозависитоттемпературы системы в целом.ВЫВОДЫ1.Разработаны научно-методологические подходы к оценке качества лекарственныхсубстанций (бендазола гидрохлорида, топирамата), вспомогательных веществ (лактозымоногидрата),готовых лекарственных форм (инсулина аспартата, календулы и пионауклоняющегося настойки), биологически-активных веществ (природных и синтезированныхбиорегуляторных пептидов, бычьего сывороточного альбумина), бактериальных культур(клетки штамма E.

Coli K-12) и минеральных вод на основании результатов исследованиялазерного светорассеяния в условиях изотопного (D/Н) варьирования состава растворителя,дисперсного состава и условий пробоподготовки растворяемого вещества.2.Описана метрология измерительных методов и создан измерительный комплекс в рамкахГосударственной поверочной схемы измерения параметров дисперсности порошков, суспензийи аэрозолей, включающие: разработку собственного измерителя дисперсности лазерного(ИДЛ−1), испытание собственного портативного счетчика аэрозольных частиц (А−2), созданиерабочих эталонов порошкообразных материалов и взвесей частиц для оценки качества ЛС.Определены основные метрологические характеристики (неисключенная относительнаяпогрешность δ, % стандартная, расширенная неопределенности при измерении диаметра,43счетной, объемной концентраций, функции распределения частиц по размеру) современныхизмерителей дисперсности.3.Продемонстрированы преимущества применения косвенных методов (динамического истатического светорассеяния) для стандартизации и контроля качества различныхфармацевтических объектов (гомогенных и гетерогенных растворов АФИ, настоек,минеральных вод, растворов биорегуляторных белков, бактериальных культур) по показателям«описание», «чистота», «подлинность».

В сравнении с методами прямого измерения(оптическаямикроскопия)этодаетвозможностьпроведениястатистическойморфометрической оценки всей анализируемой пробы в широком диапазоне определяемыхразмеров (1нм ‒ 100мкм) и анализа, численного и объемного распределений.4.Разработан и применен образец лабораторного оборудования, сочетающий метод ОКМ синтерферометрией для экспресс-идентификации без вскрытия упаковки водных растворов NaClразной концентрации, включая 0,9% (изотонический) раствор по индивидуальномурасположению «облаков рассеяния» на двумерных диаграммах.