Диссертация (Определение лекарственных средств неорганической природы методом капиллярного электрофореза)

ГБОУ ВПО ПЕРВЫЙ МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙМЕДИЦИНСКИЙУНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ И.М.СЕЧЕНОВАНа правах рукописиМалинкин Алексей Дмитриевич«Определение лекарственных средств неорганической природы методомкапиллярного электрофореза»14.04.02 – фармацевтическая химия, фармакогнозияДиссертацияНа соискание ученой степеникандидата фармацевтических наукНаучные руководители:доктор фармацевтических наук, В.

И. Прокофьева,доктор биологических наук, В. В. БессоновМосква – 20162Содержание.СОДЕРЖАНИЕ. ............................................................................................................ 2ВВЕДЕНИЕ .....................................................................................................................

6ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ........................................................................... 111.1 Неорганические ионы в лекарственных средствах ....................................... 111.2 Методы анализа неорганических ионов........................................................... 161.3 Метод капиллярного электрофореза в анализе неорганических ионов. ... 231.3.1 Сущность метода капиллярного электрофореза............................................ 241.3.1.1 Особенности метода капиллярного электрофореза. .................................. 241.3.1.1 Основные принципы капиллярного электрофореза.

.................................. 251.3.1.2 Факторы, влияющие на разделение компонентов пробы при капиллярномэлектрофорезе............................................................................................................. 291.3.1.4 Разновидности капиллярного электрофореза. ............................................

321.3.1.5 Капилляры и их кондиционирование. ......................................................... 351.3.2 Особенности состава буферного раствора для анализа неорганическихионов методом капиллярного зонального электрофореза ..................................... 381.3.2.1 Особенности анализа катионов. ................................................................... 391.3.2.2 Особенности анализа анионов...................................................................... 41Выводы из обзора литературы. ................................................................................ 44ГЛАВА 2. МЕТОДЫ И МАТЕРИАЛЫ. ................................................................. 462.1 Объекты исследования. .......................................................................................

462.2 Оборудование. ........................................................................................................ 4832.3 Реактивы и расходные материалы. ................................................................... 48ГЛАВА 3. ОПТИМИЗАЦИЯ УСЛОВИЙ РАЗДЕЛЕНИЯ ИДЕТЕКТИРОВАНИЯ МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОГО ЭЛЕКТРОФОРЕЗА. 513.1 Подбор условий разделения и детектирования катионов. ...........................

513.1.1 Подбор концентрации контрастного вещества.............................................. 523.2 Тест пригодности электрофоретической системы для определениякатионов. .......................................................................................................................

603.3 Валидация методики идентификации и количественного определениякатионов. ....................................................................................................................... 603.3.1 Валидация и метрологическая оценка методики для качественного иколичественного анализа растворов для инфузий. ................................................ 613.3.2 Валидация и метрологическая оценка методики в диапазоне 80-120 мг/лдля качественного и количественного определения катионов калия, кальция,натрия и магния в таблетированных лекарственных препаратах.

........................ 73Выводы по главе 3....................................................................................................... 83ГЛАВА 4. ОПРЕДЕЛЕНИЕ КАТИОНОВ В ЛЕКАРСТВЕННЫХПРЕПАРАТАХ. ............................................................................................................ 844.1 Исследование растворов для инфузий. ............................................................. 844.2 Количественное определение катионов калия, натрия, кальция, магния влекарственных препаратах различной химической структуры.

.................... 102Выводы по главе 4..................................................................................................... 110ОБЩИЕ ВЫВОДЫ. .................................................................................................. 111СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ. ............................................

1124ПРИЛОЖЕНИЕ 1. ..................................................................................................... 119ПРИЛОЖЕНИЕ 2. ..................................................................................................... 124ПРИЛОЖЕНИЕ 3. ..................................................................................................... 1285СПИСОК СОКРАЩЕНИЙBP – British PharmacopoeiaEP – European PharmacopeiaЦТАБ – цетилтриметиламмоний бромистыйSDS – натрия додецилсульфатUSP – United States PharmacopeiaААС - атомно-абсорбционная спектроскопияБАД – биологически активная добавкаВЭЖХ – высокоэффективная жидкостная хроматографияГФ – государственная фармакопеяКЭХ (англ.

