Отзыв Швец С.В. (Разработка и применение методов ПЦР и ИФА для анализа остаточных ДНК и белков штаммов-продуцентов в биофармацевтических субстанциях)

отзыв на автореферат диссертации Ковалевой Екатерины Викторовны «Разработка и применение методов ПЦР и ИФА для анализа остаточной ДНК и белков штаммов-продуцеитов в биофармацевтических субстанциях», представленной на соискание ученой степени кандидата химических наук по специальности 03.01.0б — Биотехнология ~в том числе бионанотехнологии) Диссертационная работа Ковалевой Е.В. посвящена разработке чувствительных и специфичных методов, необходимых для оценки фармацевтических аспектов качества и безопасности препаратов, получаемых на основе технологии рекомбинантных ДНК. Выбранная тема безусловно является актуальной, поскольку в настоящее время генно- инженерные препараты используются в терапии широкого ряда заболеваний, как широко распространенны, так и редких, в том числе орфанных.

Причем, по данным ГРА и ЕМА количество новых зарегистрированных по всему миру генно-инженерных лекарственных препаратов увеличивается гораздо быстрее, чем препаратов, полученных традиционными способами. Безусловно удачно в роли объектов исследования автором были выбраны активные фармацевтические субстанции генно-инженерного инсулина человека и генно-инженерного гистона Н1,3 человека. Лекарственные препараты на основе генно-инженерного человека инсулина и его аналогов используются для лечения диабета, в том числа и второго типа. Препараты на основе генно-инженерного гистона Н1.3 используются для лечения ряда онкологических заболеваний, в частности, неходжкинских лимфом При этом штаммом-продуцентом исследуемых фармацевтических субстанций является Е.сой., что позволяет применять разработанные автором общие методические подходы для метода ПЦР в реальном времени различными производителями биофармацевтических субстанций.

Важным моментом является факт успешного внедрения разработанных методик в технологическое производство и применение методик при обнаружении остаточных ДНК и белков в активных фармацевтических субстанциях. Кроме того, ведущими фармакопеями, в том числе Фармакопеей США, вводятся новые фармакопейные статьи, рассматривающие методические аспекты определения остаточной ДНК штамма-продуцента и остаточных белков штамма продуцента в биотехнологических препаратах.

Все перечисленные факты несомненно подтверждают практическую значимость диссертационной работы. Научная новизна работы диссертанта состоит в разработке праймеров к геномной ДНК штамма-продуцента - фрагменту гена 1бБ РНК Е.с01~'. Что является весомой альтернативой широко принятому методу ПЦР на основе праймеров к плазмидной ДНК штамма, поскольку геномной ДНК в клетке, как минимум, на порядок больше, по сравнению с плазмидной ДНК. Таким образом, разработанный метод позволяет значительно повысить чувствительности методики ПЦР в реальном времени„а именно в 30 раз. Что является неоспоримым успехом автора.

Автореферат полностью отражает суть работы, в экспериментальной части рассмотрены современные методы исследования, результаты и выводы четко изложены, логично обоснованы и не вызывают сомнений. Опубликованные работы в полной мере раскрывают содержание диссертационной работы. В заключение можно с уверенностью отметить, что поставленные Ковалевой Е.В.

цели были достигнуты в полном объеме. Задачи, поставленные перед исследователем, полностью решены, а представленные в завершении работы выводы обобщают основные положения, вынесенные на защиту. является законченной научно- 2 Диссертация Ковалевой Е.В. «Разработка и применение методов ПЦР и ИФА для анализа остаточной ДНК и белков штаммов-продуцентов в биофармацевтических субстанциях» Главный эксперт лаборатории биотехнологических препаратов Испытательного центра экспертизы лекарственных средств ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России ~ЯЩ швец с.В.

кандидат химических наук Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения России (ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России) 127051е г. Москва, Петровский бульвар, д. 8, стр. 2 Тел.: (495) 234-61-06, 234-61-04 Яже1з®ехргпес1.гц Подпись Швеца С.В. удостоверя Ученый секретарь ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава Ро доктор медицинских наук, профе ' ") ., ец:::ве ф тл.' Яворский А.Н.

квалификационной работой и соответствует и. 9 «Положения о порядке присуждения ученых степеней». В ней представлена разработка и технологическое внедрение в опытное биотехнологическое производство чувствительных и специфичных методов. Полученные результаты представляют важность для методических подходов к оценке фармакопейных показателей и методов контроля качества лекарственных средств. Автор диссертационной работы Ковалева Е.В. несомненно заслуживает присуждения ученой степени кандидата химических наук по специальности 03.01.06 — Биотехнология (в том числе бионанотехнологии). .