СЕС) – капиллярная электрохроматографияКЗЭ – капиллярный зональный электрофорезКЭ – капиллярный электрофорезЛС – лекарственное средствоМЭКХ (англ. MEKC) – мицеллярная электрокинетическая хроматографияНД – нормативная документацияОФС – общая фармакопейная статьяПАВ – поверхностно-активные веществаУФ – ультрафиолетовыйФСП – фармакопейная статья предприятияЭД – электрохимическое детектированиеЭОП – электроосмотический потокICH (англ.

The International Conference on Harmonisation of Technical Requirementsfor Registration of Pharmaceuticals for Human Use) – Международная конференцияпо гармонизации технических требований к регистрации лекарственныхпрепаратов для людей.кЧТТ – кажущееся число теоретических тарелок6ВведениеНеорганические ионы входят в состав многих лекарственных препаратовнеорганической природы, а также в состав витаминно-минеральных комплексов.Они применяются как вещества, обладающие самостоятельным действием, каккомпоненты действующих веществ (солеобразователи, комплексообразователи идр.), а также как компоненты вспомогательных веществ. В нашей работе мыопределяли содержание катионов: калия, натрия, магния, кальция. Выборобусловлен тем, что данные ионы являются наиболее часто встречающимися всоставе лекарственных препаратов.Внастоящеевремявнормативнойдокументациинапрепаратынеорганической природы, помимо качественных реакций на подлинность, приколичественном определении катионов металлов преимущественно используютсяметоды пламенной фотометрии и комплексонометрии; для анализа анионовприменяются различные варианты титрования [5; 22; 36; 66; 67].Метод капиллярного электрофореза (КЭ) является весьма универсальным,поскольку позволяет определять вещества различной структуры: от полимерныхмолекул до неорганических ионов.

Благодаря этому КЭ находит применение всамых различных отраслях: криминалистике [10; 32; 35], исследованияхокружающей среды [33; 38], фармации [3; 6; 36] контроле пищевых продуктов [2;3; 40; 41] и т.д.Как фармакопейный метод анализа КЭ описан в зарубежных фармакопеяхи входит в фармакопейные статьи по идентификации эритропоэтина, анализачистоты соматотропина, апротинина, глутатиона, левокабастинана, определенияэнантиомерной чистоты галантамина и ропивакаина [22; 36; 66; 67]. Общаяфармакопейная статья (ОФС) «Капиллярный электрофорез» представлена длявключения в Государственную Фармакопею РФ тринадцатого издания.

Всравнении с перечисленными методами при анализе ионов метод капиллярногозонального электрофореза обладает следующими преимуществами: возможностьодновременногосовместногоопределениянесколькихионов,простота7подготовки пробы, незначительные затраты времени на анализ, возможностьавтоматизации [7; 8; 27; 65]. Однако у данного метода имеются и недостатки:необходимость сравнительно точного воспроизведения состава буферногораствора, возможные отклонения в объеме ввода пробы.Цель работы: Разработка методики определения калия, кальция, магния,натриявлекарственныхсредствахнеорганическойприродыметодомкапиллярного электрофореза.Задачи исследования:1.По данным литературы изучить и сравнить существующие методыанализа лекарственных веществ неорганической природы, содержащих ионыкалия, натрия, магния, кальция.2.Разработатьусловияподготовкиинфузионныхрастворовитаблетированных лекарственных препаратов, содержащих неорганические ионыдля их последующего определения.3.Установить оптимальные условия электрофоретического разделениякатионов для их определения в лекарственных препаратах методом капиллярногоэлектрофореза.4.Оценить электрофоретические параметры (разрешение, соотношениесигнал/шум, порядок и времена миграции) и провести валидацию разработанныхметодик.5.Применить разработанную методику для оценки качества различныхинфузионныхрастворовитаблетированныхлекарственныхпрепаратов,содержащих неорганические ионы.Научная новизна.